东北虎微卫星DNA遗传标记的筛选及在亲子鉴定中的应用

利用18个家猫微卫星基因座，在东北虎(Panthera tigris sibilia)DNA中扩增结果有4个基因座没有产物，8个基因座为单态，6个基因座为多态性。同时利用苏门答腊虎的微卫星序列设计了8对引物，在东北虎DNA中有4对具有多态性。微卫星基因座的多态性百分率为38．5％。在供试的27只东北虎中，发现等位基因间的变异均为偶数碱基长度变化，对有准确谱系记录的个体研究表明，这10个微卫星DNA遗传标记符合孟德尔遗传规律，所以这些微卫星DNA可以有效的应用于东北虎的亲子鉴定。利用这10对多态性引物，我们成功地鉴定了7个父子关系不清的后代。收集的样品包括23只毛发样品和4只血液样品，实验结果表明，毛发和血液样品均可以得到清晰的微卫星条带[动物学报49(1)：118—123．2003]。     

中国鹤类现状及其保护对策

中国有9种鹤类,其中灰鹤（Grus grus）、黑颈鹤（Grus nigricollis）、丹顶鹤（Grus japonensis）、白枕鹤（Grus vipio）、赤颈鹤（Grus antigone）、蓑羽鹤（Anthropoides virgo）在中国进行繁殖。中国政府为保护鹤类采取了大量有效措施。本文在结合当前鹤类数量和保护现状的基础上,对中国鹤类的保护对策进行探讨。     

热点地区与GAP分析研究进展

生物多样性保护的优先性研究是目前资且机构和保护专家关注的热点,热点载欠 ＧＡＰ分析是进行生物多样优先笥分析的两种方法。热点地区分析是根据物种丰富度和特有度,探讨怎样以最小的代价,最大限度地保护区域的生物多样性。ＧＡＰ分析综合考虑区域阱生脊椎动物物种、土地覆主土地所有权和保护状况等方面信息,在保护土地管理实践中,使具有代表性的植被类型、重要物种都得到保护。本文介绍了热点地区和ＧＡＰ分析的概念、基本假     

海南尖峰岭国家级自然保护区森林动态监测样地鸟类和兽类多样性

2016年8月至2019年2月, 我们利用红外相机对海南尖峰岭60 ha森林动态监测样地的鸟类和兽类进行了调查。共在79个位点上布设了红外相机, 累积27,848个相机日, 获得可鉴定到物种的独立有效照片15,320张。经鉴定, 共拍摄到46种野生动物, 包括16种兽类(隶属于6目11科)和30种鸟类(隶属于8目16科)。其中, 属于国家I级重点保护的野生动物有3种, 即海南孔雀雉(Polyplectron katsumatae)、海南山鹧鸪(Arborophila ardens)和中华穿山甲(Manis pentadactyla), 属于国家II级重点保护的野生动物有6种, 分别是猕猴(Macaca mulatta)、巨松鼠(Ratufa bicolor)、红原鸡(Gallus gallus)、白鹇(Lophura nycthemera)、松雀鹰(Accipiter virgatus)和蓝背八色鸫(Pitta soror)。拍摄率最高的前5种兽类依次是帚尾豪猪(Atherurus macrourus)、红腿长吻松鼠(Dremomys pyrrhomerus)、白腹巨鼠(Leopoldamys edwardsi)、赤腹松鼠(Callosciurus erythraeus)和赤麂(Muntiacus vaginalis);前5种鸟类依次是白鹇、海南孔雀雉、蓝背八色鸫、海南山鹧鸪和栗颊噪鹛(Garrulax castanotis)。本研究补充调查了海南尖峰岭国家级自然保护区兽类和鸟类的多样性, 与之前的基线调查对比分析了大样地内野生动物物种及其相对多度的动态变化, 可为保护区生物多样性监测方案设计和保护对策的制定提供科学依据。     

分子生态学技术及其在环境微生物研究中的应用

分子生态学作为一门新兴的学科已经成为国内外科学家关注和研究的热点。目前的分子生态学技术主要有核酸杂交分析技术、特异性PCR扩增技术、DNA序列分析、基因芯片技术等。这些技术在环境微生物研究中的应用主要包括对微生物多样性的研究、种群结构和动力学的研究、代谢活性的研究以及在全球气候变化中对微生物影响的研究。最后,对环境微生物的分子生态学研究进行了展望。     

Cloning,Characterization and Primary Function Study of a Novel Gene,Cymg1,Related to Family 2 Cystatins

Cystatins are cysteine proteinase inhibitors,We found two expression sequence tags (ESTs),CA463109 and AV042522,from a mouse testis library using Digital differential display (DDD).By electricalhybridization,a novel gene,Cymgl(GenBank accession No.AY600990),which has a full length of 0.78 kb,and contains four exons and three introns,was cloned from a mouse testis eDNA library.The gene is locatedin the 2G3 area of chromosome 2.The full eDNA encompasses the entire open reading frame,encoding 141amino acid residues.The protein has a cysteine protease inhibitor domain that is related to the family 2cystatins but lacks critical consensus sites important for cysteine protease inhibition.These characteristicsare seen in the CRES subfamily,which are related to the family 2 cystatins and are expressed specifically inthe male reproductive tract.CYMG1 has a 44%(48/108)identity with mouse CRES and 30%(42/140)identity with mouse cystatin C.Northern blot analysis showed that the Cymgl is specifically expressed inadult mouse testes.Cell location studies showed that the GFP-tagged CYMG 1 protein was localized in thecytoplasm of HeLa cells,lmmunohistochemistry revealed that the CYMG1 protein was expressed in mousetestes spermatogonium,spermatocytes,round spermatids,elongating spermatids and spermatozoa.RT-PCRresults also showed that Cymgl was expressed in mouse testes and spermatogonium.The Cymgl expressionlevel varied in different developmental stages:it was low 1 week postpartum,steadily increased 2 to 5 weekspostpartum,and was highest 7 weeks postpartum.The expression level at 5 weeks postpartum was main-tained during 13 to 57 weeks postpartum.The Cymgl expression level in the testes over different develop-mental stages correlates with the mouse spermatogenesis and sexual maturation process.All these indicatethat Cymgl might play an important role in mouse spermatogenesis and sexual maturation. Cystatins are cysteine proteinase inhibitors,We found two expression sequence tags(ESTs),CA463109 and AV042522,from a mouse testis library using Digital differential display (DDD).By electricalhybridization,a novel gene,Cymgl(GenBank accession No.AY600990),which has a full length of 0.78 kb,and contains four exons and three introns,was cloned from a mouse testis eDNA library.The gene is locatedin the 2G3 area of chromosome 2.The full eDNA encompasses the entire open reading frame,encoding 141amino acid residues.The protein has a cysteine protease inhibitor domain that is related to the family 2cystatins but lacks critical consensus sites important for cysteine protease inhibition.These characteristicsare seen in the CRES subfamily,which are related to the family 2 cystatins and are expressed specifically inthe male reproductive tract.CYMG1 has a 44%(48/108)identity with mouse CRES and 30%(42/140)identity with mouse cystatin C.Northern blot analysis showed that the Cymgl is specifically expressed inadult mouse testes.Cell location studies showed that the GFP-tagged CYMG 1 protein was localized in thecytoplasm of HeLa cells,lmmunohistochemistry revealed that the CYMG1 protein was expressed in mousetestes spermatogonium,spermatocytes,round spermatids,elongating spermatids and spermatozoa.RT-PCRresults also showed that Cymgl was expressed in mouse testes and spermatogonium.The Cymgl expressionlevel varied in different developmental stages:it was low 1 week postpartum,steadily increased 2 to 5 weekspostpartum,and was highest 7 weeks postpartum.The expression level at 5 weeks postpartum was main-tained during 13 to 57 weeks postpartum.The Cymgl expression level in the testes over different develop-mental stages correlates with the mouse spermatogenesis and sexual maturation process.All these indicatethat Cymgl might play an important role in mouse spermatogenesis and sexual maturation.     

三江源高寒草甸土固氮基因(nifH)的多样性和系统发育研究

首次利用PCR_RFLP和测序分析对位于青藏高原腹地的青海三江源保护区高寒草甸土壤微生物固氮基因（nifH）的多样性和系统发育进行了探讨。在2个样地中,共得到143个阳性克隆,用限制性内切酶MspⅠ和RsaⅠ进行RFLP分析后得到35个不同的RFLP谱带型,多样性为24.5%,其中ZD样品中获得82个阳性克隆和21个不同的RFLP谱带型,多样性为25.6％,而YS样品中获得61个阳性克隆和19个不同的RFLP谱带型,多样性为311％,2个样地中有5个相同的RFLP谱带型。在各样地都发现一个明显的优势种群,ZD样地的明显优势种群占克隆数的293%,YS的优势种群占克隆数的328%。对21个克隆进行了部分序列的测定,序列的相似性在71％～98％之间,在GenBank数据库中没有发现完全匹配的序列,因此这些序列可能代表着新的固氮生物株系。最后利用Clustal W与Mega软件和已有序列构建了系统发育树,结果发现,21个序列分为4个不同的簇,大部分的克隆与Proteobacteria的3个系统发育亚簇（α、β和γ）具有较高的相似性,其中主要的序列都落在第一和第二簇内。YS样地中的优势种群与α_Proteobacteria中的Rhodobacter sphaeroides具有较高的相似性,而ZD样地中的优势种群则与β_Proteobacteria中的Delftia tsuruhatensis具有较高的相似性。     

miR-769-3p 对甲型 H1N1流感病毒核蛋白表达的调控

目的:预测靶向甲型流感病毒核蛋白(NP)基的微小 RNA(miRNA),并检测其对 NP 表达的影响.方法:从miRBase 数据库中获取人成熟 miRNA 序列,利用 miRanda 软件预测潜在靶向流感病毒 A/FM/1/47(H1N1) NP 基的人 miRNA;通过双萤光素酶报告基系统及 Western 印迹验证所预测的 miRNA 对 NP 表达的影响.结果:用 miRanda软件在流感病毒 A/FM/1/47(H1N1) NP 基上预测得到分值及最小结合自由能均较好的 miR-769-3p;双萤光素酶报告基结果显示 miR-769-3p 能显著降低报告基载体萤光素酶的表达;Western 印迹结果显示 miR-769-3p 能明显抑制 NP 的表达,但突变 NP 基上的 miR-769-3p 结合位点后,miR-769-3p 不能抑制 NP 的表达.结论:miR-769-3p 可靶向流感病毒 A/FM/1/47(H1N1) NP 基并抑制 NP 的表达,为抗甲型流感病毒的 miRNA 药物研发提供了据和潜在药物靶标.     

利用分布有/无数据预测物种空间分布的研究方法综述

详细的物种地理分布信息是生态学研究和制定保护策略的基础。相比较于直接估测种群数量,获取物种分布的有/无数据更为实用。因此,利用分布有/无数据并结合环境变量建立模型预测物种空间分布的方法在近年来得到了长足发展,并被广泛应用。利用分布有/无数据预测物种分布,关键的步骤包括：1)构建总体概念模型,2)收集物种分布有/无数据,并准备环境变量图层;3)选择合适的统计模型和算法,以及4)对模型进行评估。概念模型提出研究假设,并确定数据收集及模型方法。收集物种分布数据有系统调查及非系统调查方法。筛选并准备与物种分布相关的环境变量,利用GIS工具处理,使之成为符合模型条件的具有合适的空间尺度的数字化图层。利用环境变量和物种分布有/无的数据,选择合适的方法及软件建立模型,并对模型进行检验和评估。我们总结了用于构建物种分布模型的不同算法和软件。本文将针对以上各个环节,阐述利用物种分布有/无数据进行研究所需要的技术细节,以期望为读者提供借鉴。