一种超高灵敏的埃博拉病毒胶体碳侧流免疫层析检测方法的建立

埃博拉出血热 (Ebola hemorrhagic fever, EHF) 由于其高感染性和高致死率特点,快速鉴别诊断并实施隔离是最有效的防止疫情扩散的措施。文中建立了一种可以快速、高灵敏筛查埃博拉病毒 (Ebola virus,EBOV)感染的现场检测技术,用碳纳米颗粒标记抗EBOV基质蛋白VP40兔多克隆抗体,组装成一种可在15 min内检测埃博拉病毒的胶体碳侧流免疫层析试纸条。将标记胶体碳颗粒的兔多抗喷涂于玻璃纤维素膜上制备碳标垫;以1 mg/mL的抗VP40单克隆抗体 (McAb,4B7F9) 和羊抗兔IgG,按照2 μL/cm的包被量印迹于硝酸纤维膜上,分别作为检测线与质控线,组装试纸条。该试纸条能够特异地检测EBOV重组VP40蛋白、EBOV病毒样颗粒(Virus-like particles,VLP) 和灭活EBOV,而与马尔堡病毒样颗粒 (MARV-VLP)、流感病毒A/PR/8 (IAV/PR/8)、黄热病毒 (YFV-17D)、登革热病毒2型 (DEN2) 无交叉反应,显示良好的特异性,对1 500份阴性血清进行检测,假阳性率为1.3‰,仅为WHO授权ReEBOV?胶体金试纸的1/100;该胶体碳试纸条检测灭活EBOV的最低检出限为100 ng/mL (相当于106 copies/mL),远优于ReEBOV?胶体金试纸条检出限 (10 μg/mL,相当于108 copies /mL)。热稳定性评价显示试纸条可在室温稳定保存1年以上。文中建立的EBOV胶体碳免疫层析试纸条能够快速、超高灵敏、特异地检测EBOV,为现场快速筛查EBOV感染提供一种新方法。     

AECOPD患者NPPV不同压力支持水平对腹内压力的影响

目的:探讨慢性阻塞性肺病急性加重期(AECOPD)患者无创正压通气(NPPV)不同压力支持水平对腹内压力的影响。方法:收集我院收治的AECOPD患者150例,随机分为A、B、C三组,每组各50例。给予所有患者无创机械通气,A、B、C组患者分别给予吸气相正压(IPAP)值为12 cm H2O、16 cm H2O、20 cm H2O,其他参数一致,通气治疗结束后,对所有患者的腹内压、不良反应发生率、呼吸困难程度以及动脉血气水平进行检测并比较。结果:通气后,A、B、C三组患者腹内压水平与通气前相比升高(P0.05);与A、B组患者相比,C组患者腹内压水平较高(P0.05);通气后,A、C两组患者的不良反应发生率与B组相比较高(P0.05);通气后,B组患者呼吸困难评分与A、C组相比较高(P0.05)。治疗后,三组患者的Pa O2与通气前相比升高,Pa CO2降低(P0.05),与A、C组相比,B组患者的Pa O2水平较高,Pa CO2较低(P0.05)。结论:AECOPD患者通气后腹内压水平随NPPV压力的升高而升高;中等压力的无创正压通气能够改善AECOPD患者的呼吸困难以及动脉血气水平,降低不良反应发生率。     

吻合器痔上黏膜环形切除术对混合性痔的远期临床疗效研究

目的:探讨吻合器痔上黏膜环形切除术治疗混合性痔的远期临床疗效。方法:选取我院收治的混合性痔患者90例,随机分为对照组及实验组,对照组以传统痔体剥离结扎术方案治疗,实验组以吻合器痔上黏膜环形切除术治疗。比较两组患者手术时间、出血量、住院时间、止痛药量、术后出血量、瘢痕增生、肛门功能及术后6到12个月的复发率等情况,其数据结果应用统计学软件SPSS 17.0处理。结果:与对照组比较,实验组术中时间、出血量、住院时间、止痛药量、瘢痕增生及复发率均低于对照组(P0.05),实验组肛门功能高于对照组(P0.05)。结论:吻合器痔上黏膜环形切除术对肛管黏膜损伤小,痔体切除完全,愈合迅速,吻合钉固定可靠,瘢痕规整,愈后康复痛苦小,远期复发率低,临床疗效理想,可作为临床治疗的首选方案。     

牛奶: 戊型肝炎病毒新的传播途径

正近期,黄芬实验室在Hepatology发表了一篇题为"Excretion of Infectious Hepatitis E Virus Into Milk in Cows Imposes High Risks of Zoonosis"的文章[1],首次发现牛奶能够作为戊型肝炎病毒(HEV)的一种跨物种感染途径,存在将HEV传播给人类的风险.该研究通过对中国云南省大理市某农村(该地区一直维持传统的家庭混养模式)的HEV流行情况调查显示,该地区奶牛HEV RNA的阳性率     

携带EGFP基因的戊型肝炎病毒重组质粒的构建及其感染性的验证

为了构建携带增强型绿色荧光蛋白(Enhanced green fluorescent protein,EGFP)基因的戊型肝炎病毒(Hepatitis E virus,HEV)重组质粒,转染人肺癌细胞A549细胞验证其感染性,PCR法分两段扩增HEV全基因组序列和EGFP基因序列,将EGFP报告基因插入到HEV ORF2基因下游,并克隆到体外转录表达载体pGEM-7Zf(+)上。然后利用脂质体转染法将重组质粒转入A549细胞,24h后在荧光显微镜下观察EGFP的表达;转染72h后,利用免疫荧光法检测HEV ORF2蛋白的表达。转染7d后将发生病变的A549细胞收集作为接种物,接种A549细胞验证携带EGFP的HEV-EGFP重组病毒的感染性。结果显示经酶切和测序鉴定携带EGFP的HEV重组表达质粒pGEM-HEV-EGFP构建成功;EGFP基因与HEV在A549细胞中可融合表达;携带EGFP的HEV重组表达质粒转染A549细胞7d后出现病变,并且连续传代3代仍具有感染性。本研究成功构建了携带EGFP的HEV全基因组重组质粒pGEM-HEV-EGFP,并成功感染A549细胞,为进一步研究HEV的复制机制及致病机理奠定基础。     

除草剂氟磺胺草醚降解菌FB8的分离鉴定与土壤修复

【目的】从氟磺胺草醚污染土壤分离高效降解菌株,进行分类学鉴定、降解特性及土壤修复能力初步研究,为氟磺胺草醚污染土壤微生物修复提供新的菌株。【方法】通过形态特征、生理生化特征和16S rRNA序列分析方法进行菌株鉴定;通过农药初始浓度、pH值、温度等环境因素的研究得到菌株的最适生长条件;通过敏感作物和靶标杂草的盆栽生测试验,验证菌株对氟磺胺草醚污染土壤的修复能力。【结果】本试验从黑龙江省长期施用氟磺胺草醚的大豆田地中分离出一株能以氟磺胺草醚为唯一碳源生长的细菌FB8,初步鉴定为假单胞菌属(Pseudomonas),该菌株在96 h内对500 mg/L氟磺胺草醚的降解率高达86.75%,其最适生长条件为500 mg/L农药初始浓度、初始pH6.0-8.0、35-37℃,该菌株处理30 d能够显著恢复敏感作物玉米和高粱的各项生物量指标,对氟磺胺草醚浓度为5 mg/kg的土壤修复效果明显。【结论】从黑龙江省污染土壤中筛选得到的高效降解氟磺胺草醚的门多萨假单胞菌Pseudomonas mendocina FB8,盆栽生测试验表明该菌株具有很好的土壤修复作用,可为氟磺胺草醚的生物修复研究提供适宜的菌种资源。     

调控胞质分裂的中心体相关蛋白Cep55

中心体是哺乳动物细胞内的微管组织中心,参与纺锤体的装配,因此在胞质分裂中起重要调控作用。最新发现的中心体相关蛋白Cep55(centrosomal protein,55kD)属于卷曲螺旋(coiled-coil)蛋白质家族成员,其基因定位于人染色体10q23.33。该蛋白质在多种正常组织及肿瘤细胞中均有表达,与细胞周期中的中心体和中间体偶联,被Erk2、Cdk1及Plk1共同磷酸化后发挥细胞周期调控作用。其研究对细胞周期的调控及对肿瘤发生的认识将产生极其重要的意义。     

精卵质膜融合过程中卵膜上的候选分子

受精过程中精卵质膜融合分子机制的研究一直备受关注。随着基因剔除技术的发展及众多新技术的应用,人们发现这一过程涉及多种分子,目前对卵膜上的CD9、糖基化磷脂酰肌醇锚定蛋白和整合素研究较多。现从细胞层次和分子层次上总结三者在精卵质膜融合方面的实验及结论,分析各个实验结果矛盾之处,讨论精卵质膜融合研究的前景。     

Survivin在细胞分裂中的作用

Survivin是凋亡蛋白抑制因子家族的一个新成员,它主要在细胞周期G2/M期表达,并有两种不同的亚细胞定位。Survivin与有丝分裂细胞周期的启动有关,并在有丝分裂中的中心体装配、纺锤体检验点的监控、胞质分裂等过程中发挥作用。Survivin在减数分裂中也有一定的作用,目前研究甚少。Survivin发挥功能的首要前提是通过主要的有丝分裂激酶p34cdc2-cyclinB1使Thr34磷酸化,其表达水平受很多因素的调节。     

甲胺磷对拟环纹豹蛛中肠蛋白消化酶活性影响的压电传感监测（英文）

利用压电体声波阻抗分析法实时动态监测了拟环纹豹蛛Pardosa pseudoannulata中肠蛋白消化酶对酪蛋白的酶促水解过程及不同浓度梯度（0.008%、0.016%、0.024%和0.032%）的甲胺磷农药对酶活性的影响,并用紫外分光光度法进行了验证。结果表明,合适低剂量(0.008%)的甲胺磷农药可显著地增强拟环纹豹蛛蛋白消化酶的活性,较高剂量(0.032%)的农药却显著抑制蛋白消化酶的活性,且水解过程稳态频移值可准确地反映酶活性与农药浓度的关系。本工作为研究低剂量农药增强蜘蛛控虫力的机理及酶活性的快速检测提供了一种可行的新方法。