包头泉山金矿浸矿酸性微生物群落优势度变化的比较研究

【目的】研究不同矿石组成对微生物群落结构的影响。【方法】选取包头泉山金矿的酸性矿坑水(Acid mine drainage,AMD)对4种不同组成的矿石样品进行浸矿,采用16S rRNA-PCR和RFLP相结合的方法,研究浸矿前后浸矿微生物种群优势度的变化情况。【结果】所选取的3个酸性矿坑水考查点之间浸矿微生物的种类及数量相似度较大,浸矿微生物结构相对变化度不大。H71和F11相对其他两个样品的群落结构差异较大,而J72和S71几乎一样,说明在钾长型和石英型矿石的选择压力下,浸矿微生物的被选择趋势是大致相同的。【结论】浸矿前后样品中浸矿微生物的系统发育分析结果表明,所考查的克隆子的序列可分为两大分支:Acidithiobacillus菌属和一个相对独立的菌属,且这两个分支内部菌株之间的发育距离较近。     

构象电子系统的集体激发,跃迁过程和合作现象

本文给出了一套对分子生物学问题进行理论分析的方法并列举简单应用的实例.以分子构象和前沿电子为变数,引入了构家电子场,给出了研究其集体激发的Green函数途径,指出生物凝聚态中存在新型局域激发.导出了构象电子跃迁哈密顿量,特别研究了光致构家电子跃迁,指出低阶跃迁为非Franck—Condon型的.研究了链式分子的合作现象,阐明了振动激发对于实现合作转变的重要性及转变中可能存在反常温度依赖.     

布鲁氏菌rOmp3148-74-BLS蛋白的多克隆抗体制备与检测

目的:研究布鲁氏菌Omp31分子的免疫原性.方法:利用IPTG诱导rOmp3148-74-BLS融合重组蛋白表达,经过His-tag镍柱进行亲和纯化之后,作为抗原免疫家兔制备多克隆抗体.结果:rOmp3148-74-BLS重组蛋白能够被大肠杆菌正确表达,而且,能够作为有效的抗原刺激家兔产生可以相互识别的多克隆抗体.结论:Omp31分子具有较好的免疫原性,可以引起较强的免疫反应.     

布鲁氏菌rOmp31_(48-74)-BLS重组载体的构建与苜蓿的转化

将布鲁氏菌rOmp3148-74-BLS基因转入紫花苜蓿中苜一号,最终获得转基因苜蓿。本试验利用不依赖于连接反应的克隆(Ligation-Independent Cloning,LIC)方法将布鲁氏菌rOmp3148-74-BLS基因克隆到植物表达载体pJG045上,并利用三亲本杂交的方法转化农杆菌AGL0。最后通过农杆菌介导法将该基因转化紫花苜蓿中苜一号。经PCR鉴定,筛选出转基因苜蓿植株。本试验为今后布鲁氏菌转基因植物疫苗的研发奠定了理论和实验基础。     

布菌Omp31-BLS融合肽抗血清的免疫学性质研究

目的:检测Omp31-BLS融合肽抗血清的质量。方法:利用间接酶联免疫吸附实验、免疫双扩散实验以及凝集实验检测Omp31-BLS融合肽制备的抗血清的质量。结果:Omp31-BLS融合肽抗血清可以较好地识别Omp31-BLS融合肽蛋白质,而且,当抗体被稀释4 000倍的时候,酶联免疫吸附实验测定的OD值为1.2,明显高于其他3个对照组。在免疫双扩散实验中,抗血清被稀释64倍的时候,仍然能够出现明显的免疫沉淀线。此外,凝集实验也反映出Omp31-BLS融合肽抗血清可以与Omp31-BLS融合肽抗原发生强烈的凝集作用。结论:Omp31-BLS融合肽抗血清可以较好地识别对应的蛋白质抗原,二者之间存在明显的抗原-抗体反应,为利用Omp31-BLS融合肽进行布鲁氏菌病的血清学诊断提供了理论基础和技术支持。     

Survivin在细胞分裂中的作用

Survivin是凋亡蛋白抑制因子家族的一个新成员,它主要在细胞周期G2/M期表达,并有两种不同的亚细胞定位。Survivin与有丝分裂细胞周期的启动有关,并在有丝分裂中的中心体装配、纺锤体检验点的监控、胞质分裂等过程中发挥作用。Survivin在减数分裂中也有一定的作用,目前研究甚少。Survivin发挥功能的首要前提是通过主要的有丝分裂激酶p34cdc2-cyclinB1使Thr34磷酸化,其表达水平受很多因素的调节。     

生态约束下的湖泊旅游用地布局

为防止不合理的湖泊旅游开发引起湖滨湿地的侵占与破坏、湖泊水体污染等生态问题,以梁子湖旅游开发用地布局为例,采用GIS构建了基于最小累积阻力模型的湖泊景观生态安全格局,提出优先生态安全格局的湖泊旅游用地空间布局.研究区被划分为4类生态功能区.其中,核心保护区为“源地”景观区域,区内禁止新增旅游用地,现有的旅游基础设施用地应大部分拆除,其余需进行升级改造;生态缓冲区的阻力值在0 ～4562,区内禁止新增旅游用地,原有旅游用地需缩减规模,并尽可能将区内人文环境转换为自然环境,实现人类活动和“源地”保护的隔离;生态过渡区的阻力值在4562 ～30797,区内现有旅游用地呈片状分布,可适度增加旅游用地,重点发展沿湖生态农林观光旅游;人类活动区的阻力值在30797～97334,可作为湖泊旅游用地布局的重点区域.优先考虑景观安全格局的旅游用地布局是湖泊可持续发展的最佳选择.     

猪型布鲁氏菌rOmp3148-74-BLS融合肽的诱导表达与纯化

目的:为了研究布鲁氏菌Omp31分子的抗原性质,以及布鲁氏菌BLS蛋白质的聚合功能,通过融合PCR技术,制备布鲁氏菌Omp3148-74与BLS的融合蛋白质,并且进行蛋白质的纯化。方法:以猪型布鲁氏菌Omp31基因和BLS基因作为研究对象,通过融合PCR技术构建重组表达载体,IPTG诱导融合蛋白质表达之后,利用His-tag亲和层析柱进行亲和纯化。结果:Omp3148-74-BLS融合DNA长度为531 bp,编码177个氨基酸;加上原核表达载体上的His-tag标签,融合蛋白质的实际大小为25.07 kD,实验结果证实表达载体构建正确,重组表达正确。结论:通过融合PCR技术构建的重组子pET-28-a-Omp3148-74-BLS,可以在大肠杆菌中成功表达;His-tag亲和层析技术可以纯化到Omp3148-74-BLS融合蛋白,而且蛋白质纯度较高。     

两种小鼠卵母细胞的核成熟检验方法比较

将生发泡(GV)期小鼠卵母细胞置于M2培养液中培养,分别在培养0 h、4 h、8 h和12 h收集卵母细胞,采用SYTO染色和免疫荧光标记方法进行小鼠卵母细胞的核成熟检验,并将结果进行比较.可以发现:SYTO染色和免疫荧光标记方法都可用于小鼠卵母细胞的核成熟检验,二者的结果没有显著性差异,但是,SYTO染色法更为快速、简便、廉价,可用于活体染色,适合于大规模检测,可应用于哺乳动物卵母细胞的核成熟检验.