| 一种超高灵敏的埃博拉病毒胶体碳侧流免疫层析检测方法的建立 |
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| 引用本文： | 魏艳秋,段勇成,毕玉海,王萌,李云龙,王选,林玮,范文辉,王晶,刘文军,杨利敏.一种超高灵敏的埃博拉病毒胶体碳侧流免疫层析检测方法的建立[J].生物工程学报,2018,34(12):2025-2034. |
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| 作者姓名： | 魏艳秋 段勇成 毕玉海 王萌 李云龙 王选 林玮 范文辉 王晶 刘文军 杨利敏 |
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| 作者单位： | 1 中国科学院微生物研究所 病原微生物与免疫学重点实验室，北京 100101,2 广西大学 动物科学技术学院，广西 南宁 530004,1 中国科学院微生物研究所 病原微生物与免疫学重点实验室，北京 100101,1 中国科学院微生物研究所 病原微生物与免疫学重点实验室，北京 100101；3 中国科学院大学，北京 100049,1 中国科学院微生物研究所 病原微生物与免疫学重点实验室，北京 100101,1 中国科学院微生物研究所 病原微生物与免疫学重点实验室，北京 100101,5 国为生物科技泰州有限公司，江苏 泰州 225300,1 中国科学院微生物研究所 病原微生物与免疫学重点实验室，北京 100101,4 中国计量科学研究院，北京 100029,1 中国科学院微生物研究所 病原微生物与免疫学重点实验室，北京 100101；3 中国科学院大学，北京 100049,1 中国科学院微生物研究所 病原微生物与免疫学重点实验室，北京 100101 |
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| 基金项目： | 国家科技重大专项 (No. 2016ZX10004222)，中国科学院重点部署项目 (No. ZDRW-ZS-2016-4-4) 资助。 |
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| 摘 要： | 埃博拉出血热 (Ebola hemorrhagic fever, EHF) 由于其高感染性和高致死率特点，快速鉴别诊断并实施隔离是最有效的防止疫情扩散的措施。文中建立了一种可以快速、高灵敏筛查埃博拉病毒 (Ebola virus，EBOV)感染的现场检测技术，用碳纳米颗粒标记抗EBOV基质蛋白VP40兔多克隆抗体，组装成一种可在15 min内检测埃博拉病毒的胶体碳侧流免疫层析试纸条。将标记胶体碳颗粒的兔多抗喷涂于玻璃纤维素膜上制备碳标垫；以1 mg/mL的抗VP40单克隆抗体 (McAb，4B7F9) 和羊抗兔IgG，按照2 μL/cm的包被量印迹于硝酸纤维膜上，分别作为检测线与质控线，组装试纸条。该试纸条能够特异地检测EBOV重组VP40蛋白、EBOV病毒样颗粒(Virus-like particles，VLP) 和灭活EBOV，而与马尔堡病毒样颗粒 (MARV-VLP)、流感病毒A/PR/8 (IAV/PR/8)、黄热病毒 (YFV-17D)、登革热病毒2型 (DEN2) 无交叉反应，显示良好的特异性，对1 500份阴性血清进行检测，假阳性率为1.3‰，仅为WHO授权ReEBOV?胶体金试纸的1/100；该胶体碳试纸条检测灭活EBOV的最低检出限为100 ng/mL (相当于106 copies/mL)，远优于ReEBOV?胶体金试纸条检出限 (10 μg/mL，相当于108 copies /mL)。热稳定性评价显示试纸条可在室温稳定保存1年以上。文中建立的EBOV胶体碳免疫层析试纸条能够快速、超高灵敏、特异地检测EBOV，为现场快速筛查EBOV感染提供一种新方法。
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| 关 键 词： | 埃博拉病毒，基质蛋白，单克隆抗体，胶体碳，侧流免疫层析，现场快检 |
| 收稿时间： | 2018/3/9 0:00:00 |
A novel carbon nanoparticle probe-based ultrasensitive lateral flow assay for rapid detection of Ebola virus |
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| Yanqiu Wei,Yongcheng Duan,Yuhai Bi,Meng Wang,Yunlong Li,Xuan Wang,Wei Lin,Wenhui Fan,Jing Wang,Wenjun Liu and Limin Yang.A novel carbon nanoparticle probe-based ultrasensitive lateral flow assay for rapid detection of Ebola virus[J].Chinese Journal of Biotechnology,2018,34(12):2025-2034. |
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| Authors: | Yanqiu Wei Yongcheng Duan Yuhai Bi Meng Wang Yunlong Li Xuan Wang Wei Lin Wenhui Fan Jing Wang Wenjun Liu and Limin Yang |
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| Institution: | 1 CAS Key Laboratory of Pathogenic Microbiology and Immunology, Institute of Microbiology, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100101, China,2 College of Animal Science and Technology, Guangxi University, Nanning 530004, Guangxi, China,1 CAS Key Laboratory of Pathogenic Microbiology and Immunology, Institute of Microbiology, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100101, China,1 CAS Key Laboratory of Pathogenic Microbiology and Immunology, Institute of Microbiology, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100101, China; 3 University of Chinese Academy of Sciences, Beijing 100049, China,1 CAS Key Laboratory of Pathogenic Microbiology and Immunology, Institute of Microbiology, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100101, China,1 CAS Key Laboratory of Pathogenic Microbiology and Immunology, Institute of Microbiology, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100101, China,5 Goodwe Biotechnology Taizhou Co., Ltd., Taizhou 225300, Jiangsu, China,1 CAS Key Laboratory of Pathogenic Microbiology and Immunology, Institute of Microbiology, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100101, China,4 National Institute of Metrology, Beijing 100029, China,1 CAS Key Laboratory of Pathogenic Microbiology and Immunology, Institute of Microbiology, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100101, China; 3 University of Chinese Academy of Sciences, Beijing 100049, China and 1 CAS Key Laboratory of Pathogenic Microbiology and Immunology, Institute of Microbiology, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100101, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Ebola virus matrix protein monoclonal antibodies colloidal carbon lateral flow immunochromatography POC |
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