MACC1蛋白在食管癌中的表达及其临床意义

目的：探讨结肠癌转移相关基因1（metastasis—associated in colon cancer-1,MACCl）在食管癌组织中的表达及其临床意义。方法：采用免疫组化EnVinsion法检测MACCl蛋白在88例食管癌组织中的表达,统计学分析MACCl蛋白在不同病理分级、TNM分期中表达的差异性。结果：免疫组化结果显示MACCl蛋白的阳性表达主要位于胞浆中。MACCl蛋白在食管癌组织中的总阳性率为88．64％;在I、II、Ⅲ级食管癌组织中的阳性率分别为14．29％、93．65％、100％,经Kruskal．WallisH检验差异性非常显著（P=0．0000）;在I、IIa、IIb、Ⅲ期食管癌中的阳性率分别是16．67％、89．47％、100％、100％,经Kruskal．WallisH检验差异性非常显著（P=0．0000）。结论：MACCl蛋白在食管癌中呈过度表达,其表达与病理分级、TNM分期相关,提示MACCl可能在食管癌的发生、发展中起重要作用。MACCl蛋白可能成为检测食管癌的发病及判断预后的生物学指标之一。     

Survivin与VEGF在良、恶性胃溃疡组织中的表达及研究

目的:研究凋亡基因生存素(Survivin)及血管内皮生长因子(VEGF)在良、恶性胃溃疡中的表达及二者在溃疡型胃癌中的表达与临床病理特征之间的关系,分析二者在胃癌发生发展中的作用和在胃癌中表达的相关性。方法:应用免疫组化S-P染色检测Survivin及VEGF在良性胃溃疡,胃溃疡伴中-重度不典型增生和溃疡性胃癌中的表达,结合临床病理特征进行相关分析。结果:Survivin及VEGF在良性胃溃疡中的表达率分别为16.2%、24.3%,在胃溃疡伴中-重度不典型中的表达率分别为52.3%、45.5%,在溃疡型胃癌中的表达率分别为71.4%、55.4%,差异具有显著性(P0.01);Survivin和VEGF的表达与溃疡型胃癌的浸润深度、淋巴结转移、TNM分期具有相关性。Survivin和VEGF的表达亦呈正相关。结论:Survivin基因在溃疡型胃癌组织中的表达显著增高,是胃癌演变进程中的重要步骤,过表达Survivin可能提示预后不良。Survivin对胃癌的诊断及预后有潜在的应用价值。Survivin和VEGF在溃疡型胃癌的发生发展中起协同作用,动态随访二者对胃溃疡的演变可能有一定的价值,可作为判断肿瘤进程和浸润转移的生物学指标。Survivin及VEGF的联合检测可能对胃癌的综合治疗提供理论依据,对其进行深入研究有望为胃癌的诊疗开辟新的天地。     

脾加骨髓细胞移植治疗小鼠大肠癌的实验研究

目的:探讨半相合脾加骨髓细胞移植治疗小鼠大肠癌的效果及其对嵌合体水平和移植物抗宿主病(GVHD)的影响。方法:以接种CT26大肠癌细胞的BALB/c×C57BL/6杂交Fl代雌性小鼠为受鼠,以健康雌性Fl、雄性C57BL/6、雄性C3H小鼠为MHC全相合、半相合、不相合供鼠,观察移植后的抑瘤情况;另设5只化疗联合半相合脾加骨髓细胞移植的小鼠为监测组,用来作嵌合体的分析,观察各组GVHD的情况。结果:经化疗预处理的脾加骨髓细胞移植组小鼠肿瘤明显缩小,与单纯化疗未进行移植组比较,差异具有统计学意义(P0.05);化疗联合半相合脾加骨髓细胞移植的小鼠于移植3周后达完全供者植入,于移植后第10天左右出现纳差、倦怠、步态不稳、脱毛、腹泻、体重明显下降等GVHD的症状。结论:化疗预处理联合脾加骨髓细胞移植能对CT26大肠癌细胞产生GVT效应,并伴随着GVHD及嵌合率的变化。     

登革病毒衣壳蛋白在大肠杆菌中的表达及其自组装活性的研究

采用高保真RT-PCR自登革2型病毒43株基因组RNA中扩增全长C基因及缺失羧基端Cv片段,分别构建可表达C及Cv的重组质粒pLEX—C和pLEX—Cv,转化E．coliGI724后用色氨酸诱导表达。经SDS—PAGE分析,表达的C及Cv蛋白相对分子质量分别约为12000和10000,分别约占菌体蛋白总量的19％和13％。Western印迹检测表明重组表达的C蛋白均可被特异识别登革病毒衣壳蛋白的单克隆抗体特异识别。表达的蛋白经过硫酸铵沉淀和蔗糖密度梯度离心后,通过琼脂糖凝胶电泳和负染电镜均未能检测到衣壳样颗粒的存在,说明登革病毒衣壳蛋白可能不具体外自组装活性。     

提高PCR产物的几种有效方法

结合作者的工作实际 ,着重介绍了有效提高PCR产物的几种方法 :如怎样高效快速地设计PCR引物 ,怎样尽快确定PCR反应的最适退火温度 ,如何提高GC富集区的扩增效率等 ,为分子生物学工作者提供一些可以借鉴的方法及经验。     

点突变Pro229Ser和Glu243Gly对耐热邻苯二酚2，3—双加氧酶性质的影响

用PCR随机诱变方法,研究氨基酸置换对耐热邻苯二酚2,3-双加养酶性质的影响。比较分析了突变体ro229Ser和Glu243Gly与野生型酶的酶学性质。结果显示点突变Pro229→Ser或Glu243→Gly并未改变酶的最适反应温度（均为60℃）;突变体Pro229Ser（Kcat／Km＝4.89±0.01×10     

登革2型PrM基因的重组病毒对不同型别登革病毒复制的阻断作用

观察登革 2型PrM基因的pSFV重组甲病毒抗该型病毒的作用 ,进一步探讨登革 2型PrM基因的这种重组病毒对其它 3个血清型登革病毒复制的阻断作用 .采用体外转录和电穿孔 ,分别将构建的含正、反义PrM基因的重组质粒DNA和辅助载体DNA转录成RNA ,然后将这两种RNA共转染BHK细胞 ,进而包装成重组病毒颗粒 .再将激活的重组病毒感染细胞 ,分别用不同型病毒进行攻击 .然后通过免疫荧光法 ,观察对登革病毒复制的阻断作用 .结果表明 ,含登革 2型PrM基因的重组病毒不仅可阻断登革 2型病毒的复制 ,同样具有抑制其他 3个型病毒复制的能力 ,且抗登革 1、4型病毒的复制作用强于抗登革 3型病毒的作用 .用 10 3 TCID50 剂量的登革病毒攻击 ,含反义PrM基因的重组病毒可完全阻断登革 1、3、4型病毒的复制 .但含正义PrM基因的重组病毒对登革 3型病毒的复制不能完全阻断 .为探讨登革病毒防治新途径奠定了基础     

梓醇对鱼藤酮损伤小鼠的记忆、抗氧化能力的影响及安全性评价

目的:研究梓醇对鱼藤酮损伤小鼠的学习记忆能力及皮层抗氧化系统的影响,并对其安全性进行评价.方法:腹腔注射鱼藤酮建立小鼠皮层抗氧化系统损伤模型,腹腔注射给药21 d后进行Y迷宫试验,再测定各组小鼠皮层谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、谷胱甘肽S-转移酶(GST)、丙二酫(MDA)、谷胱甘肽(GSH)水平;梓醇安全性评价采取小鼠急性毒性试验和大鼠长期毒性试验.结果:梓醇能够改善小鼠的迷宫成绩,增强GSH-PX活性和GSH含量,降低GST活性和MDA含量,抑制LDH的释放.小鼠腹腔注射给药梓醇的LD50为206.5mg/kg.;大鼠尾静脉注射90天,未见动物出现血液学、血液生化及主要脏器的毒性变化.结论:梓醇能改善鱼藤酮损伤小鼠的记忆能力,减轻皮层氧化应激损伤;长期使用无明显的毒副作用.     

肺活检材料的4种肿瘤标记物表达及与肺癌预后的关系

应用增殖细胞核抗原 （ＰＣＮＡ）、ｒａｓ－ Ｐ２１、Ｐ５３ 单克隆抗体和ＣｅｒｂＢ２ 多克隆抗体, 对７１ 例肺癌的纤支镜活检标本和１０ 例正常肺组织进行免疫组织化学染色研究。结果发现： １０ 例正常肺组织均为阴性表达。７１ 例肺癌中, 上述４ 种抗体的阳性表达率分别为： ７０４２％ 、８０２８％ 、５６３４％ 和８１６９％ 。除ＣｅｒｂＢ２ 与肺癌分型相关外, 均与肺癌分型、分化及ＴＮＭ 分期无关。但与预后均呈负相关。结果表明： 上述４ 种抗体是有效的、可作为判断肺癌预后的肿瘤标记物     

新疆北鲵乳酸脱氢酶同工酶的研究

应用聚丙烯酰胺凝胶盘电泳技术,对珍稀动物新疆北鲵(RanodonsibiricusKessler)十二种组织的乳酸脱氢酶(LDH)同工酶进行了研究。通过对同工酶谱带OD值及相对活力的分析,得出三点结论。