基于TaqMan探针的蜜蜂囊状幼虫病病毒荧光PCR检测方法的建立和应用

为建立快速有效的蜜蜂囊状幼虫病检疫方法, 依据TaqMan荧光标记探针技术原理, 针对蜜蜂囊状幼虫病病毒保守序列, 设计出一对特异性引物和一条探针, 建立了一种快速检测蜜蜂囊状幼虫病病毒的荧光PCR方法。该方法对蜜蜂囊状幼虫病的检测具有较好的特异性, 与蜜蜂急性麻痹病病毒、蜜蜂慢性麻痹病病毒、蜜蜂残翼病病毒和黑蜂王台病病毒之间均无交叉反应。检测灵敏度可达1.0×10²拷贝/μL阳性质粒, 可对低病毒含量的样品进行准确检测。重复性和稳定性试验结果显示, 变异系数为1.6%, 说明该方法具有较好的重复性和稳定性。应用该方法对蜜蜂及蜂制品进行检测, 结果显示所建立的荧光PCR检测方法4 h内即可报告检测结果, 该方法具有快速、灵敏、特异及重复性好等优点, 适用于蜜蜂及其制品中蜜蜂囊状幼虫病病毒的快速检疫。     

我国部分鸡源H9N2亚型流感病毒NS1基因序列分析

对1996年至2001年间自我国部分养鸡场发病鸡或死亡鸡分离鉴定的8株H9N2亚型禽流感病毒的非结构蛋白基因(NS1)进行了扩增和序列测定,并分析和比较了其核苷酸和氨基酸的同源性。结果表明, NS1基因核苷酸和氨基酸同源性分别为96.5%～99.5% 和94.5～98.6%, 说明NS1基因在遗传进化上高度保守,稳定遗传。与中国香港、韩国、巴基斯坦及人源H9N2分离株相比较,发现中国大陆的鸡源H9N2分离株的NS1基因在其羧基端缺少13个氨基酸。系统进化树分析表明,该8株病毒的NS1基因属于相同的进化分支,而且中国的早年分离株A/chicken/Beijing/1/94位于该进化分支的根部,暗示这些分离株的NS1基因是由A/chicken/Beijing/1/94演化而来;尚未发现NS1基因属于A/quail/Hong Kong/G1/97like分支的分离株。同时,系统进化树也说明了我国的H9N2分离株与韩国、巴基斯坦等地的H9N2分离株隶属于不同的进化分支,H9N2亚型禽流感的发生和流行与地域有一定的相关性。     

H9N2亚型禽流感病毒非结构蛋白（NS1）基因的克隆与表达

The nostructural protein (NS1) encoded by gene 8 of the Influenza virus is present in cells infected with Influenza virus. In this study, NS1 protein gene of the Chicken influenza virus A/chicken/Beijing/2/97 (H9N2) strain was amplified by PCR. The fragment contains EcoR Ⅰ and Xho Ⅰ restriction enzyme sites at the ends. The amplified product was cloned into the expression vector pET-30(c). Recombinant plasmid pET/NS 1 was transformed into E.coli BL21 (DE3) competent cells and induced with 0.4 mmol/L IPTG the target protein was produced, the molecular weight of the expressed protein was 30 kDa as expected. Western-blot test indicated that the expressed protein can react with the NS 1 monoclonal antibody of the influenza virus. This study laid an important foundation for H9N2 subtype avian influenza surveillance in China.     

应用PCR技术检测串珠镰刀菌

串珠镰刀菌(Fusarium moniliform)是一种危害严重、在世界各地广泛流行的植物病原真菌,当前对串珠镰刀菌的鉴定主要根据其菌丝体及再生菌丝的形态结构学特征及染病作物的病害症状来进行鉴定。这些鉴定方法相对简单并在很大程度上依赖于经验,受主观因素影响较大。采用串珠镰刀菌种特异性的寡聚核苷酸为引物,运用PCR技术对串珠镶刀菌进行检测是一种快速可靠的检测鉴定方法,它无需病原菌的分离培养纯化,能从感病的玉米组织中直接实现对串珠镰刀菌的快速检测。经对霉变玉米样品和玉米穗腐病组织的检测,证明该方法是一种快建、有效的方法,具有重要的实际应用价值。     

大肠杆菌O157:H7核酸探针检测方法的建立

目的：应用核酸探针方法快速检测大肠杆菌O157：H7。方法：通过使用吖啶酯标记的特异DNA探针方法检测大肠杆菌O157：H7,对此种方法的特异性、敏感性、准确性进行研究,比较该方法与传统国标法的检测结果。结果：核酸探针方法检测大肠杆菌O157：H7特异性以及敏感性强,检出大肠杆菌O157：H7菌液浓度最低限约为106cfu/ml,检测大肠杆菌O157：H7的结果与国标法相一致;对O157：H7鉴定时间仅需30min,简便快捷。结论：核酸探针方法可用于大肠杆菌O157：H7的快速检测。     

中国铗蠓属二新种(双翅目:蠓科)(英文)

本文描述铗蠓属二新种（岭南铗蠓 Ｆｏｒｃｉｐｍｙｉａ（Ｅｕｐｒｏｊｏａｎｎｉｓｉａ）ｌｉｎｇｎａｎｅｎｓｉｓ　Ｌｉｕ　ｅｔ　Ｙｕ和空洞铗蠓Ｆｏｒｃｉｐｏｍｙｉａ　（Ｆｏｒｃｉｐｏｍｙｉａ） ｃａｖａｔｕｓ Ｌｉｕ ｅｔ Ｙａｎ两性成虫的形态特征。岭南铗蠓雌虫触须第 ３节细长（ＰＲ＞ ３．５）,大颚无齿;雌虫阳茎中叶形状特异,端部钩状。空洞铗檬雄虫 ＡＲ ０．８０,前、中足淡色,中足仅股节和胫节部分棕色;雄虫阳茎中叶中部具明显的几丁质片。     

海南省鼠形动物体外寄生革螨的分析

1992年3～7月在海南省三亚市和通什市捕获12种鼠形动物,检获6种富生革螨。用定量分析方法分析了寄生革螨的群落结构。每棘厉螨是多种宿主体外的优势绒种。     

五种库蠓脂肪酸的研究

本文用气相色语法分析了不显库蠓(Culicoides obsoletus)、兴安库蠓(C, sinanoensis)、怒江库蠓(C.Nujiangensis)、灰黑库蠓(C.Pulicaris)和刺整库蠓(C.Punctatus)等5种库蠓雌虫脂 肪醛的组成和含量。 结果表明,5种库蠓均含有12-14种主要脂肪酸,并以棕榈油酸(C_16：1)、棕搁酸 (C_16：0)、油酸(C_18：1)、硬脂酸(C_18：0)含量最高,共占脂肪酸总量的70%以上。对主要脂肪酸的含量进行聚类分析,发现不显库蠓种团内任意两种库蠓间的欧氏距离小于不显库蠓种团种类与灰黑库蠓种团种类间的欧氏距离,说明脂肪酸的定性、定量分析结果对库蠓分类有一定的参考价值。     

缬沙坦改善小鼠动脉粥样硬化的作用机制研究

本研究通过给予动脉粥样硬化Apo E-/-小鼠不同剂量的缬沙坦(1 mg/kg,10 mg/kg),连续灌胃2周,观察其治疗效果,并分析正常饲养小鼠、动脉粥样硬化模型小鼠以及不同缬沙坦剂量组治疗小鼠干扰素系统蛋白和炎症反应蛋白水平的变化。研究表明,小鼠动脉粥样硬化管腔面积明显降低,斑块面积、血管内膜厚度及脂质中心面积明显升高,血清中干扰素(IFNα,IFNβ,IFNγ)、干扰素调节蛋白(IRF1,IRF2,IRF4,IRF8)、炎症反应因子(IL2,IL4,IL6,IL10,IL15)、质金属蛋白酶(MMP1,MMP9,TIMP1和TIMP3)等的表达水平均显著升高(p0.01),且与正常饲养小鼠、动脉粥样硬化模型小鼠相比有显著的统计学差异(p0.01),缬沙坦治疗后缬沙坦10 mg/kg组明显优于缬沙坦1 mg/kg组(p0.01)。因此,缬沙坦可能通过调控干扰素系统蛋白及炎症反应蛋白水平来改善小鼠动脉粥样硬化。此结果为探讨缬沙坦在改善动脉粥样硬化小鼠中的作用机制进一步深入研究提供理论依据,为临床治疗和新药开发提供参考方向。     

235例甲真菌病流行病学分析

甲真菌病是由皮肤癣菌、酵母菌及其他丝状真菌侵犯甲板或甲下组织引起的一种常见传染性疾病,它的流行因不同地区而存在差异。为了解太原地区甲真菌病的临床分类、菌种构成等情况,我们对近1a来我院皮肤科的甲真菌病门诊患者及合并甲真菌病的住院患者（共235例）从临床及病原学方面进行流行病学分析,现报告如下。