丝状真菌细胞凋亡研究方法

<正>细胞凋亡作为细胞调控机制之一,与细胞增殖、细胞分化同等重要,在进化上具有保守性。细胞周期和凋亡通路的失调能引发多种人类疾病,是目前生命科学领域活跃的研究方向(Gougeon 2003;Brown&Attardi 2005)。由于丝状真菌细胞凋亡的表型和生理     

丝状真菌基因表达系统研究进展

本文是26篇关于丝状真菌基因表达系统的研究论文的综述,包括两部份内容。前一部分叙述1979年开始建立并迅速发展起来的丝状真菌转化系统,着重介绍丝状真菌中转化系统的构建及转化的一般特点。后一部分叙述在转化系统发展基础上产生的丝状真菌基因工程,文中列出了截至1991年9月为止报道的一些成功的实例,说明它在丝状真菌工业育种和作为外源基因产物的生产和分泌系统中的应用。     

广西森林土壤丝状真菌的生态分布

真菌种类多,分布广,对人类的生产和生活关系非常密切,因此近来对真菌特别是丝状真菌的研究日益引起高度重视。1981—1990年我们对桂北龙胜县里骆林区、桂中宜山县庆远林区、桂南岑溪县七坪林区和桂西田林县老山林区森林土壤微生物区系进行了分析,其中丝状真菌是我们重点研究的内容之一。在上述森林土壤中共分离出丝状真菌2084株,经鉴定归属于25属。现将广西森林土壤丝状真菌生态分布的研究结果报道如下。     

丝状真菌SC－2产β－胡萝卜素的研究

利用改良的ＳＭＡ培养基富集培养从植物的落花上分离筛选出的产β─胡萝卜素的菌株ＳＣ—２。该菌株在以棉籽饼粉为主要原料的培养基上生长良好。最高生物量达５４ｍｇ干菌体／ｍｌ培养液。胡萝卜素含量１．８５ｍｇ／ｇ干菌体。ＨＰＬＣ测定β─胡萝卜素占总胡萝卜素的９０．５％。     

电泳核型分析在丝状真菌研究中的应用

电泳核型分析在丝状真菌研究中的应用邢来君,李明春（天津南开大学微生物学系,天津３０００７１）ＤＮＡ分子的分离技术是分子生物学研究中的关键技术之一。目前最通用的分离技术是琼脂糖凝胶电泳［１］,但分离的ＤＮＡ分子大于５０ｋｂ时,该方法已不能获得令人满意的...     

丝状真菌的顶端生长及与细胞壁关系研究进展

丝状真菌菌丝的生长,与其它植物极性细胞（如花粉管、根毛等）生长一样,以细胞的顶端生长为特征（17,’7）,其生长仅限十菌丝顶端的穹窿区域,在直径均匀的后部管状区域则几乎不再伸长。菌丝的顶端生长方式在一个世纪前已被发现（”）,随后的研究对此进行了进一步阐述,指出菌丝的生长速率在顶端最大,距顶lpm处壁的合成速率可能是50Pm处的50倍（12）,而在伸长区的基部,生长速率可能降为零（’7〕。菌丝的顶端生长是多种因素造成的,包括泡囊、肌动蛋白、膨压、细胞壁等（12）,其中最主要的影响来自于菌丝细胞壁。菌丝细胞壁的成分…     

腺苷三磷酸和环腺苷单磷酸对丝状真菌纤维素酶合成的调节

以虫荧光素酶法检验了四株丝状真菌在葡萄糖—无机盐液体培养过程中的胞内ATP含量。结果表明,只有当胞内ATP浓度低于10~(-S)mg/ml时,真菌才开始合成胞外纤维素酶(FPA)。以不同浓度的各种碳源培养时,菌体胞内ATP含量只要超过10~(-1)mg/ml,FPA的合成即发生阻遏。菌体胞内ATP含量与FPA合成呈显著负相关。以高效液相色谱(HPLC)法检测了菌体培养液中的cAMP含量。在非阻遏条件下,外源cAMP可以提高FPA的合成水平。但外源cAMP不能解除已经发生的酶合成阻遏。菌体ATP和cAMP水平是调节真菌纤维素酶合成的重要因子。     

异源基因在丝状真菌系统中的克隆表达

近年来研究丝状真菌表达外源基因的报道渐多,这是由于丝状真菌作为基因工程受体菌有着与细菌、酵母菌不同的独特优点,即丝状真菌具有很高的蛋白质分泌能力;能进行各种翻译后加工(包括肽链剪切,糖基化方式、空间折叠等都与高等真核生物的类似);丝状真菌如曲霉(Aspergillus)等又是确认的安全生产菌株,并有成熟的发酵和后处理工艺;因此是很     

丝状真菌代谢工程研究进展

丝状真菌(Filamentous fungi)作为重要的工业发酵微生物,在有机酸、蛋白质及次级代谢产物等关键生物基产品生产方面发挥着重要作用。自20世纪90年代代谢工程理念提出以来,尤其是代谢工程使能技术的创新及发展,极大地促进了丝状真菌细胞工厂的构建及其在工业发酵领域的应用。文中将系统介绍近年来丝状真菌代谢工程技术的发展,及其在生物基化学品细胞工厂构建中的应用,最后讨论丝状真菌代谢工程中关键问题并展望其未来发展。     

一种来源于青霉的新的α-半乳糖苷酶的分离纯化及其酶学性质

从丝状真菌中筛选到一株产α-半乳糖苷酶的菌株F63,对该菌株进行了形态观察和18SrDNA序列分析,该菌株属于青霉属。采用硫酸铵沉淀、阴离子交换层析和分子筛层析等方法分离纯化了该菌株的一种α-半乳糖苷酶。经过聚丙烯酰胺凝胶电泳,此酶蛋白的分子量约为82kDa。该α-半乳糖苷酶反应的最适pH为5.0,最适温度为45℃。此α-半乳糖苷酶的热稳定性在40℃以下,pH稳定性为pH5.0-6.0。与已报道的α-半乳糖苷酶的活性都受到Ag 的强烈抑制不同的是,该α-半乳糖苷酶受Ag 的抑制作用不显著。以pNPG为底物的Km值为1.4mmol/L和Vmax=1.556mmol/L.min-1.mg-1。该酶可以有效降解蜜二糖、棉子糖和水苏糖,但不能降解末端含α-半乳糖苷键的多糖。通过利用质谱技术对纯化的α-半乳糖苷酶进行鉴定以及内肽的N端测序证明该蛋白为一种新的α-半乳糖苷酶。