降解菌HN36对二氯喹啉酸胁迫下烟草茎尖和叶片超微结构的影响

利用降解菌HN36降解土壤中的二氯喹啉酸及修复土壤的生态环境, 为稻田植烟地区烟叶安全生产提供技术和理论依据。采用盆栽试验, 将二氯喹啉酸与降解菌HN36配成一定量的溶液, 均匀喷洒到过筛的干土中, 将5叶期烟苗移栽到处理的塑料盆土中。当烟苗长到8叶期时分别取茎尖﹑顶叶和中部叶进行处理, 在电镜下观察细胞超微结构变化, 利用高效液相色谱仪检测土壤中二氯喹啉酸降解的动态。烟株细胞超微结构变化的程度有差异, 表现为受害烟株>修复烟株>健康烟株; 烟株的茎尖和顶叶细胞伤害最严重, 中部叶片细胞伤害较轻。研究结果还显示, 在含二氯喹啉酸的土壤中, 加入降解菌HN36能加速二氯喹啉酸降解, 改善土壤健康质量, 烟株细胞超微结构及烟叶品质明显得到修复。     

西北干旱区国土空间生态修复优先区识别——以黑河流域张掖市为例

基于整体保护与系统治理思维识别西北干旱区国土空间生态修复优先区,是筑牢国家生态安全屏障、推进国土空间生态文明建设的重要举措。本研究以典型西北干旱区城市——张掖市为例,采用生态服务功能重要性、电路理论、生态敏感性及生态退化评估等方法从生态网络内部缺陷和外部威胁两方面构建“生态网络-生态敏感性-生态退化”研究框架,识别西北干旱区国土空间生态修复优先区,并提出修复策略。结果表明：张掖市生态修复优先区集中在生态脆弱且人类活动干扰强烈的河流沿岸人工防护林带及平原-荒漠-绿洲过渡带。研究区生态网络包括39个生态源地和99条生态廊道,高度敏感区和退化区面积分别为1595.40和6.65 km²。基于生态网络内部缺陷和外部威胁识别国土空间生态修复优先区31个生态夹点、7个障碍点及753.56 km²生态源地,这些区域向内关乎生态网络的连通,向外维持着生态系统稳定,是未来着重修复的区域。本研究遵循国土空间整体保护、系统修复理念,提出了综合生态网络内部缺陷和外部威胁的国土空间生态修复思路,可为张掖市生态系统综合管理及国土空间优化提供科学基础和决策依据。     

介导两种半纤维素酶分泌表达的信号肽比较

木聚糖酶和甘露聚糖酶是两种主要的半纤维素酶,广泛应用于诸多领域。选择了3种毕赤酵母内源信号肽Scw11、Dse4和Exg1,以α-factor为参照,分别在毕赤酵母X33中用于表达实验室前期获得的耐热木聚糖酶DSB和耐热甘露聚糖酶Man A,选择适合DSB和Man A表达的信号肽以提高胞外酶活水平。结果表明不同信号肽引导的两种半纤维素酶的酶活水平相差较大:对DSB(分子量为23k Da),α-factor介导的表达效率明显优于其它3种信号肽;但对Man A(分子量为30k Da),Dse4和α-factor介导的表达效率相当且明显优于Scw11和Exg1。因此在X33中表达DSB时应选用α-factor,而表达Man A时应选用Dse4或α-factor。此外胞内酶活的结果显示α-factor介导的DSB和Man A重组菌胞内滞留酶活明显高于其它信号肽,而分子量为30k Da的Man A的滞留酶活又明显高于分子量为23k Da的DSB,因此在表达Man A蛋白时,选用其它的信号肽,如Dse4,会减少外源蛋白在胞内的滞留从而在一定程度上提高外源蛋白的分泌量。因此为毕赤酵母表达系统鉴定更多可用的信号肽并筛选到针对目的蛋白的最优信号肽奠定了一定的基础。     

血管平滑肌细胞在自发性高血压大鼠颈动脉重构中的作用及替米沙坦的干预研究

观察血管平滑肌细胞(VSMCs)在自发性高血压大鼠(SHR)颈动脉重构中的作用及替米沙坦的干预效果.将30只12周龄的SHR随机分为高血压组(SHR)、替米沙坦高剂量组(TelH)、替米沙坦低剂量组(TelL),另设同性别、周龄的WKY大鼠为对照组(n=10),干预18周.观察各组大鼠收缩压(SBP)、颈动脉中膜厚度(MT)、中膜横截面积(MCSA)、中膜细胞平均核面积、颈动脉 VSMCs增殖指数(PI)及凋亡指数(AI)等的变化.结果显示: ①两周后TelH组SBP明显低于SHR组(P＜0.01),其降压作用持续至实验结束,而TelL组SBP与SHR组无显著性差异(P＞0.05);②SHR组的MT、MCSA分别明显高于WKY组(P＜0.01),TelH组的MT、MCSA分别明显低于SHR组(P＜0.01),TelL组的MT明显低于SHR组(P＜0.05);③SHR组中膜VSMCs平均核面积明显大于WKY组(P＜0.01),而TelH、TelL组分别小于SHR组(P＜0.05);④各组颈动脉中膜VSMCs的PI均无明显差异(P＞0.05);SHR组颈动脉中膜VSMCs的AI明显低于WKY组(P＜0.01),而TelH、TelL组明显高于SHR组(P＜0.01);SHR组颈动脉中膜VSMCs的PI/AI明显高于WKY组(P＜0.01),而TelH、TelL组明显低于SHR组(P＜0.01);⑤颈动脉中膜VSMCs的AI与中膜MCSA呈显著负相关(r = -0.871,P＜0.01 ).说明VSMCs的肥大和增殖/凋亡失衡可能在SHR颈动脉重构中起重要作用,替米沙坦除降压作用外,能通过减轻VSMCs肥大,增加VSMCs凋亡,使增殖/凋亡趋于平衡而减轻其重构.     

青海糯性春小麦综合标记辅助育种研究

选用全糯小麦品种‘糯麦1号’与青海主要栽培品种‘阿勃’杂交,综合利用改良碘染色法、SDS-PAGE法和Waxy基因的分子标记等,对杂交后代进行了鉴定筛选。最终从F2代鉴定出了5粒全糯种子,从F3代鉴定出8株Wx-B1亚基缺失的植株。对全糯株系F3代的农艺性状进行评价,5个全糯株系的综合农艺性状都优于‘糯麦1号’,与‘阿勃’较接近。测定全糯株系和Wx-B1亚基缺失植株F4代种子的直链淀粉含量,5个全糯株系F4代种子的直链淀粉含量接近于0,8个Wx-B1亚基缺失植株F4代种子的直链淀粉含量在总体上比‘阿勃’的直链淀粉含量低。研究表明,采用综合标记辅助选择可快速而准确地获得适合在青海栽培的全糯和部分糯性小麦。     

荔枝生物技术研究进展（综述）

从荔枝的组织培养、花药培养和原生质体培养方面综述荔枝生物技术的研究概况,并提出该领域存在问题及发展方向。     

老年膝骨性关节炎的中西医结合临床综合干预方案制定和优化的临床研究

摘要 目的：制定并优化老年膝骨性关节炎（KOA）的中西医结合临床综合干预方案,为老年KOA提供更加规范化、可操作化的治疗方案。方法：选取2019年1月～2019年12月我院住院、符合纳入标准的KOA患者90例,按随机双盲法随机分为治疗1组、治疗2组及治疗3组各30例,治疗1组采用基础药物治疗+中医辨证论治中药口服+理疗方案治疗,外加日常医护人员的传统入院宣教。治疗2组在治疗1组的基础上增加三项中医特色疗法治疗。治疗3组在治疗2组的基础上再增加经过特定编排的系统宣教视频。记录视觉模拟量表（VAS）评分、膝关节评分表（KSS）评分,并考察肝肾功能等安全性指标及患者满意度。结果：治疗后三组VAS评分、KSS临床评分、KSS功能评分比较差异有统计学意义（P<0.05）。三组患者VAS评分、KSS临床评分、KSS功能评分治疗后均较治疗前有明显好转,差异均有统计学意义（均P<0.05）。与治疗1组治疗后比较,治疗2组、治疗3组VAS评分均较低,KSS临床评分和KSS功能评分均升高,差异均有统计学意义（均P<0.05）。三组间满意度比较差异无统计学意义（P>0.05）,但与治疗1组治疗后比较,治疗3组满意度升高,差异有统计学意义（P<0.05）。全部患者均未见不良事件及并发症,治疗前后肝肾功能均无异常,安全性良好。结论：中西医结合保守治疗综合干预方案对于老年性KOA的治疗确实有效,中医特色疗法明显增加了疗效,统一规范、有可执行标准是其重点,系统的宣教有利于整个方案,疗效满意,且安全性良好,具有一定的临床推广价值。     

体外修饰树突状细胞诱导免疫耐受的研究

目的:探讨体外联合应用白细胞介素10(interleukin 10,IL-10)和甲基强的松龙(methylprednisolone,Medron)修饰供体树突状细胞(dendritic cell,DC)对小鼠皮肤移植术后免疫耐受的诱导效果,为抗移植术后免疫排斥反应治疗提供依据。方法:以健康成年C57BL/6小鼠为供体。BALB/c小鼠为受体,随机分为6组。除A组外,其余各组均于皮肤移植前3d自尾静脉输入对应的供体DC。具体对应关系如下:A组为空白对照,尾静脉输入生理盐水;B组为输入未修饰的DC;C组为20μg/L IL-10处理组;D组为10mg/L Medron处理组:E组为20μg/L IL-10 10mg/L Medron处理组。同时设立F组,为BALB/c对BALB/c的同种同基因皮片移植。各组行皮肤移植术,观察受体移植皮片存活情况。结果:E组的移植皮片存活时间最长,与其它各处理组相比P＜0．05,存在统计学差异。结论:用IL-10和甲强龙修饰的供体树突状细胞对受体进行预处理,可明显延长移植皮片的存活时间。     

生物工程专业社会化实践教学模式构建

生物工程专业具有较强的综合性、实践性。通过建立生物工程专业社会化实践教学模式,利用校外企业产品化生产过程的实践方法,使学生建立专业的产品化思维模式,在学习与实践中解决问题。该教学模式的建立,可在实践教学过程中充分体现学生主体地位,唤醒学生主体意识,提高学生自身参与度,培养学生实践能力和创新能力,实现生物工程专业学生综合素质的全面提高。     

EGFP-Luc-Hepa1-6细胞系的构建及其在小鼠肝癌模型中的应用

目的:构建带有增强型绿色荧光蛋白EGFP及荧光素酶luciferase的真核表达载体p CMVLuciferase-IRES2-EGFP,对肝癌细胞系Hepa1-6转染后进行稳定筛选,并将表达该载体的细胞系应用于小鼠原位肝癌模型构建,以对小鼠肝癌细胞进行稳定标记与活体示踪。方法:对p GL3-Basic质粒进行Xba I酶切、Klenow片段补平黏端、Xho I酶切获得luciferase小片段,与Xho I/Sma I酶切p IRES2-EGFP质粒获得的载体大片段连接,获得重组质粒p CMV-Luciferase-IRES2-EGFP。酶切鉴定、测序比对确认序列完全正确后,以重组载体转染Hepa1-6细胞进行稳定筛选,以荧光显微镜观察EGFP表达,报告基因实验与LuminaⅡ成像系统检测荧光素酶活性。确认该细胞系中的质粒得到表达后,以该细胞系进行C57BL/6小鼠肝脏原位接种构建肝癌模型,以LuminaⅡ成像系统连续活体监测肝癌的生长,取离体的肝癌组织制备石蜡切片(HE染色)和冰冻切片(免疫荧光染色)分别观察离体肿瘤组织病理学特征及其中肝癌细胞绿色荧光蛋白表达情况。结果:成功构建表达p CMV-Luciferase-IRES2-EGFP载体的Hepa1-6细胞系(EGFP-Luc-Hepa1-6),并以该细胞系成功构建C57BL/6小鼠原位肝癌模型,实现小鼠肝癌细胞的活体示踪与体外标记。结论:成功构建EGFP-Luc-Hepa1-6细胞系,且以此细胞系构建的小鼠原位肝癌模型可以同时实现小鼠肝癌生长的连续活体监测与离体组织检测。