奶牛ZFX+ZFY基因片段的克隆、测序及PCR对奶牛性别鉴定灵敏度研究

奶牛胚胎的性别鉴定是多年来奶牛业研究和探素的问题,尤其在体外授精。胚胎分割冷冻,保存及胚胎移植一系列生物科学高技术发展和应用的今天,这一问题的解决显得更加重要和迫切。用分子杂交的方法也可对胚胎进行早期性别鉴定,但这一方法必须要有大量的样品DNA,而且所需时间长,并受到实验条件的限制,很难在基层和生产中推广应用。 pCR方法除了有前述特点外,还同时具有所需设备简单,操作方便,易于在生产中推广应用。为此．我们对奶牛的ZFX及ZFY基因片段进行克隆、测序。并以此设计出分别对ZFX及ZFY具特异的引物,以奶牛血液DNA为模板进行PCR护增对奶牛性别鉴定灵敏度试验。     

嗜热细菌的碱性磷酸酯酶的研究

从５８株来自国内温泉的嗜热细菌中分离到一株菌,它所产生的耐热碱性磷酸酯酶在９５℃中保温６０ｍｉｎ后仍保留原来活力的７５％．测定了酶的一系列性质,包括酶作用的最适ｐＨ、最适离子强度、最适温度,以及酶的热稳定性、米氏常数、活化能等等,还研究了一些无机离子、氨基酸以及表面活性剂对酶活的影响．ＤＮＡ杂交方面的初步实验结果表明用该酶标记的核酸作为非放射性探针可用于在高温下进行的杂交反应．     

人肝癌细胞瘤QGY-7703的p53基因及其表达研究

本文利用等位基因分析,PCR-SSCP,RT-PCR/序列分析,Northern印迹,免疫组织化学,Western印迹,免疫沉淀等方法对人肝癌细胞株QGY-7703的p53基因背景进行了研究,发现17号染色体短臂可能存在等位基因缺失,在p53基因的编码序列上没有发现任何突变,但发现其mRNA和蛋白表达水平很低,表明在QGY-7703细胞中p53基因的低水平表达可能同细胞的恶性程度有关。     

研制透明带肽避孕疫苗的新策略

研制透明带肽避孕疫苗的新策略谢毅,徐万祥（复旦大学遗传工程国家重点实验室,上海２００４３３）（上海市计划生育科学研究所,上海２０００３０）关键词透明带,抗原表位,嵌合肽疫苗研制阻断精卵识别、结合或穿透等较早生殖环节的抗生育疫苗,一直是免疫避孕研究中孜...     

带有IS1的mini—F质粒所发动的染色体复制对于recA基因的依赖性

我们曾报道整合的F′质粒所发动的大肠杆菌染色体复制依赖于recA基因,而整合的F质粒则不。构建带有IS1的mini-F质粒,它们的复制起点分别来自F或F′质粒。这些质粒的整合抑制菌株中都有约20％是recA依赖的,不管这一mini-F质粒的复制起点来自F或F′质粒,也不管这一质粒在游离状态中的复制方向是单向或双向。实验结果说明,质粒的整合位置是决定由整合质粒所发动的染色体复制对recA基因的依赖性的主要因素。     

人神经生长因子的原核高效表达

神经生长因子(nerve growth factor,NGF)是神经系统最重要的生物活性分子之一,也是最早发现和最典型的神经营养因子。它影响外周和中枢神经系统某些神经元的存活与分化;NGF在神经损伤时可保护其效应神经元,促进神经纤维再生,增加脑移植中某些神经元的存活;它对外伤、中毒、老化等因素引起的脑疾患有治疗作用,并具有神经修复功能,尤其是对早老性痴呆症、帕金森氏病的治疗作用比较乐观。虽然NGF在神经损伤和神经退行性病变的诊断和治疗中有巨大的临床应用价值,但天然NGF受到雄性小鼠颌下腺这     

应用循环逆转录PCR技术检测丙型肝炎病毒RNA

循环逆转录（ｃｉｒｃｕｌａｔｏｒｙ ｒｅｖｅｒｓｅ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ,ＣＲＴ）是线性增长逆转录ｃＤＮＡ产量的一种新技术。为了将该技术用于检测ＨＣＶ ＲＮＡ,通过改变ＣＲＴ的循环次数,结合竞争ＰＣＲ,作出标准曲线。采用１６次ＣＲＴ加３４次循环ＰＣＲ检测了１３６例ＨＣＶ ＥＬＩＳＡ阳性、５４例ＨＣＶ ＥＬＩＳＡ阴性和１０８例临床可疑病人全血标本,并与逆转录ＰＣＲ（ＲＴ－ＰＣＲ）和巢式ＰＣＲ（     

信号肽去除的耐热碱性磷酸酯酶FD-TAP在大肠杆菌中的亚克隆和高表达

通过计算机辅助分析,发现在耐热碱性磷酸酯酶（简称ＦＤ－ＴＡＰ）的Ｎ端存在２６个氨基酸的信号肽序列。但一般信号肽切点并非是完全专一的,所以利用基因工程手段将ＦＤ－ＴＡＰ的Ｎ端分别缺失２４、２５、２６和２７个氨基酸,得到了Ｎ端分别缺失２４、２５、２６和２７个氨基酸的克隆子ｐＴＡＰＮＤ２４、ｐＴＡＰＮＤ２５、ｐＴＡＰＮＤ２６和ｐＴＡＰＮＤ２７。考虑到这样的无隆子其翻译起始区所形成的能量较低结构稳定的二组     

烟豆小种群的RAPD研究

本研究应用RAPD技术对湄洲岛和平潭岛上4个烟豆小种群进行的生态遗传学研究,结果显示,总的多态位点比率为1.0,4个种群中最小为0.41,最大为0.82,表现出高度的多态性。利用相似系数及遗传距离进行的聚类分析结果表明,在种群间地理距离较大时,遗传分化与地理距离有一定的相关性,在小范围内则无明显相关性。 Abstract:The ecological genetic research on Glycine tabacina populations was based on RAPD technique,which revealed 100% polymorphisms,with minimum value of 0.41 in population MM,and maximum value of 0.82 in population PT.Cluster analysis showed that the populations' genetic variation was correlation to the environment gradient when the geographic distance among populations was big.In small geographic range,however,no correlation exists between genetic structure and ecological factors because of random genetic drift.