恶性转化增加细胞对细小病毒的敏感性

在离体培养人细胞中,细小病毒对恶性转化的细胞有明显的抑制作用。正常人胎肾和胃细胞对细小病毒H-1呈抗性,但它们被理化致癌因子转化后,对细小病毒敏感。小鼠成纤维细胞C_3H10T1/2被~3H-TdR转化后对细小病毒H-1的敏感性进一步提高。另外,细小病毒对肿瘤细胞的抑制作用还与细胞的分化状态有关,低分化型胃癌细胞MKN45比分化型胃癌细胞MKN28对H-1的杀伤作用更敏感。     

小剂量DNA毒剂诱导SV40转化的人细胞中的SV40DNA的增强复制

本文介绍了用~(32)P标记的pSV_2质粒为探针,通过DNA分子原位杂交研究小剂量DNA毒剂诱导被SV40转化的人细胞NB—E中SV40DNA的增强复制.最佳条件下,最大增强比可达4-5.而且,这种病毒DNA增强复制与病毒的增强复活与增强致突有相似的动力学过程和剂量响应关系.此结果为哺乳类细胞中可能存在SOS功能提供了进一步证据.被诱导细胞的Hirt沉淀与Hirt上清液中都存在SV40DNA片段,且Hirt上清液中SV40DNA片段大小均一,反映此过程与λ原噬菌体的诱导的起始过程有相似之处.小剂量紫外线可诱导被SV40转化的人XP细胞中的SV40 DNA的增强复制.说明这一诱导过程可能与切除修复功能有不同的遗传学过程.     

用病毒探针研究紫外线诱导的DNA损伤的致死效应

紫外线(254nm)能诱导一系列DNA损伤。嘧啶二聚体是至今所知的主要损伤产物。然而,由于细胞基因组结构和复制方式的复杂性以及DNA损伤修复途径的多样性,定量地研究特定DNA损伤的生物学效应是困难的。微小病毒是一种良好的探针,因它们有特有的基因组结构和复制方式,它们已被成功地用于探测细胞的诱发性易错修复功能和突变过程。在此项研究中,自主性微小病毒     

人肝癌细胞株QGY—7703的p53基因及其表达研究

本文利用等位基因分析,ＰＣＲ－ＳＳＣＰ,ＲＴ－ＣＰＲ／序列分析,Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹,免疫组织化学,Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹,免疫沉淀等方法对人肝癌细胞株ＱＧＹ－７７０３的Ｐ５３基因背景进行了研究,发现１７号染色体短臂可能存在等位基因缺失,在Ｐ５３基因的编码序列上没有发现任何突变,但发现其ｍＲＮＡ和蛋白表达水平很低,表明在ＱＧＹ－７７０３细胞中Ｐ５３基因的低水平表达可能同细胞的恶性程度有关。     

人肝癌细胞瘤QGY-7703的p53基因及其表达研究

本文利用等位基因分析,PCR-SSCP,RT-PCR/序列分析,Northern印迹,免疫组织化学,Western印迹,免疫沉淀等方法对人肝癌细胞株QGY-7703的p53基因背景进行了研究,发现17号染色体短臂可能存在等位基因缺失,在p53基因的编码序列上没有发现任何突变,但发现其mRNA和蛋白表达水平很低,表明在QGY-7703细胞中p53基因的低水平表达可能同细胞的恶性程度有关。     

人肝癌细胞p53基因的表达及其对细小病毒H-1的敏感性

本文利用单链构象多态性分析,17号染色体短臂等位基因杂合性分析,Northern印迹,免疫沉淀,p53基因第7外显子酶切等技术检测了两个中国人肝癌细胞系SMMC-7721,YY-8103和一个自发转化的人肝细胞系L-02的p53基因结构与表达。实验表明,这三个细胞系中没有出现17号染色体短臂等位基因杂合性缺失,第4—9外显子也没发生突变,但其mRNA和蛋白表达水平很低。利用MTT比色分析法研究了这三个细胞系和其他已知p53基因背景的八个人肝癌细胞系(QGY-7703、PLC/PRF/5、Huh-7、Hep3B、FOCUS、Tong/ HCC、SK-Hep-1、HepG2)对自主性细小病毒H-1的敏感性。除HepG2细胞外,其他十个细胞系p53基因的结构和/或表达都不正常。经H-1感染(moi=20)后,其敏感性均高于HepG2细胞。本研究初步表明了p53基因结构或表达的不正常可能导致人肝癌或转化细胞对H-1的敏感性的提高。     

用细小病毒作为探针研究细胞对DNA损伤的反应

一、绪言 在原核和真核细胞中,病毒探针广泛用于研究宿主细胞功能。我们对细胞DNA复制、表达和调控的了解,常始于对噬菌体和病毒的研究。病毒是分析细胞对DNA损伤反应的极好工具。真核细胞中细胞核DNA包含许多复制子,它们的启动是相互独立的,这给研究复制     

动态光散射法研究病毒颗粒的聚集

用动态光散射法对细小病毒(H-1)在5℃、20℃和35℃下,pH从5.0到11范围内的光子相关光谱进行了测量。实验结果表明该病毒在pH＞8.5时会形成明显的聚集。这和电镜观察结果相吻合。为了提高细小病毒的病毒探针等效能,应选择pH＜8的缓冲液并贮藏在低温下为宜。     

紫外线对哺乳类细小病毒H-1的致突效应的分析

用哺乳类细小病毒H-1为探针研究紫外线的致死和致突效应,可发现随照射剂量的增加,病毒存活率按对数规律下降,病毒的突变频率线性增加,低剂量紫外线诱导回复突变体的几率较大。用小剂量紫外线诱导宿主细胞,病毒的存活率和突变频率相应提高,同时使紫外线诱导突变体的几率显著提高。     

应用图象分析仪及显微分光光度计分析转化细胞的一些生物学特性

本文用扫描显微分光光度计(西德,Opton)观察比较了两例经紫外线和化学诱变剂(ENU或DMBA)转化的人胚胃、肾细胞系的形态特征,用测微荧光法原位定量细胞核的DNA,用仪器的图象分析系统测量细胞和细胞核的周长、面积、最大直径、核质比等几何参数,测定结果对转化细胞及正常细胞生物学特性的鉴定,提供了某些独特的定量指标,取得了良好的效果。