犀角地黄汤化裁方对蛇伤患者血浆TT、PT、APTT的影响

目的观察犀角地黄汤化裁方对血循毒或混合毒蛇咬伤出现血分证的患者血浆TT、PT、APTT的影响。方法选择血循毒或混合毒蛇咬伤2h内的患者130例,随机分为2组,均给予常规治疗,治疗组加服犀角地黄汤化裁方。于就诊时、咬伤后72h测定其血浆TT、PT、APTT,并进行比较。结果2组患者在初诊时(伤后2h内)血浆TT、PT、APTT无明显差异,均在正常范围内;伤后72h三项指标均升高,对照组显著高于治疗组(P<0.05)。结论犀角地黄汤化裁方能抑制血循毒或混合毒蛇咬伤患者血浆TT、PT、APTT的延长,对蛇伤引起的凝血障碍有防治作用。     

植物蛋白质S-亚硝基化修饰的检测与分析

S-亚硝基化是一种重要的蛋白质翻译后修饰方式, 是指一氧化氮(NO)基团共价连接至靶蛋白特定半胱氨酸残基的自由巯基, 从而形成S-亚硝基硫醇(SNO)的过程。S-亚硝基化修饰广泛存在于各有机体中, 通过改变蛋白质生化活性、稳定性、亚细胞定位以及蛋白质-蛋白质相互作用等机制而调控不同的生物学过程或信号通路。在蛋白质S-亚硝基化检测分析方法中, 最为广泛使用的是生物素转化法(biotin switch assay), 其基本原理是首先封闭未被修饰的自由巯基, 进而将被修饰的SNO基团特异地还原为自由巯基并使用生物素将其特异标记。被生物素标记的半胱氨酸残基(即被修饰位点)可进一步通过蛋白质免疫印迹和/或质谱等方法进行检测分析。该文详细描述了植物蛋白质样品的体内和体外生物素转化法的实验流程, 并对实验过程中的注意事项进行了讨论。     

酪蛋白小肽对幼龄草鱼生长和饲料利用的影响

本实验为酪蛋白小肽在幼龄草鱼营养生理上的意义研究。 2 2 5尾 (3 76± 0 16g)草鱼分为 3组 ,每组 75尾鱼 ,每 2 5尾鱼饲于 0 2 5m3 的水族箱中 ,每组设 3个平行水族箱。对照组添加 0 5 %酪蛋白 ,试验组 1、2日粮中分别添加 0 5 %酶解酪蛋白 (80 %以上为小肽 ,平均链长 2 98) ,0 5 %酸解酪蛋白 (80 %以上为游离氨基酸 )。试验期 5 6d ,水温为 2 7 6± 3 1℃。结果表明 :添加 0 5 %酶解酪蛋白组草鱼相对生长率、蛋白效率比、饲料效率比和血浆中镁含量与小肽总量均显著高于添加 0 5 %酪蛋白组和10 5 %酸解酪蛋白组 (P <0 0 5 )。草鱼日粮中添加一定比例的小肽可提高饲料表观消化率和蛋白消化率 ,增加血液循环中生物活性肽的含量 ,减少肝胰脏和肠系膜脂肪储积 ,提高机体对日粮中氨基酸的利用率 ,从而增加体内氮沉积 ,提高生长速度。     

借助计算机模建与缺失突变技术确定抗人TNF-α单抗Z12识别的抗原表位

钓取抗人肿瘤坏死因子-α(hTNF-α)抗体Z12重、轻链可变区(VH, VL)基因, 根据其氨基酸序列, 运用同源模建方法分别模拟VH和VL结构域的空间构象, 并搭建Fv片段的整体三维结构, 利用分子对接方法建立Fv/hTNF-α作用的复合物模型, 据此模型推测Z12抗体识别的表位为hTNF-α141~146位. 将hTNF-α分为N端1~91和C端92~157两段进行原核表达, 检测结果表明Z12抗体识别的抗原表位位于hTNF-α C端92~157区, 初步证实预测结果可靠. 进一步的实验研究表明, 当把hTNF-α141~146位氨基酸缺失后, Z12抗体识别该缺失体的能力几乎丧失, 提示此抗体特异性识别抗原分子141~146位氨基酸残基.     

GDNF缺失突变体的设计及其结构与功能关系(英文)

研究了GDNF结构与功能的关系 .基于鼠源GDNF的晶体结构 ,利用计算机SGIIndigo2(R4 4 0 0 )工作站和InsightⅡ (95.5)蛋白质分析软件模拟了人GDNF三维结构 ,设计了GDNF分子的两个缺失突变体ΔN1 2 8和ΔN78 90 .以野生型GDNFcDNA作为模板 ,用PCR法得到编码缺失突变体的DNA片段 .将大肠杆菌作为表达系统 ,使缺失突变体GDNF在大肠杆菌中表达 ,对表达产物纯化和复性后进行生物活性测定 .两株突变体在大肠肝菌中获得了高效表达 ,纯化后的GDNF突变体ΔN1 2 8可以与存在于KG 1a细胞表面的受体结合 ,但不能促进 8日龄鸡胚背根节突起的生长 .突变体ΔN78 90既不能与受体结合 ,同时也失去了促背根节突起生长的功能 .说明GDNF分子的N端氨基酸对分子的生物学活性很重要 ,但对分子与受体GDNFR α的结合并不是必需的 ,而分子中的螺旋区对分子与受体的结合以及生物学活性都必不可少 .     

蓖麻毒素A链突变体的设计,表达与活性研究

利用蛋白质结构同源模建并结合表观静电势分析,设计了拟具有生物学活性的蓖麻毒素Ａ链的突变体。将ＰＣＲ扩增的突变体基因,导入ｐＫＫ２２３－３载体中,于大肠杆菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）中获得高效、可溶性表达,而且,确证了表达产物具有预期的生物学活性。     

人白介素6与其受体结合特定结构域的预测

借助人白介素6的核磁共振构象, 以人生长因子受体为模板同源模建的人白介素6受体空间构象, 通过表观静电势分析, 结合空间构象的互补性对人白介素6与其受体进行分子对接, 在分子力学优化、分子动力学动态模拟的基础上获得稳定的复合物结构, 从理论上预测人白介素6与其受体相互作用的结构域, 进一步确定影响人白介素6与其受体相互作用的特定位点, 为确定靶蛋白人白介素6的活性部位、利用计算机寻找和辅助设计新的拮抗剂提供理论依据.     

血红蛋白突变体的稳定性预测

为了研究提高血红蛋白粘聚体的稳定性,利用计算机同源模建、分子间氢键形成及表观静电势理论,探讨血红蛋白及相应突变体的结构与功能与功能关系。分析发现两个α９９位的Ｌｙｓ突变为Ｃｙｓ后,它们之间可以形成二硫键,两个β８２位的Ｌｙｓ突变为Ｃｙｓ可以增强形成分了间氢键的能力,分别起到稳定四聚体的作用。分析表明,突变体血红蛋白将具有更高的稳定性,从而提高血红蛋白稳定性及借助计算机工具设计新型奕变体提供参考。     

草鱼幼鱼实用日粮中添加紫花苜蓿草粉效果评价

实验旨在评估苜蓿草粉作为草鱼饲料的潜在蛋白原料的可能性。360尾草鱼幼鱼[(8.72±0.34)g]分成6个实验组,每个实验组3个平行组,每组20尾鱼,养殖于250 L循环水族箱中。试验日粮1、2、3、4、5添加2.5%、5%、10%、15%和20%苜蓿草粉,分别占日粮总蛋白的1.75%、3.50%、7.0%、10.5%和14%。对照组日粮以大豆粕、花生粕、棉籽粕和菜籽粕作为对照蛋白源。所有日粮为等蛋白质(粗蛋白28.5%)和等能量(15.92 mJ/kg)。实验期为56d,实验各组鱼在整个试验期间,没有出现死亡。2.5%和5%苜蓿草粉日粮组(试验日粮1、2)鱼较对照组鱼生长性能与饲料效益有所提高,10%组(试验日粮3)与对照组无显著性差异,但15%和20%日粮组(试验日粮4、5)鱼较对照组鱼显著性下降(P<0.05)。结果表明,苜蓿草粉在草鱼日粮中适宜添加量为7.8%,最多可以添加到10%。     

石爬鮡含肉率及肌肉营养成分分析

石爬铫(Euchiloglanis spp.)属Euchiloglanis Regan,隶属于鲇形目(Siluriformes)铫科(Sisoridae),是在高山峡谷,陡坡急流,枯洪流量悬殊的环境中底栖生活的小型冷水性淡水鱼类,是鰋鮡鱼类中除原鮡(Glyptosternum)外最原始的种类,主要分布于青海、四川、云南、西藏的金沙江、岷江水系干支流,海拔1800-3600m处.