金莲花种子的休眠、萌发与活力的研究

金莲花种子存在生理休眠现象,采用4周以上冷湿处理或不同浓度GA_3处理可以打破休眠,GA_3的最适浓度为500μg/g。不同年份收获的种子活力不同,表现在种子重量、用同样浓度GA_3处理时的发芽率及种子的最适发芽温度范围不同,1989年的种子活力低,最适发芽温度25℃左右(发芽率90％),而1990年新收的种子,从15°～25℃发芽率都高达95％以上。应用GA_3有机溶剂渗入法,可打破金莲花种子休眠促进萌发,效果良好,可以推广应用。     

武汉市306名儿童牙菌斑中变形链球菌的血清型

本试验共检测了306例5～6岁学龄前儿童牙菌斑中的变形链球菌,在其中208名患龋齿病儿童的牙菌斑中分离出304株变形链球菌,用双向琼脂扩散法进行血清学鉴定,c、e、f血清型有259株,占所分离的变链菌总数的85.19%,其中c型206株占68%,e型37株占12%,f型16株占5%。在有龋组和无龋组牙菌斑中变链菌培养阳性率比较,有龋组变链菌培养阳性率明显高于无龋组(P<0.01)。本试验提示变链菌是武汉地区龋齿病的重要致病因素之一;武汉地区龋齿病的儿童中感染的变形链球菌血清型以c型为主。     

人白细胞介素6cDNA克隆的分离与鉴定

我们从重组的人α干扰素处理的单层HeLa细胞常规提取Poly(A)~+RNA作为逆转录合成cDNA第一链之模板,用引物-适配接头法在噬菌质粒pTz19R中构建cDNA文库。以~(32)p-标记的480bpIL-6cDNA片段作探针进行菌落原位及狭缝印迹杂交,筛选出6个阳性克隆。其中两个克隆并用限制酶切分析及DNA序列测定做进一步鉴定。结果证明,一个克隆的cDNA片段长1.3kb,含有人白介素6全长编码区;另一个的cDNA插入片段为0.9kb,缺乏信号肽及成熟IL-6N端30个残基的编码序列。     

免疫组化ABC法和粘液组化AB／PAS法的套染技术

我们在前列腺癌的组化研究中,将免疫组化ABC法和常规粘液组化AB/PAS法结合起来,在同一张切片上进行套染和观察,比较特异性抗原——细胞角蛋白(cytokeratin)与中性粘液和酸性粘液的关系,取得了较为满意的结果,并说明套染切片的观察比分别在两张切片的染色观察更为准确和方便。一、材料和方法 1、组织材料取前列腺癌术后标本和正常人前列腺组织,Bouins液固定,常规脱水包埋,切成4μm厚的连续切片,多聚赖氨酸帖片。 2、抗体和主要试剂①多聚赖氨酸(Poly-L-Lysin Sigma Ccm.USA)     

水稻RNA结合蛋白C3H12与RNA结合位点的鉴定

CCH型锌指蛋白质C3H12是进化上保守的RNA结合蛋白质,它含有5个串联的CCCH锌指结构域ZnF1-5,形成2个紧密的锌指簇ZnF1-3和ZnF4-5。早期的研究发现,C3H12可能通过与mRNA结合的方式在转录后水平调控基因的表达。然而,与C3H12结合的mRNA类型和他们的结合模式,并未通过实验得到证明。本文表达纯化了一系列C3H12截短及全长蛋白质,并合成了一些潜在RNA底物ARE9、ARE19及对照Random21。通过等温滴定量热法 (isothermal titration calorimetry, ITC) 确定了C3H12与富含腺嘌呤尿嘧啶单元 (AU-rich element, ARE) mRNA底物的结合,并揭示了互作核心区域和热力学性质。通过荧光光谱分析和微型热泳动 (microscale thermophoresis, MST)技术对ITC的结果进一步佐证。结果表明：(1) C3H12与ARE底物的相互作用是焓驱动的能量有利的 (ΔG<0) 特异性结合,结合比为1:1。(2) C3H12与ARE19的亲和力较ARE9更高（约2倍）。(3) C3H12中ZnF1-3在与ARE类底物的结合活性中发挥主导作用。(4) C3H12结构中的141个氨基酸残基的接头不直接参与和ARE底物的相互作用。本研究揭示的CCCH型锌指蛋白质C3H12与ARE底物结合模式,将为进一步在分子结构水平阐明C3H12与ARE底物结合的机制奠定基础。     

运动负荷对青年学生和运动员心脏功能的影响

用无创法(阻抗法)测量了40名青年学生和40名运动员在两种运动负荷(50W和150W)运动前、运动后即刻和恢复时程的收缩时间间期(STI)和心率(HR)。在静态时,“运动员组”的心率较缓(P<0.01)、QS_1较长(P<0.05)、PEP/LVET比值较大(P<0.05和P<0.01)、LVETc较短(P<0.001)。运动后即刻,“学生组”和“运动员组”都表现为QS_z、LVET、PEP、IVCT、QS_1缩短、PEP/LVET比值减小、心率增速和LVETc延长。但“运动员组”QS_2、LYET的缩短和心率增速的程度较少,而PEP/LVET比值的减小和LVETc延长的程度较大。除PEP/LVET比值外,其余各项指标的恢复速度均与负荷量有关。“运动员组”的恢复速度较快,尤其在150W时更为明显。本文指出:1)用阻抗法测算动态下的STI更为实用;2)系统训练可提高心脏活动的潜力,改善泵功能,促进心脏活动的调节速度。     

蚕豆花粉母细胞染色体畸变同染色质胞间转移的关系

采用压碎、石蜡切片及植物染色体分带技术观察蚕豆花粉母细胞减数分裂过程发现:1.蚕豆花粉母细胞减数分裂的凝线期也出现染色质胞间转移现象;2.在8.08%的花粉母细胞内,染色体偏离正常的数目(n=6);3.染色体结构也有显著改变,其中包括染色体断裂、桥和长度的增减;4.出现双核和无核的花粉母细胞。大量证据表明,这些畸变现象同凝线期的染色质胞间转移有关。     

乳鼠坐骨神经植块法的雪旺氏细胞培养

目的:改善并建立一种新的大鼠雪旺氏细胞(SCs)的培养方法,为研究外周神经损伤修复模型及其它外周神经相关实验提供高纯度、多数量的SCs。方法:麻醉后显微镜下解剖并分离新生3天内SD大鼠的坐骨神经,采取植块培养的方法,显微镜下尽量剥除坐骨神经纤维外膜,并梳理松解坐骨神经的神经纤维束。梳理后剪碎坐骨神经,每小块种植于培养皿中,使用纯血清培养4小时,再加入正常的DMEM/F12培养基,消化培养2-3代。最后用S-100及GFAP免疫荧光染色进行纯度鉴定。结果:本实验在总结前人实验的基础上,联合创新采用坐骨神经外膜剥除、神经内膜梳理、纯血清培养以及胰酶差速消化等方法,短时间内获得SCs的纯度可达99%以上,可用于进一步对雪旺氏细胞的功能进行研究。结论:这种选用乳鼠坐骨神经植块、血清培养的方法简单易操作,无需额外的生长因子及抑制因子,可在短期内获得大量高纯度的SCs。     

连续全遮盖法治疗双眼屈光参差性弱视的有效性与安全性分析

目的:探讨连续q全遮盖法治疗双眼屈光参差性弱视的有效性与安全性。方法:选择2014年2月到2016年9月在我院诊治的126例双眼屈光参差性弱视患儿作为研究对象,根据治疗方法的不同分为阿托品组60例与遮盖组66例,遮盖组采用连续全遮盖法治疗,阿托品组给予阿托品治疗,两组都治疗观察3个月。比较两组治疗期间不良反应的发生情况、治疗后的总有效率、最佳矫正视力、电位潜伏期、波幅。结果:两组治疗期间都无严重不良反应发生。治疗后,遮盖组与阿托品组的总有效率分别为98.5%和88.3%,遮盖组的总有效率明显高于阿托品组(P0.05)。两组治疗后的最佳矫正视力都高于治疗前,且遮盖组治疗后的最佳矫正视力也明显高于阿托品组(P0.05)。两组治疗后的电位潜伏期都较治疗前明显缩短,而波幅明显增强(P0.05),且遮盖组治疗后的潜伏期明显短于阿托品组,而波幅显著强于阿托品组(P0.05)。结论:连续全遮盖法治疗双眼屈光参差性弱视具有很好的安全性,能提高患儿的治疗效果,改善视力,促进神经元的兴奋性。