杆状病毒基因Ac108的克隆和原核表达

目的:克隆和表达苜蓿丫纹夜蛾核多角体病毒(Autographa califorica multicapsid nucleopolyhedrovirus,AcMNPV)开放阅读框108(open reading frame,ORF108,Ac108)基因,为进一步研究其功能打下基础.方法:将Ac108基因克隆至原核表达载体pQE30,在大肠杆菌M15中表达AC108蛋白.以纯化的AC108蛋白作为抗原,免疫新西兰大白兔制备蛋白的多克隆抗体.用该抗体检测了该蛋白在病毒感染细胞中的表达.结果:实现了AC108蛋白的表达,获得了AC108蛋白的多克隆抗体,Western blot检测发现在AcMNPV感染的Sf-9细胞中有一条大小约为27kDa的杂交带,远大于预期的11kDa.结论:AC108蛋白可能以同源或异源聚合物形式在电场中迁移.     

206例慢性阻塞性肺疾病患者医院感染的临床分析

目的了解慢性阻塞性肺疾病（COPD）的医院感染状况。方法对206例COPD医院感染进行回顾性分析。结果调查479例COPD患者,医院感染206例,感染发生率为43%。结论COPD的医院感染与基础病变及病情有关,与住院时间成正比,与抗生素不合理使用和侵入性操作关系十分密切。感染细菌以革兰阴性菌为主（82%）,其中铜绿假单胞菌最多。     

劳教学员性传播疾病感染状况分析

目的了解温州市劳教人员性传播疾病（STD）感染状况。方法对2004年至2005年新人所的劳教学员进行支原体、衣原体和淋病的实验室检查。结果病原体检测检出率为76．22％,其中单种病原体阳性者占50．68％,混合感染占25．54％,并合并多重混合感染。结论卖淫嫖娼人员性传播疾病感染患病率高,是性传播疾病主要传染源,应加强力度管理和控制。     

细菌生物被膜的耐药机制及控制策略

在特定的条件下,细菌可以形成生物被膜,包被有生物被膜的细菌称为被膜菌.被膜菌无论其形态结构、生理生化特性、致病性还是对环境因子的敏感性等都与浮游细菌有显著的不同,尤其对抗生素和宿主免疫系统具有很强的抵抗力,从而导致严重的临床问题,引起许多慢性和难治性感染疾病的反复发作.细菌生物被膜粘附在各种医疗器械及导管上极难清除,以至引发大量的医源性感染.近年来,随着人们对细菌致病机制认识的逐步深入,控制细菌生物被膜的方法已有较大发展.本文拟探讨被膜菌的耐药机制并着重综述细菌生物被膜控制方法的最新研究进展.     

黄颡鱼河鲈源吸虫和黄颡前驼形线虫的季节动态和频率分布

2001年2月到2002年7月,对湖北省梁子湖黄颡鱼的胃部寄生蠕虫进行了调查,共发现4种寄生蠕虫,即:黄颡前驼形线虫(Procamallanus fulvidraconis)、杜父鱼驼形线虫(Camallanus cotti)、黄颡刺盖线虫(Spinitectus gigi)和河鲈源吸虫(Genarchopsis goppo),本文主要报道了黄颡前驼形线虫的频率分布,以及河鲈源吸虫的季节动态和频率分布.黄颡前驼形线虫的感染率为96.70%,平均丰度为21.59±23.37,方均比为25.29,与负二项分布拟合不成功(p＜0.001),没有发现表示"宿主年龄-寄生虫丰度"之间关系的凸形曲线,寄生虫丰度与宿主年龄和体长之间都呈显著的正相关关系(Rx,y=0.3038,p＜0.001;Rx,y=0.3938,p＜0.001);河鲈源吸虫的感染率为48.61%,平均丰度为2.45±5.44,方均比为12.09,与负二项分布拟合成功(p=0.29),其"宿主年龄-寄生虫丰度"之间的关系呈凸形曲线,并且伴随着聚集度的下降,感染丰度与宿主年龄和体长都呈显著的正相关关系(Rx,y=0.1694,p＜0.001;Rx,y=0.2449,p＜0.001).河鲈源吸虫感染的高峰期发生在春季、晚秋和初冬,各月份间的感染率和平均丰度都有显著的差异(G=93.4＞χ20.05[17]=27.58;F=16.7,p＜0.001).寄生虫本身的生活史模式可能是引起河鲈源吸虫显著季节变化的主要原因.     

实时定量RT-PCR检测鱼类传染性造血器官坏死病毒方法的建立与应用

建立了Taqman 实时定量RT-PCR方法检测传染性造血器官坏死病毒(IHNV).选取IHNV病毒的N蛋白基因保守序列,利用Primer Express 2.0软件设计引物和探针.以梯度稀释的含有IHNV目的扩增片段的质粒作为标准品,进行定量RT-PCR反应以确定检测灵敏度.病毒浓度在5×106 -5个拷贝,共7个数量级的范围内,定量RT-PCR反应有"S"型扩增曲线,检测灵敏度为5个拷贝.根据病毒拷贝数与定量反应Ct值的关系,绘制了标准曲线.该方法具有特异性,对鲤春血症病毒(SVCV)、病毒性出血性败血症(VHSV)、传染性胰脏坏死病毒(IPNV)、草鱼呼肠孤病毒(GCRV)、流行性造血器官坏死病毒(EHNV)、EPC细胞系、牙鲆的核酸都没有扩增反应.在50批待检样品中,有3批鱼类感染IHNV,利用标准曲线进行了定量分析.实时定量RT-PCR检测IHNV方法,灵敏度高,特异性好,可以进行定量分析,在鱼病的快速检测上具有重要意义.     

小鼠急性病毒性心肌炎对TNF-α表达的影响

目的:探讨肿瘤坏死因子(TNF-α)在柯萨奇病毒B3(CVB3)感染所致的急性病毒性心肌炎中的表达。方法:用不同剂量CVB3感染小鼠建立病毒性心肌炎感染模型,测定TNF-α含量并观察心肌病变情况。结果:感染后3d开始TNF-α的表达明显升高且高剂量感染组明显高于中、低剂量感染组。结论:在CVB3感染早期TNF-α表达升高且与病毒感染量有关。     

中国猕猴预存抗腺病毒中和抗体滴度对腺病毒体外感染单核细胞效率的影响

为了探索通过血液系统利用重组腺病毒载体的方法,以中国猕猴为动物模型,以复制缺陷型人5型腺病毒(human adenovirus serotype 5,HAd5)为载体携带报告基因在体外直接感染外周血单个核细胞(peripheral bloodmononuclear cells,PBMC).首先对HAd5在体外感染PBMC的条件进行优化,证实离心力可提高HAd5的感染效率;细胞分群结果表明HAd5特异感染PBMC中的CD14 单核细胞,仅感染小部分自然杀伤细胞,但几乎不感染T淋巴细胞和B淋巴细胞.首次发现:猕猴体内预先存在的抗HAd5中和抗体滴度越高,其单核细胞在体外对HAd5的易感性越强.这种现象将拓宽基于腺病毒载体的基因治疗和疫苗的临床应用范围,尤其是对预先存在腺病毒中和抗体的人群更具意义,为探索更方便有效的基因治疗和疫苗研究带来新的思考.     

原位杂交检测人工感染鸭体内鸭瘟病毒的复制

鸭瘟(Duck plague,DP)是由鸭瘟病毒(Duck plague virus,DPV)引起的鸭、鹅和天鹅的一种急性败血性传染病,发病率和死亡率甚高,是养鸭业的一大危害[1-2].     

美国NIH公布最新口腔医学研究项目指南

2003年12月16日美国国立卫生研究院(National Institutes of Health,NIH)所属的牙颅颌研究所(National Institute of Dental and Craniofacial Research,NIDCR)公布了2004年口腔医学项目指南(program announcements,PAs),该指南涉及口腔医学基础、应用基础和临床研究。