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51.
复合诱变原生质体选育耐热碱性蛋白酶高产菌 总被引:14,自引:0,他引:14
以地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)53号为原始菌株,在原生质体形成和再生的最佳条件下制备原生质体,对原生质体进行复合诱变,对大量再生突变株进行筛选,最终获得了高产、稳定、耐热的碱性蛋白酶产生菌53-G38-6,产酶活力由1104U/ml提高到22080U/ml。适宜的发酵条件:培养基(%)胰蛋白胨1,酵母膏0.5,玉米粉5,Na_2HP0_4·12H_20 0.4,KH_2P0_4 0.03,Na_2CO_3 0.1,自然pH。42℃旋转培养44~48h,得到的蛋白酶热稳定性强,60℃处理1h剩余酶活55%。酶反应最适条件:62℃,pH10.0,在pH9~10.5范围内稳定。 相似文献
52.
53.
游离氨基酸组分分析表明,水稻培养细胞中谷氨酸和丙氨酸含量很高,占氨基酸总量的40%。高脯氨酸愈伤组织变异体总游离氨基酸含量比原型高45.5%,其中脯氨酸增加最多,其次是雨氨酸和谷氨酸。当NaCl100mmol/L处理时变异体和原型的总氨基酸都增加,而变异体的增量约为原型增量的3倍。蛋白水解氨基酸组分中变异体和原型各氨基酸的相对含量无大差异。蛋白质双向电泳表明,高脯氨酸变异体的蛋白组分发生变化,明显比原型多4个蛋白点。在NaCl100mmol/L处理下原型亦产生53.3kD蛋白,变异体中该蛋白的含量变得更多。盐胁迫下变异体和原型的蛋白质组分变化的差异十分显著,主要表现在蛋白质等电点的变化不同。 相似文献
54.
用蛋白质工程方法改变葡萄糖异构酶最适pH和最适温度 总被引:5,自引:2,他引:3
用寡核苷酸诱导的定点突变方法构建了葡萄糖异构酶基因的突变体(N184D和A198C)。含突变体的重组质粒pTKD-GI1(N184D)和pTKD-GI2(A198c)在E.coliK38菌株中表达,用DEAE-Sepharose FF和Sephacryl S-300HR柱层析分离纯化突变酶。与野生型葡萄糖异构酶比较实验表明:(1)突变酶N184D的最适pH值下降了1个单位;等电点下降了0.6个单位 相似文献
55.
对RA、HHT和WB652诱导HL-60细胞过程中,细胞浆和膜溶脱部分的蛋白质酪氨酸磷酸化水平变化进行了对比研究。结果发现,在胞浆部分主要有四种含有P-Tyr的蛋白,而且80kD蛋白酪氨酸磷酸化水平随着诱导发生变化。诱导前后内源性蛋白上P-Tyr百分含量也发生了改变。 相似文献
56.
耐碱性巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)9-A2经紫外线、甲基磺酸乙酯和硫酸二乙酯等多次诱变处理,获得一株产碱性α-淀粉酶能力较高的变异株L-49。L-49菌株比出发株的产酶能力提高近2.5倍,当以酵母膏为氮源,可溶性淀粉为碳源,初始pH9 ̄10,种龄18h,接种量5%(V/V),30℃培养48h,酶活力可达730μ/ml。 相似文献
57.
用二次回归旋转组合设计研究了基本亩数(X_1)、基苗氮肥(X_2)、孕穗期氮肥(X_3)、过磷酸钙(X_4)和氯化钾(X_5)用量对小麦籽粒蛋白质含量的影响.结果表明,X_4、X_1和X_2对蛋白质含量有显著作用,因素之间存在着复杂的互作效应.利用计算机模拟选优,获得了本试验条件下蛋白质含量大于13%的5个农艺因素组合方案,X_1=172.35~186.75万/ha;x_2=116.6~123.6kg/ha;x_3=33.75~39.15kg/ha;x_4=333.9~448.8kg/ha;x_5=190.65~233.10kg/ha. 相似文献
58.
59.
60.
建立了一种简单快速微量的无细胞体系检测蛋白质合成的方法,在总体积55μl的体系中加20μl兔网织红细胞裂解液,在37℃培养30min能使其中的3H-Leu参入量达到最大,运用该方法可以筛选出植物组织中对真核细胞蛋白质生物合成具有强烈抑制作用的单链核糖体失活蛋白(单链毒素)。 相似文献