人骨肉瘤OS-732细胞系诱导血管生成作用及相关因子表达的研究

应用鸡胚绒毛尿囊膜模型（chick embryo chorioallantoic membrane,CAM),观察人骨肉瘤OS-732细胞系诱导血管生成过程及血管生长相关因子的表达。结果显示,本细胞系具有较强的促血管生成能力并表达血管内皮生长因子（vacular endothelial growth factor,VEGF),碱性成纤维细胞生长因子（basic fibroblast growth factor,bFGF0,鸡胚绒毛尿囊膜OS-732细胞系接种瘤细胞中血管内皮生长因子（VEGF）,转化生长因子β1(Transforming growth factor,TGF-β1）均呈阳性表达,而且VEGF呈持续高表达,结果表明VEGF,bFGF、TGF-β1可能共同参与骨肉瘤OS-732细胞系诱导的血管生成,而VEGF可能起着主要作用,提示阻断VEGF的作用可能影响骨肉瘤OS-732细胞系诱导的血管生成,此研究为以VEGF为靶点进行抗血管生成实验提供了依据。     

人肝癌细胞系HHCC中CD147和MMP—2共存了的免疫组织化学研究

应用免疫组织化学ABC法结合激光共聚焦显微镜观察了CD147分子和MMP-2在人肝癌HHCC细胞系中的表达,结果表明在HHCC细胞中CD147分子和MMP-2均呈免疫反应阳性,CD147反应位于核膜和核周胞质,MMP-2反应位于胞浆。     

斜纹夜蛾核型多角体病毒DNA诱导同源昆虫细胞的凋亡

发现野生型斜纹夜蛾核型多角体病毒（Spodoptera litura nuclear polyhedrosis virus,SpltNPV）DNA转染SL-1细胞能诱导细胞凋亡.SpltNPV-DNA转染其同源细胞系斜纹夜蛾核SL-1细胞6 h后,光镜下即可见细胞膜表面突出或形成小泡,细胞碎裂成凋亡小体,18 h后,细胞100%碎裂成凋亡小体.DAPI荧光染色显示感染细胞核渐呈半月形,直至碎裂被凋亡小体包裹.被转染的SL-1细胞DNA琼脂糖凝胶电泳呈典型梯形谱带.野生型SpltNPV病毒粒子感染的SL-1细胞既无多角体的出现,也无凋亡现象的发生.     

RAB5A基因表达改变对人肺腺癌细胞系GLC-82和SPC-a1的分化和侵袭特性影响

为探讨RAB5A基因对两种人肺腺癌细胞系GLC－82和SPC－al分化及侵袭特性的影响。利用细胞转染技术将构建的RAB5A反义RNA重组质粒（pcDNA3-AntiRAB5A)和RAB5A正义真核表达载体分别转染入低分化人肺腺癌细胞系GLC－82和低转移人肺腺癌细胞系SPC－al中,在稳定筛选后,通过裸鼠体内实验和体外人工基底膜侵袭和细胞趋化运动实验,观察观察转染后细胞分化和转移特性的改变,观察转染前后细胞,发现转染后GLC－82细胞体外侵袭重组基底膜能力及趋化运动能力降低（t检验P＜0．02）;裸鼠体内成瘤实验,瘤块切片病理观察转染后GLC－82细胞出现腺腔样及基底模样结构,分化程度增高,转染后SPC－al细胞体外趋化运动能力,侵袭重组基底膜能力均增强(t检验P＜0．02）。RAB5A基因通过影响细胞的体外趋化运动能力,侵袭重组基底膜能力等对GLC－82和SPC－al细胞的侵袭表型形成及GLC－82细胞的分性发挥重要作用。     

革兰阴性杆菌内毒素诱导肝癌腹水瘤细胞系Hca-F25/CL-163A3凋亡作用的研究

目的：研究革兰阳性球菌、革兰阴性杆菌以及革兰阴性杆菌（GNB）的内毒素对小鼠肝癌腹水瘤细胞系Hca-F25/CL-163A3的杀伤作用与诱导细胞凋亡作用。方法：利用美国B-D公司生产的FACS-Cal-ibur流式细胞仪检测与革兰阳性球菌、革兰阴性杆菌、革兰阴性杆菌内毒素共育后的肿瘤细胞凋亡。结果：革兰阳性球菌产生凋亡不明显,革兰阴性杆菌、标准细菌的内毒素分别共育后的肿瘤细胞在G0/G1峰前,均产生一个典型的凋亡峰-AP峰。结论：革兰阴性杆菌的内毒素是对肿瘤细胞的诱导凋亡作用的主要成分。     

核糖核酸酶抑制因子对H_2O_2损伤的大鼠神经胶质瘤细胞系C6的影响

核糖核酸酶抑制因子 (ribonucleaseinhibitor,RI)是广泛存在于哺乳动物细胞浆中的一种酸性糖蛋白 .为了进一步了解RI的功能 ,根据RI分子结构富含巯基的特点 ,研究了RI对过氧化氢(H2 O2 )损伤的大鼠神经胶质瘤细胞 (C6 )的影响 .用不同浓度的H2 O2 分别作用于转染有RIcDNA并且RI过表达的C6细胞和正常C6细胞 ,对比损伤前后 2者的细胞存活率、LDH漏出量、细胞内GSH和MDA含量差别 ,以及细胞内抗氧化酶类GPX、CAT和GST活性的差别 .结果表明 ,与正常C6细胞相比 ,RI过表达的C6细胞在H2 O2 作用下存活率高 ,LDH漏出量、MDA含量明显减少 ,而细胞内GSH较多 ;RI过表达的C6细胞在损伤前后均表现出更强的CAT和GST活性 .提示RI具有抗氧化功能 ,能够减轻H2 O2 所致的细胞过氧化损伤 .     

地塞米松对HepG2细胞分泌载脂蛋白的影响

以培养的人肝癌细胞系HepG2为研究对象,采用“冻干浓缩培养液载脂蛋白测定法”,考察了地塞米松对HepG2细胞载脂蛋白(apolipoprotein,apo)AⅠ、AⅡ、CⅢ、B100及E分泌的影响.结果表明：地塞米松对HepG2细胞apoAⅠ和apoE的分泌有促进作用,对apoAⅡ、apoB100和apoCⅢ的分泌有抑制作用,且这种作用随地塞米松浓度的增加而增强.当培养液中地塞米松的浓度为5.5×10^－5mol/L时,apoAⅠ和apoE的分泌分别增加36.6%和49.4%（P＜0.01）,apoAⅡ、apoB100和apoCⅢ的分泌分别减少38.9%、31.9%和29.8%（P＜0.01）.     

量子点应用于人骨肉瘤HOS细胞系研究的生物毒性评价

目的:将合成的两种量子点应用于研究人骨肉瘤HOS细胞系,初步检测其生物毒性,以确定本研究所制备量子点可否应用于骨肉瘤的基础研究。方法:将生长良好的HOS细胞与制备的两种量子点分别共培养,使用MTT试剂盒检测不同时间点细胞活性,实验进行三次,取其平均值,分析所得数据,并绘制出量子点浓度-细胞活性曲线,分析得出两者之间的量效关系。结果:1.4μM的CdTe/ZnS QDs和0.275μM的Cd Te/Cd S QDs分别是本实验中对HOS细胞的最高毒性浓度。较短时间(30 min)的暴露分别导致了48.6±0.9%和31.9±0.8%的细胞死亡,3 h后分别有33.7±2.3%和49.4±1.1%的细胞存活。而在孵育了18 h之后,只有28.0±1.6%和15.3±1.6%的细胞存活。我们可以观察到均为典型的时间/浓度曲线。结论:选用适宜浓度以及共培养时间,本实验制备的量子点完全可以满足纳米量子点粒子使用于HOS细胞研究的基本生物学条件,可以进行人骨肉瘤HOS细胞测温等的一些列实验操作。由于量子点自身优越的光学性能以及可接受的生物安全性,在肿瘤研究领域具有很大的潜力,将会成为肿瘤示踪、检测、以及靶向治疗新的有力工具。