转化生长因子beta在热应激导致小鼠神经管畸形发生中的表达

本研究旨在探讨热应激致神经管畸形（NTDs）中转化生长因子beta（TGF-beta）的表达情况。选用昆明小鼠40只,实验组20只小鼠于妊娠后8．5天（E8．5）在42℃温箱中喂养30分钟,进行热应激处理,建立小鼠胚胎NTDs模型。对照组不处理。11．5d取胎鼠,通过体视显微镜和组织学切片观察实验组和对照组神经管发育情况,计算神经管畸形发生率;     

碱性成纤维细胞生长因子体外诱导P19细胞分化为心肌样细胞

应用碱性成纤维细胞生长因子（FGF-2）体外诱导P19细胞向心肌细胞分化,摸索适宜P19细胞向心肌细胞分化条件。将P19细胞接种于铺有0．5％软琼脂的培养皿中,用含FGF-2的分化培养基培养P19细胞,24h后即可见多个悬浮的细胞团形成,大部分形状较规则,直径随时间延长不断增大,至第4天形成细胞聚集体／EBs,形状规则、体积较大,少量EB呈囊性,隐约可见内细胞团样结构。     

拉伸刺激下MGF在成骨细胞中的表达及亚细胞定位分析

力生长因子（mechano-growth factor,MGF）是在成肌细胞中发现的一种对拉伸刺激敏感的生长因子,该生长因子也可能在其他的力效应细胞中由力学刺激产生.通过设计细胞拉伸装置,对成骨细胞施加不同时段的周期性动态拉伸刺激.定量分析mRNA和蛋白质表达显示,周期性拉伸刺激下成骨细胞中的MGF mRNA和蛋白质水平快速提高,mRNA的水平在加载6h达到最高峰,与静态对照组相比提高5倍,而MGF的蛋白表达需要加载12h达到最高,与对照相比提高了5.2倍,随后二者分别降低,在24h达到本底水平.荧光免疫细胞化学技术检验MGF在细胞中的分布发现,MGF具有核分布的特点.因此得出结论,周期性拉伸刺激能刺激成骨细胞快速表达,MGF核分布的特点暗示MGF可能是一种自分泌作用因子.     

白芨萜类化合物对人脐静脉内皮细胞凋亡和细胞骨架的作用

利用白芨萜类化合物处理人脐静脉内皮细胞（HUVECs）并进一步研究了细胞凋亡及细胞骨架.白芨萜类化合物可拮抗血管内皮细胞生长因子（VEGF）和碱性成纤维细胞生物因子（bFGF）刺激的HUVECs增殖并诱导细胞凋亡.在处理的HUVECs中caspase-8活性明显增加.流式细胞术分析显示经处理的HUVECs的凋亡率随处理时间延长而升高.通过对微管进行免疫荧光染色和微丝进行荧光染色后,用激光共焦扫描显微观察表明,白芨萜类化合物处理的HUVECs中的微管和微丝发生改变甚至被破坏.因此,白芨萜类化合物造成HUVECs凋亡很可能是通过促使微管解体以及微丝去组装造成的.     

EGFR和KDR在胃癌组织中的表达及临床意义

探讨表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor,EGFR）和含激酶插入区受体（kinase-insert domain-containing receptor,KDR）的表达与胃癌临床病理特征的关系及其临床意义.应用免疫组织化学PV法,检测60例胃癌组织中EGFR和KDR的表达情况,并且分析其与临床病理特征的关系.胃癌组织中EGFR和KDR阳性表达率分别为48.3%（29/60）、63.3%（38/60）,二者的阳性表达与浸润深度、淋巴结转移、TNM分期相关（P〈0.05）,并且存在共表达现象,表达强度呈正相关（rs=0.664,P〈0.05）.EGFR和KDR在胃癌的进展中起协同作用,为靶向EGFR和KDR生物治疗制剂在胃癌生物治疗中的应用及联合应用提供了一定的理论依据.     

用BIAcore系统研究西妥昔单克隆抗体与表皮生长因子受体的结合

目的：应用基于表面等离子体共振技术的BIAcore3000系统研究国产西妥昔单克隆抗体（cetuximab）C225与可溶性重组人表皮生长因子受体（EGFR）的结合能力,并与国外已上市的西妥昔单抗Erbitux相比较。方法：在CM5传感器芯片上设置2个通道,一个氨基偶联重组人EGFR作为检测通道,另一个不固定EGFR作为空白参比通道;以HBS溶液作为工作液,流速为10μL／min;活化与封闭芯片;再以10μL／min的流速分别以梯度浓度进样C225和Erbitux,每个浓度级别检测2次;获得结合动态图谱,拟合处理后用软件模块进行参数计算。结果：C225与可溶性重组人EGFR的结合动力学常数K^为4．00×10^8L／mol,KD为2．50×10^-9mol／L;而Erbitux与可溶性重组人EGFR的结合动力学常数KA为4．25×10^8L／mol,KD为2．35×10^-9mol／L。结论：在与可溶性重组人EGFR的结合能力上,C225与Erbitux有相似的结合动力学特性。     

甘草甜素对肾脏转化生长因子β1作用的实验研究

目的:探讨甘草甜素对肾小球硬化模型中转化生长因子β1(TGFβ1)作用.方法:采用尾静脉注射阿霉素方法建立大鼠肾小球硬化模型.实验随机分为模型组、治疗组和对照组.检测各组第4和8周各项指标的变化.包括①24h尿蛋白定量,血尿素氮(BUN)、肌酐(Scr)、胆固醇(Cho)和白蛋白(Alb).②各组肾皮质进行光镜等病理学检测.③应用免疫组织化学方法检测肾组织内转化生长因子β1(TGFβ1)蛋白质的表达.④采用标准曲线法进行荧光定量PCR检测肾组织内TGFβ1 mRNA的表达.结果:①治疗组与模型组相比较,24h尿蛋白定量、BUN、Scr、Cho和Alb均有不同程度改善(p<0.05).②肾皮质病理学改变肾小球硬化程度治疗组明显轻于模型组.③肾组织内TGFβ1蛋白和mRNA表达治疗组与模型组比较表达峰值均有不同程度降低(p<0.05).结论:从蛋白和mRNA水平同时证实甘草甜素对TGFβ1蛋白和mRNA的表达有明显的抑制作用,对大鼠肾小球硬化有早期保护作用,为临床应用提供了依据.     

人造血干细胞因子

干细胞因子（stem cell factor,SCF）是一种重要的造血生长因子,它在造血干细胞动员、肿瘤放疗化疗的辅助治疗、贫血、放射病及其他血液病的治疗等方面具有重要的应用前景。采用基因全合成的方法实现rhSCF基因的克隆和高效表达,表达水平达到30％～40％。在工程菌发酵、rhSCF纯化和复性等中下游技术研究的基础上建立了rhSCF生产工艺,回收率大为35％,纯化产物纯度不低于98％．比活性0．9×10^6U／mg。     

PCDGF在乳腺癌中的表达及其对肿瘤血管生成的影响

目的:研究畸胎瘤细胞源性生长因子(PC cell-derived growth factor,PCDGF)的表达与乳腺癌血管形成的关系及其临床意义.方法:采用免疫组织化学的方法对130例乳腺手术标本中的PCDGF及其中70例乳腺癌组织中的血管内皮因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、微血管密度(mean microvessel density,MVD)的表达情况进行检测.结果:乳腺癌中PCDGF的表达显著高于非乳腺癌组织(P＜0.05).乳腺癌中PCDGF阳性组MVD水平明显高于阴性组(P＜0.01),VEGF阳性组MVD水平明显高于阴性组(P＜0.01),二者表达呈正相关(P＜0.05).o结论:PCDGF在乳腺癌中特异性表达,调节协同VEGF调控乳腺癌血管形成,有望作为乳腺癌早期诊断指标和抗血管治疗的新靶点.     

VEGF-C、COX-2在乳腺癌中的表达及其临床意义

目的:探讨血管内皮生长因子与环氧化酶-2在乳腺癌组织中的表达和临床意义.方法:应用免疫组织化学检测乳腺癌组织中血管内皮生长因子和环氧化酶-2的表达,分析两者的关系,并结舍临床资料进行相关性分析.结果:VEGF-C和COX-2在乳腺癌组织中的表达率分别为58.7%和56.5%,VEGF-C在乳腺癌中的表达与肿瘤大小、淋巴结转移相关(P＜0.05),与年龄、雌、孕激素表达、Her-2情况及临床分期无相关性,COX-2蛋白的表达也与淋巴结转移有关(P＜0.05),与年龄、肿瘤大小、雌、孕激素表达、Her-2情况及临床分期无明显相关性.乳腺癌组织COX-2蛋白的阳性表达与VEGF-C蛋白阳性表达之间存在显著的相关性(r=0.422,P＜0.005)结论:COX-2和VEGF-C在乳腺癌组织中均呈较高袁达,乳腺癌组织中COX-2及VEGF-C的表达均与肿瘤的淋巴结转移情况相关.乳腺癌组织中COX-2的表达与VEGF-C的表达存在显著的相关性,提示在COX-2可能上调VEGF-C的水平,促进淋巴结转移.