三种蛙类呼吸系统比较解剖及进化关系探讨

对昆明地区滇蛙Rana pleuraden和昭觉林蛙R.chaochiaoensis及大蹼铃蟾Bombina maxima的呼吸系统比较解剖,结果表明,3种蛙鼻孔的开合与颏下肌的收缩无关;大蹼铃蟾的内鼻孔较昭觉林蛙与滇蛙的更靠近口前端;昭觉林蛙和滇蛙的下颌下肌倾斜走向,大蹼铃蟾的呈水平走向;滇蛙和昭觉林蛙喉气管室较膨大而长,环状软骨后端有棘突,大蹼铃蟾喉气管室狭小而短,环状软骨后端无棘突;昭觉林蛙和滇蛙喉肌共5对,大蹼铃蟾喉肌仅有喉口开肌和前杓肌2对;昭觉林蛙和滇蛙肺囊表面沟回较大蹼铃蟾的小而密.     

农药乐果对昭觉林蛙蝌蚪的耐受性研究

采用水生生物急性毒性试验方法,研究乐果对昭觉林蛙Rana chaochiaoensis蝌蚪的急性毒性影响,同时运用扫描取样法对正式实验的昭觉林蛙蝌蚪进行行为观察.结果 表明:昭觉林蛙蝌蚪在试验组中正常静止行为、异常静止行为、正常运动行为、异常运动行为分别占74.08%、9.41%、0.58%、2.36%;在对照组中,只有正常静止行为和正常运动行为,分别占90.99% 和9.01%.乐果对昭觉林蛙蝌蚪24 h、48 h、72 h、96 h的半致死浓度 (LC50) 分别为:76.97 mg/L、67.85 mg/L、56.61 mg/L、52.80 mg/L,呈现出线性关系,安全浓度 (SC) 为5.28 mg/L.因此,乐果对昭觉林蛙蝌蚪当属于低毒性农药.但是当乐果残留量超过安全浓度时,将会影响昭觉林蛙蝌蚪的正常生长发育,并对其行为产生影响.     

中国林蛙的骨骼系统

研究了中国林蛙Rana chensinensis的骨骼系统,对各部分的形态结构进行了详细的描述.鼻骨与已报道的粗皮蛙和泽蛙有所不同;鼻腔骨的形状与粗皮蛙差异极大,而与泽蛙较为接近;第8椎体双凹型,属典型的参差型脊柱;肩胸骨的基部无分叉,也无缺刻,与泽蛙和粗皮蛙不相同,上胸骨较粗皮蛙大,形状与泽蛙有差异.肩带为固胸型.     

从细胞色素b基因序列探讨我国林蛙属动物的系统发生关系

对中国林蛙属动物进行了DNA水平的分子系统发生研究,测定了中国林蛙属7种15个样品,侧褶蛙属2种2个样品Cyt b基因长约360bp片段的序列。对这些序列的系统发生分析表明：（1）中国林蛙甘肃种群与东北种群序列差异较大,但尚难根据序列差异来判断它们是不同的亚种还是不同的物种;（2）7种林蛙中,中国林蛙与黑龙江林蛙的亲缘关系最近,与桓仁林蛙最远;（3）支持将昭觉林蛙,镇海林蛙,峨眉林蛙和长肢林蛙归入日本林蛙种组Rana japonica group。     

秦岭北坡中国林蛙精巢显微结构的年周期变化

用光镜观察了秦岭北坡中国林蛙(Ranachensinensis)精巢显微结构的年周期变化,结合精巢系数的变化探讨其生殖规律。结果显示,秦岭北坡中国林蛙的生精周期属于非连续型。精巢系数的变化与精子发生的活动周期相一致。精子发生从每年5月开始,翌年4月结束,历时1年。生精周期可划分为5个时期。Ⅰ期,精原细胞增殖期,5～7月,精巢系数最小,精原细胞进行有丝分裂;Ⅱ期,精母细胞成熟分裂期,8～9月,精巢系数最大,精原细胞、精母细胞和精子细胞在生精小管内共存;Ⅲ期,精子形成期,9～1 0月,精子细胞变态形成精子;Ⅳ期,成熟精子贮存越冬期,1 1月至翌年2月,成熟精子贮存在生精小管中;V期,精子排放期,翌年3～5月,精巢系数显著下降,成熟精子从生精小管脱离,通过输精管道排出体外。     

杀虫双溶液对峨嵋林蛙(Rana omeimontis) 蝌蚪行为的影响

研究了峨嵋林蛙(Rana omeimontis)蝌蚪在杀虫双溶液中半致死浓度及其行为。利用寇氏法(Karber法)计算其96h内的半致死浓度为10．495mg/l,安全浓度为1．0495mg/l;运用方差分析检验了不同浓度中空间分布和活动性等行为的差异性。通过对空间分布型的拟合,可以得出：不论在实验组中还是在对照组中,蝌蚪在水族箱中的空间分布均为负二项分布,并且方差分析结果表明对照组和实验组中聚集度(负二项分布的参数k值)大小差异不显著,说明在此浓度范围内杀虫双对蝌蚪的微空间分布格局没有影响。而蝌蚪在杀虫双溶液中的活动性分析表明,0．25mg／l的杀虫双溶液对蝌蚪的活动性行为已经造成一定的影响,所以建议寻找安全浓度时,应该结合行为方面标的观察结果。     

双酚A对中国林蛙生精细胞凋亡和Bax、Bcl-2表达的影响

为探讨双酚A(BPA)对两栖动物生精细胞凋亡及相关蛋白Bax和Bcl-2表达的影响.将雄性中国林蛙(Rana chensinensis)分别暴露于10-7、10-6、10-5 mol/L BPA水体中持续3 d、5 d、7 d,取其精巢组织.用原位末端转移酶法(TUNEL)和甲基绿-派诺宁法(Methyl Green-Pyronine)检测生精细胞凋亡,用免疫组织化学方法检测生精细胞的Bax和Bcl-2表达.结果显示,各BPA处理组中国林蛙生精细胞凋亡指数(Apoptotic index,AI)均显著高于对照组,10-6 mol/L与10-7 mol/L BPA处理组生精细胞的AI差异不显著,10-5 mol/L BPA处理组生精细胞的AI与前两组相比显著增高;在同一BPA浓度处理组,生精细胞AI随处理时间的延长而增高.与对照组相比,各BPA处理组Bax表达上调,Bcl-2表达下调,差异均显著;生精细胞AI与Bax/Bcl-2表达呈正相关.这些结果提示,BPA可导致中国林蛙的生精细胞凋亡,而生精细胞凋亡的发生与Bax/Bcl-2表达比值的变化密切相关.     

中国林蛙蝌蚪对碳酸盐碱度的适应性

为了解中国林蛙蝌蚪对碳酸盐碱度的适应性,在水温16～18℃、pH7．0～8．5的野外条件下,采用单因子静态急性毒性实验方法,进行了碳酸盐碱度对中国林蛙蝌蚪的急性毒性实验。结果表明：碳酸盐碱度对中国林蛙蝌蚪的24、48、72、96h半致死量(LD50)分别为14．13、11．92、9．98、7．07mmol／L,零致死量(LD0)分别为9．75、8．64、6．1l、3．79mmol／L,全致死量(LD100)分别为20．16、16．44、16．3l、13．22mmol／L,安全量(SD)为2．54mmol／L。野外蝌蚪饲养池水体碳酸盐碱度的适宜范围在1．0～3．0mmol／L。     

日本林蛙胃肠道内分泌细胞的免疫组织化学

应用7种胃肠激素抗血清对日本林蛙胃肠道内分泌细胞的形态和分布进行了免疫组织化学研究。5-羟色胺(5-HT)免疫活性(-IR)细胞分布于胃肠道各段,其在胃肠道中的分布密度为：十二指肠、空肠处最高,胃中各段居中,回肠和直肠处最低。生长抑素(sS)-IR细胞分布于胃贲门至空肠的胃肠道段,其分布密度自前向后呈递减趋势。胃泌素(Gas)-IR细胞在十二指肠和空肠处有少量分布。高血糖素(Glu)-IR细胞仅见胃体部位较少分布。P_物质(SP)-IR细胞在回肠和直肠中有分布。胃肠道各段均未检出胰多肽(PP)-IR细胞和胰岛素(Ins)-IR细胞。与其它动物相比较,对日本林蛙胃肠道内分泌细胞的分布型进行了讨论。     

昆明地区昭觉林蛙生殖及附属器官的年周期变化

解剖2006年4—12月自昆明东北郊采集到的体长大于40.0mm的昭觉林蛙(Rana chaochiaoensis)标本73只(♀39,♂34),测量其体长、体重、肝重、脂肪体重、卵巢重、精巢重、输卵管重和直径、卵径等。以体长(或体重)为协变量做协方差分析(ANCOVA),结果显示,输卵管直径、卵径,雌性的肝重、脂肪体重、卵巢重和输卵管重和雄性的精巢重在年周期内差异极显著。相关性检验显示,雌性卵巢重分别与肝重、输卵管重、输卵管直径、卵径均显著正相关,即它们的发育完全同步,但与脂肪体重不相关。各月雌体卵巢重和雄体精巢重的发育极显著正相关,即雄性与雌性的性腺发育同步。据解剖、检验分析及野外观察结果分析证明,昆明地区昭觉林蛙的繁殖时间在10月完成,且一年只有一个繁殖期。脂肪体在雌性个体生殖腺发育过程中起供能作用。在卵巢发育过程中,肝供能作用不明显,但在雌性个体抱对和产卵过程中起供能作用。在雄性性腺发育的过程中,肝和脂肪体的供能作用不如雌性明显,耗能极低。可见昭觉林蛙雄性个体的生殖投入少于雌性个体。一些雌性个体推迟冬眠时间,主要是为觅食和补充能量,以便安全越冬。此外,新生昭觉林蛙蝌蚪期在冬季度过,随后的发育和变态面临旱季缺水环境。所以,加强对昭觉林蛙产卵高峰期、蝌蚪越冬期和渡过干旱缺水期等生活周期中脆弱环节的环境保护,有利于种群的延续。