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141.
用BamH1和CIP处理pCB20质粒,Sau3Al部分降解枯草杆菌抗阿霉素突变株染色体DNA,T4连接酶连接载体和DNA片断,构成表达文库。用这个文库分别转化枯草杆菌BD224菌株感受态细胞和原生质体。 相似文献
142.
143.
以基因枪介导获转ps1—barnase基因的工程雄性不育水稻植株 总被引:17,自引:0,他引:17
以ps1-barnase(brn)为目的基因,pHcintG(PG)为选择/标记基因进行共转化,以PDS-1000-氦气基因枪介导,将brn及PG基因转化到水稻台北309及秋光的核DNA中,得到了转ps1-barnase基因的工程雄性不育植株。以悬浮细胞作为基因枪轰击的靶材料,转化植株再生频率较初级愈伤组织的为高。转brn基因植株的其他主要性状与供体亲本无显著差异,但却表现不育。其不育的程度在不同的植株之间表现不同。在转brn基因植株中观察到全不育(占全部brn阳性植株的40.6%)、高不育(占15.6%)及半不育的个体(占43.7%)。全不育的转基因植株自交完全不能结实(结实率为零),除个别植株外,花粉完全不被I-KI染色;而人工授以正常的花粉则可以获得杂交种子。而brn基因的阴性植株及未进行转化的对照植株则完全可育,表明转基因植株之雄性不育乃brn基因所致。结果表明,brn基因在水稻中是完全可以正常表达的,其表达的时期推测在花粉母细胞减数分裂前至花粉形成之间的整个时期。 相似文献
144.
一种简单、经济的植物RNA抽提方法 总被引:3,自引:0,他引:3
孟玲 谭德勇 王焕效 吕朝晖 王晓燕 周翔MENG Ling TAN De-yong WANG Huan-xiao LV Zhao-hui WANG Xiao-yan ZHOU Xiang 《遗传》1998,20(4):28-30
一种简单、经济的植物RNA抽提方法孟玲谭德勇王焕效吕朝晖王晓燕周翔(云南大学生物系,昆明650091)ASimpleEconomicalMethodfortheIsolationofPlantRNAMENGLingTANDeyongWANGHuanx... 相似文献
145.
枳壳外植体离体再生及农杆菌介导的遗传转化 总被引:5,自引:0,他引:5
以枳壳实生苗的上胚轴及茎段为材料,在附加有BA和MT培养基上进行培养,上胚轴出芽率普遍高于茎段,BA为1mg/L时,出芽率最高,BA浓度升高,出芽率随之下降。外植体在培养基上的接种方式,对出芽有一定影响,上胚轴切段 形态学下端垂直插入,出芽率高。 相似文献
146.
利用农杆菌系统将超甜定基因导入烟草 总被引:8,自引:1,他引:7
由pUR528构建中间载体pEHT9,再构建超甜定植物表达载体pBIT7。通过直接转化法将pBIT7导入农杆菌,然后利用农杆菌系统转化烟草。经PCR、PC R-S outhern和Southern杂交证实,超甜定基因已整合到烟草基因组中。
Abstract:pEHT9 was constructed from pUR528,and used for the construction of plant thaumatin expression vector pBIT7.Then pBIT7 was introduced to Agrobacterium through direct transformation.Subsequently tobacco was transformed through Agrobacterium-mediated system.It has been confirmed that thaumatin gene has integrated into the genome of transgenic tobacco by PCR,PCR-Southern and Southern blot analyses. 相似文献
147.
摘要 目的:探讨结直肠癌(CRC)组织微小RNA-137-3p(miR-137-3p)、微小RNA-410-3p(miR-410-3p)的表达与上皮间充质转化(EMT)和预后的关系。方法:选取2017年2月至2019年2月本院收治的115例接受CRC根治术治疗的患者,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测癌组织及癌旁组织中miR-137-3p、miR-410-3p表达、EMT标志物E-钙粘蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)的mRNA表达并进行相关性分析,分析癌组织中miR-137-3p、miR-410-3p表达与CRC临床病理特征的关系。术后随访3年,采用Kaplan-Meier法分析miR-137-3p、miR-410-3p高表达和低表达患者的预后情况。结果:癌组织中miR-137-3p表达及E-cadherin mRNA表达水平低于癌旁组织,miR-410-3p表达及Vimentin mRNA表达水平高于癌旁组织(P<0.05)。癌组织中miR-137-3p表达与E-cadherin mRNA表达水平、miR-410-3p表达与Vimentin mRNA表达水平分别呈正相关(P<0.05),癌组织中miR-137-3p表达与Vimentin mRNA表达水平、miR-410-3p表达与E-cadherin mRNA表达水平分别呈负相关(P<0.05)。miR-137-3p、miR-410-3p表达与TNM分期、肿瘤分化程度、淋巴结转移有关(P<0.05)。Kaplan-Meier生存曲线分析显示,miR-137-3p低表达、miR-410-3p高表达患者3年累积生存率下降(P<0.05)。结论:CRC组织中miR-137-3p表达下调、miR-410-3p表达上调,miR-137-3p、miR-410-3p表达水平与EMT密切相关,且miR-137-3p高表达、miR-410-3p低表达患者的预后更好。 相似文献
148.
酮酸脱羧酶作为异戊醇生物合成的关键酶,不存在于大肠杆菌中。以乳酸乳球菌的基因组DNA为模板,经过PCR扩增得到酮酸脱羧酶基因kivD(rbs),插入到大肠杆菌高效表达载体pET-28a(+)上形成pET-kivD(rbs),重组质粒热击转化进大肠杆菌BL21(DE3)中,其成功表达了酮酸脱羧酶。对发酵产物进行分析,检测到了微量的目标产物—异戊醇。 相似文献
149.
150.
目的:探讨转化生长因子beta1(TGF-beta1)在原发性肝癌组织中的表达及其与肿瘤侵袭和转移的关系。方法:选择288 例确诊为
原发性肝癌患者作为研究组,另选取274 例健康志愿者作为对照组。应用酶联免疫吸附法检测两组研究对象血清TGF-beta1 水平,
免疫组织化学标记法检测肝癌患者肿瘤组织、癌旁组织及正常肝脏组织中TGF-beta1 的表达情况,并结合临床病理资料进行相关性
分析。结果:原发性肝癌患者血清中TGF-茁1 水平明显高于对照组,差异具有统计学意义(P <0.01)。血清TGF-beta1 水平与肿瘤的组
织学分级、浸润深度及转移呈正相关(P <0.01)。肝癌患者肿瘤组织中TGF-beta1 表达水平明显高于正常肝脏组织及癌旁组织,差异
具有统计学意义(P <0.01)。结论:血清TGF-beta1与原发性肝癌的侵袭和转移密切相关。TGF-beta1 可能会改变肿瘤微环境,增加侵袭
和转移的潜力。 相似文献