全文获取类型
收费全文 | 3556篇 |
免费 | 199篇 |
国内免费 | 1395篇 |
出版年
2024年 | 49篇 |
2023年 | 94篇 |
2022年 | 136篇 |
2021年 | 112篇 |
2020年 | 125篇 |
2019年 | 119篇 |
2018年 | 94篇 |
2017年 | 83篇 |
2016年 | 127篇 |
2015年 | 144篇 |
2014年 | 284篇 |
2013年 | 184篇 |
2012年 | 178篇 |
2011年 | 206篇 |
2010年 | 234篇 |
2009年 | 265篇 |
2008年 | 259篇 |
2007年 | 232篇 |
2006年 | 195篇 |
2005年 | 226篇 |
2004年 | 210篇 |
2003年 | 184篇 |
2002年 | 142篇 |
2001年 | 119篇 |
2000年 | 121篇 |
1999年 | 118篇 |
1998年 | 82篇 |
1997年 | 99篇 |
1996年 | 118篇 |
1995年 | 104篇 |
1994年 | 111篇 |
1993年 | 87篇 |
1992年 | 85篇 |
1991年 | 47篇 |
1990年 | 51篇 |
1989年 | 43篇 |
1988年 | 13篇 |
1987年 | 11篇 |
1986年 | 19篇 |
1985年 | 23篇 |
1984年 | 9篇 |
1983年 | 3篇 |
1982年 | 3篇 |
1981年 | 1篇 |
1958年 | 1篇 |
排序方式: 共有5150条查询结果,搜索用时 15 毫秒
51.
用抗单纯疱疹病毒(HSV)型共同性gC和gD单克隆抗体(McAb),包被Eppendorf管,捕捉HSV,同时加入3个引物:一个是HSV-1/HSV-型共同性上游引物,另两个分别是HSV-1和HSV-2型特异性下游引物。借此建立了能直接分型检测HSV的抗原捕获聚合酶链式反应(AC-PCR)。HSV-1的扩增产物为477bp,HSV-2的为399bp,两型病毒经AC-PCR扩增后产生分子量不同的DN 相似文献
52.
53.
54.
原位分子杂交研究肾综合征出血热尸检组织中汉坦病毒M和SRNA的分布 总被引:3,自引:0,他引:3
本文以核酸原位分子杂交法研究了国内不同地区HFRS尸检病例组织中病毒RNA的分布和定位。结果在19例病例组织中均可检测到病毒RNA。陕西及沈阳地区病例,阳性部位主要是各脏器上皮及实质细胞。江西地区病例,病毒RNA主要出现于各脏器组织内血管壁及毛细血管内皮细胞。广州一例,病毒RNA主要分布于肝脏灶性溶解性坏死区域,肺泡壁和肾间质血管等部位。病毒RNA主要定位于细胞胞浆,呈颗粒状或全浆阳性,也出现于部 相似文献
55.
采用聚合酶链反应(Polymeranse Chian Reation,即PCR)技术检测结核分枝杆菌Mycobacterium tuberculosis,一年多来共检测了100例结核(肺、肾结核)患者的痰和尿液标本,结果PCR检出阳性率为81%,对照用储菌涂片抗酸染色法,阳性率为58%,用常规培养法阳性率为20%。而对50例非结核患者的痰和尿液标本的检测,PCR法仍有6%的阳性率,而用涂片或常规培 相似文献
56.
PCR技术用于HBV DNA检测的研究进展 总被引:1,自引:0,他引:1
杨振 《微生物学免疫学进展》1995,23(4):231-234
PCR技术自八十年代在美国问世以来,已成功地用于多种病原体的检测,八十年代末在美国成功的利用此技术对HBV DNA进行了检测,我国在九十年代初也世开始了这方面的工作,并取得了成功,本文综合介绍国内外这方面的工作,并对一些具体的PCR方法进行了详细的介绍,并对利用PCR技术检测HBV DNA时因实验设计及操作误差造成的负面影响进行了讨论。 相似文献
57.
本文讨论了检测丙型肝炎病毒核糖核酸(HCVRNA)的样本来源和处理,引物的设计,合成和选择等问题;重点介绍了蛋白酶K消化法,聚乙二醇沉淀法,异硫氰酸胍一步法,硅凝胶提取法和直接捕获法提取HCV RNA的5种方法,以及一步PCR法,常规RT-巢式PCR,直接RT-巢式PCR,化学修饰的RT-巢式PCR,联合PCR,双温PCR和定量竞争性PCR等7种PCR方法检测HCV RNA,用PCR检测HCV RNA方法的标准化以及检测HCVRNA具有非常重要的意义。本文还介绍了一种新型的定量方法-bDNA信号放大技术检测HcVRNA。 相似文献
58.
PCR法快速检测临床标本中结核杆菌DNA 总被引:2,自引:0,他引:2
应用聚合酶链反应(PCR)快速检测临床标本(脑脊液、胸水、腹水、血、痰液)中的结核杆菌DNA,特异性扩增片段123bp,为结核杆菌的特异性重复序列IS6110部分基因。PCR检测人型结核杆菌的敏感性达10fgDNA。临床标本的PCR检测阳性率(23.3%)明显高于抗酸染色涂片(2.9%)和细菌培养(5.7%)的阳性率(P〈0.05)。通过设立对照系统及对扩增产物酶切分析,表明该法无假阴性结果(特异 相似文献
59.
本文以人分裂细胞核抗原(PCNA)基因作为目的基因,把包括PCNA基因5′端非翻译区(5′NTR)的24bp和编码38个氨基酸114 bp的顺序插入pTZ19R,构建与LacZ’5′端的融合基因。用寡核苷酸定点突变法在PCNA 5′NTR形成SD顺序,再用PCR法在SD顺序左右两侧分别随机突变6个和7个碱基,使它们与结构基因5′端顺序自发地形成各种可能的翻译起始区(TIR)二级结构。重组质粒转化JM109(DE3),以T7 RNA聚合酶-T7启动子调控转录。对288个重组子的β-gal活性测定表明,不同重组的表达量可相差55倍,其中9个表达量不同的重组子的RNA dot blot证实它们在转录水平无明显表达差异。由此提示,该研究策略和方法能有效地改变目的基因的TIR二级结构和捕获具有高翻译起始效率的表达克隆。 相似文献
60.
小麦条锈菌毒性小种及其无毒性突变型侵染初期,是不亲和反应的小麦叶片内可翻译mRNA水平迅速增加,而呈亲和反应叶片的增加幅度小且滞后。同时前者的Poly(A+)-RNA水平高于未接种对照,后者低于对照。32P标记实验证实不亲和反应叶片Poly(A+)-RNA的合成增加早于亲和反应叶片。Poly(A+)-RNA体外翻译产物经SDS-PAGE分离后,放射自显影图谱显示一些多肽条带的35S-Met相对掺入量有定量差异。 相似文献