鼻咽癌细胞中p53相互作用蛋白质的分离和鉴定

鼻咽癌中p53基因突变罕见,但绝大部分鼻咽癌中存在p53蛋白过表达/聚集且功能失活.然而,到目前为止p53蛋白失活的机制仍然不清楚.为揭示鼻咽癌中p53蛋白功能失活的机制,采用免疫共沉淀技术分别富集鼻咽癌细胞系HNE1和HNE2的p53结合蛋白,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）对免疫沉淀复合物进行分离,从胶中切取p53结合蛋白条带,胶内酶解后进行电喷雾串联质谱（LC-ESI-MS/MS）分析,得到相应的肽序列标签（peptide sequence tags, PST）,通过搜索数据库在鼻咽癌细胞系中鉴定了9个p53结合蛋白.分别是热休克蛋白70（HSP70）家族成员GRP-78和GRP-75、HSP90家族成员GRP-94、核纤层蛋白A/C （Lamin A/C）、α-actinin 4、Ezrin/Cytovillin、DNA复制准许因子/MCM3蛋白(DNA replication licensing factor/minichromosome maintenance 3 protein, MCM3)、CD98/4F2 heavy chain和蛋白激酶C（PKC）.并用免疫共沉淀和蛋白质印迹分析技术对HNE₁细胞蛋白条带3鉴定的p53相互作用蛋白之一HSP78进行了验证.首次在鼻咽癌细胞中鉴定了9个p53结合蛋白,为阐明鼻咽癌中p53蛋白聚集及失活的机制提供了重要依据和线索.     

编码流感病毒血凝素基因和CD40L的核酸疫苗抗小鼠流感研究

为了检测表达CD40L的质粒能台作为核酸疫苗佐剂提高A／PR8／34流感病毒血凝素(HA)DNA疫苗的免疫应答,构建了表达鼠CD40L的质粒,行将它与A型流感病毒的HADNA疫苗用电击的方法共同免疫BALB／C小鼠(各30μg),免疫两次,间隔三周,第二次免疫后1周,用致死量流感病毒A／PR8／34攻击。发现与单独免疫30μgHA相比,血清中抗HA的IgG抗体节明显提高,且以IgG2a抗体提高为主,小鼠体重减轻非常少且体重恢复加快。实验结果显示,CD40L能作为流感病毒核酸疫苗佐剂,提高小鼠抗流感病毒攻击的能力。     

中国银斑蛛属二新种(蜘蛛目:球蛛科)

记述了球蛛科银斑蛛属2新种:黄桑银斑蛛Argyrodes huangsangensis sp.nov. 和菱腹银斑蛛Argyrodes rhomboides sp.nov..并对环银斑蛛Argyrodes orbitus Zhu, 1988的雌蛛进行了补充描述.     

2DE-MS中膜蛋白质组的研究进展

2-维凝胶电泳(2DE)具有高分辨率、高通量等特点,已被广泛地用于蛋白质组的研究.然而,2DE-MS在膜蛋白质组学研究方面却有其局限性,主要因为:膜蛋白具有低丰度、难溶、等电点时易沉淀、难酶解等特点.然而随着亚细胞分离技术和直接的生化方法富集等技术的发展,低丰度问题得到了极大的改善;增溶剂(尿素,硫脲),新的两性离子和非离子去垢剂,以及有机溶剂等的利用极大地改善了膜蛋白质组的溶解性能;同时,一些新的2DE技术的利用扩大了常规2DE的分离范围.在膜蛋白裂解方面,将酶解法与化学法(CNBr)相结合,另外先进的质谱技术的发展使得膜蛋白质组的研究在最近几年取得了较大的发展.现对2DE-MS途径中,膜的富集、膜蛋白的提取、分离、酶解、鉴定方面的进展进行综述.     

白细胞与心肌缺血的关系

炎症是引发心血管疾病的一个重要的危险因子.白细胞数量增多的患者更容易患上急性心肌梗塞、急性冠状动脉等疾病.对临床上白细胞数量高的数据与疾病预测之间的关系,这其中可能有几种机制.测量白细胞的数量和亚群可能是区分急性血管疾病患者危险程度的一种更好的方法.     

基质金属蛋白酶与心肌重塑

细胞外基质参与和促进了心肌重塑的过程,基质金属蛋白酶是调节细胞外基质重要的酶,基质金属蛋白酶在心肌重塑过程表达变化可分为三个时相,其活性受到信号传导途径、炎症因子和活性氧/活性氮的调节,基质金属蛋白酶可能作为心肌梗塞等疾病治疗的靶标     

温度对不同类型早籼稻灌浆期间直链淀粉、蛋白质积累的影响

高温条件下早籼稻籽粒直链淀粉积累速率快,持续时间短;蛋白质含量高;灌浆前期谷草转氨酶和谷丙转氨酶活性高,开花11d后迅速下降．适温条件下籽粒直链淀粉积累速率慢,持续时间长;蛋白质含量低;谷草转氨酶和谷丙转氨酶活性变化缓慢,3个不同类型品种中适合作米粉的湘早籼33号直链淀粉含量最高,饲料稻湘早籼24号蛋白质含量最高．高温有助于湘早籼33号直链淀粉含量和湘早籼24号蛋白质含量的提高。     

人工雌核发育草鱼近交F1代线粒体DNA限制性内切酶分析

结合差速离心法、饱和酚／氯仿／异戊醇抽提等技术．提取并纯化了雌核发育草鱼近交F．代的线粒体DNA(mtDNA)．用8种限制性内切酶对mtDNA酶切分析．结果表明：雌核发育草鱼近交Fl代mtDNA分子大小为16、77kb,除无sail酶切位点外,其余7种酶EcoRI、BalI、。YbaI、BarnHI、PstI、XhoI各产生4、4、3、3、3、2、2个切点。与已报道的普通草鱼一致．雌核发育草鱼近交F1代与普通草鱼间未检测出限制性片断长度多态性差异、这表明,雌核发育草鱼F。代与普通草鱼mtDNA遗传结构具有同一性、     

水蚤滞育的数量遗传学研究:遗传与环境控制及遗传作用

在单性生殖循环水蚤群体中,滞育卵由有性生殖产生．在一系列实验中用到了不同种群和种类的水蚤,通过这些实验来观察：1)有性生殖和滞育卵复苏的遗传和环境控制;2)生活在相同区域中,但有不同生存微环境的近缘种类的有性生殖的光周期反应;3)在群体遗传结构上有性生殖的遗传效应(基因型均值和生活史性状遗传方差)．结果发现：1)遗传作用和环境作用,以及两者的相互作用都对有性生殖和滞育卵的孵化有显著的影响．GE显著的相互作用对环境中观察到的有性生殖来说,有助于维持其较高的遗传方差;2)在相同区域中,不同生存微环境的近缘种类的有性生殖的光周期反应有所不同．这有助于进一步区别近缘的水蚤种类,这也可能是一个水环境中同素异形的物种形成的例子;3)在有性生殖上,生活史性状平均值和遗传方差变化与前代选择造成的均值和遗传方差相反(遗传滑阻),这会造成暂时的适应不良(遗传滑阻和隐藏的遗传变异的表达),应对它补偿滞育的进化优势．     

湖南省乌云界自然保护区鱼类资源研究

利用样点全采集法在湖南乌云界自然保护区共采集到鱼类标本238条,它们隶属于4目11科32种．该地鱼类多样性系数(H′)为1．068．鱼类均匀度指数(J′)为0．835．优势种为马口鱼和波氏栉虾虎鱼。