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精子特异性乳酸脱氢酶(乳酸脱氢酶C4,LDH-C4)是精子能量代谢的关键酶类之一.为了研究前期发现的1个LDH-C4基因突变(L178X)对LDH-C4功能的影响,在已构建的LDH-C4原核表达载体pET-28a(+)-hLDHC的基础上,利用PCR定点诱变技术,制备了L178X突变体的原核表达载体pET-28a(+)-hLDHC/L178X,将其转化大肠杆菌BL21(DE3)plysS,诱导其表达.对该载体进行限制性酶切表明,插入的LDHC基因cDNA约1000bp;序列分析表明,该插入片段读框正确,带L178X突变.SDS-PAGE及免疫印迹显示,携带该载体的菌体可表达分子量约25kD的蛋白质,后者可被兔抗LDH-C4血清特异识别.乳酸脱氢酶(LDH)活性测定及活性染色表明,所表达的产物没有LDH活性.本研究成功进行了LDH-C4的1个突变体的原核表达,为研究LDHC基因突变对LDH-C4功能以及男性生育的影响奠定了基础. 相似文献
62.
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Background
Questions regarding the distribution of stress in the proximal human femur have never been adequately resolved. Traditionally, by considering the femur in isolation, it has been believed that the effect of body weight on the projecting neck and head places the superior aspect of the neck in tension. A minority view has proposed that this region is in compression because of muscular forces pulling the femur into the pelvis. Little has been done to study stress distributions in the proximal femur. We hypothesise that under physiological loading the majority of the proximal femur is in compression and that the internal trabecular structure functions as an arch, transferring compressive stresses to the femoral shaft. 相似文献64.
不同光质对烟草叶片组织结构及Rubisco羧化酶活性和rbc、rca基因表达的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
通过对烟草植株覆盖白、红、黄、蓝、紫色滤膜获得不同光质,研究了烟草叶片在7~70d的生长发育期内,不同光质处理对烟叶组织结构特征、核酮糖1,5-二磷酸羧化酶/加氧酶(Rubisco)羧化酶活性、Rubisco基因(rbc)表达及其活化酶(Rca)基因(rca)表达的影响。结果表明,与黄膜处理下生长的烟叶相比,红、蓝、紫膜处理下生长的烟叶有较高的叶片厚度、栅栏组织厚度、海绵组织厚度、栅栏细胞密度和较小的组织空隙率。此外,红、蓝、紫膜处理的叶片有较高的Rubis-co羧化酶活性和净光合速率及较强的rbc和rca基因表达。实验结果表明不同光质对烟草叶片的组织结构特征有显著影响,光质可能通过影响Rubisco羧化酶活性进而影响叶片光合效率,而光质、叶片组织结构和光合效率之间存在某种程度的相互联系。 相似文献
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T. WORTHINGTON P. S. KEMP P. E. OSBORNE A. DILLEN J. COECK M. BUNZEL‐DRÜKE M. NAURA J. GREGORY K. EASTON 《Freshwater Biology》2012,57(3):602-611
1. Availability of suitable habitat is a prerequisite for species reintroduction success, and to ensure population persistence, investigations of a species’ habitat utilisation throughout its life history should be conducted as part of a feasibility study. 2. Habitat utilisation models for burbot, Lota lota, developed using data from field studies conducted in France and Germany and information from the literature were used to assess the feasibility of reintroducing burbot into rivers of its former native range in eastern England. 3. Per cent tree roots, aquatic vegetation and flow types were important predictors of adult burbot abundance. Furthermore, the habitat utilisation models were supplemented with information from the literature, which suggested that off‐channel habitat such as wetlands and backwaters is important for spawning and nursery stages. 4. An assessment of the habitat availability in the rivers of the burbot’s former native range using variables related to spawning and nursery and adult life stages showed that although adult habitat was widely distributed, the availability of spawning and nursery habitat was less abundant, potentially limiting successful reestablishment. 5. Potential suitable habitat was concentrated in the central and southern areas of the species’ former English distribution. Overall, rivers of the burbot’s former range potentially afford suitable habitat to sustain a reintroduced population. However, sites should be preferentially selected on the basis of having appropriate spawning and nursery areas. 相似文献
66.
高维、小样本数据的特征选择方法在蛋白质质谱数据处理分析领域有着广泛应用。本文针对蛋白质质谱特征选择问题,结合稀疏表示这一新理论框架,提出了一种基于稀疏表示的特征选择算法(sparse representation based feature selection,SRFS)。该方法将稀疏表示分类的结果作为评定某一个特征子空间特征相对重要性的度量,然后通过对大量随机采样子空间计算结果的统计,得到特征空间中每个特征的排序,并进一步分析提炼出与肿瘤疾病相关的若干谱峰。通过在卵巢癌公共数据集OC-WCX2a和浙江省肿瘤医院乳腺癌数据集BC-WCX2a上的实验结果表明,SRFS算法可以有效应用于本文所使用的SELDI-TOF蛋白质质谱数据的分析。 相似文献
67.
68.
YANG Zhang-ping CAI Shao-li KE Chong-rong HUANG Ping LIU Xiao-lin YU Qing-mei ZHUANG Xiu-hong CHEN Lin LIN Guo-yan HUANG Jian-zhong 《工业微生物》2012,42(3)
通过对木聚糖酶高产菌株EIM-30基于形态学和18S rDNA序列的系统发育进化分析,鉴定为里氏木霉Trichoderma reesei.在单因子实验确定EIM-30产木聚糖酶的最适碳源和氮源的基础上,通过Plackett-Burman实验对影响其产酶的相关因素进行评估并筛选出3个显著效应因子,然后应用最陡爬坡实验和响应面分析确定最适产酶培养基配方为:酵母浸膏1.50%,蛋白胨1.00%,NaCl 0.50%,PPG-2000 0.10%,MgSO4 1.20%,CaCl2 0.18%,(NH4)2 SO4 0.45%,甘油4.18%,乳糖3.05%,K2HPO41.59%.优化后Trichoderma reesei EIM-30的液体发酵产木聚糖酶的活力可达9.857×105 U/mL,较优化前提高1.98倍. 相似文献
69.
70.
采用冻干浓缩、(NH4)2S04盐析、HiTrapphenyl(FF)疏水层析和QSepharose FastFlow离子交换层析对灵芝EIM-40发酵液进行分离纯化,获得纯化漆酶,纯化倍数为14.6,回收率为5.3%。SDS-PAGE银染的结果为单一条带,相对分子质量约为6.53×104。以愈创木酚和2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS)为催化底物进行酶学性质研究,最适pH分别为4.8和4.5,最适温度分别为55和50℃,2种底物在pH4.0。5.0范围内,温度低于50℃时,酶的稳定性都很好。以愈创木酚为底物,Km=645.0umol/L;以ABTS为底物,Km=22.2txmol/L。Cu2+对该酶起激活作用,Fe2+、Ca2+、Ba2+则完全抑制酶的活性。 相似文献