EB病毒BLLF-1基因转染小鼠T细胞淋巴瘤的研究

目的:研究EBV膜蛋白gp350/220的表达对共刺激分子ICOS的影响以及与T细胞淋巴瘤的关系。方法:繁殖饲养BLLF-1转基因昆明鼠以及正常昆明鼠,观察它们淋巴瘤发病率的差异。取发病的BLLF-1转基因昆明鼠脾脏淋巴细胞,用FITC标记的抗gp350/220单克隆抗体进行免疫荧光染色,检测gp350/220是否在该转基因昆明鼠淋巴细胞内表达及其表达部位。对发病转基因昆明鼠组织进行免疫组化染色,并与正常昆明鼠的进行对比分析。用RT-PCR方法检测转基因小鼠共刺激分子ICOS的表达变化。结果:BLLF-1转基因昆明鼠淋巴组织病理性改变与正常昆明鼠有显著差异,免疫荧光检测到该转基因小鼠淋巴细胞表达gp350/220于胞浆和胞膜上,病理学观察发现,发病小鼠淋巴结组织有反应性增生,脾脏淋巴瘤细胞浸润,免疫组化证明为T细胞淋巴瘤,转基因小鼠脾脏、肺脏及肿瘤中ICOS表达显著升高。结论:BLLF-1基因的表达,与该转基因小鼠发生T细胞淋巴瘤有关,并引起共刺激分子ICOS表达的变化,该转基因小鼠的建立,为我们进一步研究BLLF-1基因在T细胞淋巴瘤发病中的作用提供了良好的动物模型。     

AiiA蛋白的可溶性表达及其抗菌活性研究

AHLs是革兰氏阴性细菌在增殖过程中产生的一类信号分子,与其致病性密切相关。AiiA蛋白作为一种胞内解酯酶．能水解致病菌产生的AHb分子,使内酯环开环后不能再激活某些胞外酶的表达．从而极大地减弱了细菌的致病性。本研究从苏云金芽孢杆菌LLB15中分离编码aiiA基因的质粒DNA。用PCR方法克隆面讲基因,并利用pET载体构建6-His融合表达质粒pET29a-aiiA,转化E.coli BL21（DE3）菌株,并筛选得到E.coli BL21（DE3）-pET29a-aiiA工程菌。在20℃的低温和0．8mmol／LIPTG条件下。经25h的诱导表达,获得了54．4ug／mL可溶性AiiA蛋白。通过镍柱亲和层析,在国内外首次纯化了带6-His标记的AiiA蛋白。水解活性和抗病性检测表明,该蛋白能水解AHLs分子．对胡萝卜欧文氏软腐病菌具有较强的抗病作用。     

乙烯利诱导网纹甜瓜主蔓两性花花芽分化的形态和解剖学研究

以网纹甜瓜(Cucumis melo L.var. reticulatus Naud.)品种’西域1号’为试验材料,于幼苗3叶1心期喷施浓度为150 mg·L^-1的乙烯利溶液进行处理,诱导主蔓形成两性花,以清水为对照,分别对处理和对照植株不同时期的主蔓和侧蔓花芽分化过程进行形态和解剖学观察。结果表明：经乙烯利处理后,幼苗植株主蔓花原基持续向两性花分化,最终发育形成两性花。未经处理植株的主蔓花原基在分化早期与两性花发育过程相同,但在雌蕊出现后,不再继续发育,最终发育形成雄花。处理植株主蔓两性花发育过程与侧蔓两性花发育过程相同。     

老年患者腹腔镜手术时应用丙泊酚对血浆内皮素、降钙素基因相关肽的影响

目的:在腹腔镜手术中应用丙泊酚对老年患者血浆内皮素(ET)和降钙素基因相关肽(CGRP)含量的影响.方法:50例腹腔镜手术病人,年龄58-69岁,ASAI-Ⅱ级,随机分P组和C组两组,每组25例.P组为丙泊酚组、C组为对照组,分别于麻醉前、麻醉后、气腹后10min、20min和30min,抽取静脉血测定ET和CGRP值.结果:麻醉前后两组患者ET和CGRP水平无显著性差异(P＞0.05).气腹后10min P组ET水平开始下降,30min时显著低于C组和气腹前,而C组气腹后ET水平显著增高(P＜0.05).P组CGRP水平30min时较气腹前显著增高(P＜0.05),而C组CGRP水平气腹后20min开始下降,30min时显著低于P组(P＜0.05).结论:CO2气腹压可致机体ET水平升高,而丙泊酚能明显拮抗ET水平,提高CGRP水平,减轻老年患者在腹腔镜手术中的心血管应激反应.     

培养人皮下脂肪干细胞纵向分化的实验研究

目的:建立人脂肪干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)分离、培养的方法,观察其生物学特性,探讨其纵向分化的能力.方法:自皮下脂肪组织获得梭形细胞,观察细胞生物学特征,免疫组化鉴定波形蛋白和CD44.以含有胰岛素、地塞米松、1.甲基-3-异丁基-黄嘌呤的无血清混合培养基诱导其向脂肪细胞纵向分化,以细胞形态学变化.油红O染色和测定甘油磷酸脱氢酶活性判定分化是否成功.结果:人皮下脂肪中能够分离培养出生长旺盛的脂肪干细胞,诱导培养7d后细胞由梭形逐渐变圆,胞质内出现脂滴后逐渐增多融合为脂泡,并与甘油磷酸脱氢酶活性变化相吻合.油红O染色显示约(78.6±2.2)%细胞转变为脂肪细胞.结论:人皮下脂肪中分离的脂肪干细胞在体外诱导条件下能纵向分化为脂肪细胞,可能成为修复软组织缺损及整形美容的又一干细胞来源.     

眠安胶囊原料药的提取工艺研究

目的:研究眠安胶囊的有效部位及黄芩和琥珀等药材的提取条件.方法:采用正交试验设计,以黄芩苷含量和提取物收率为指标,筛选出了黄芩提取的最佳条件为黄芩粉碎为最粗粉,用10倍水煎煮1.5h后再用8倍量水煎煮0.5h,减压浓缩(60 ℃～70 ℃)煎液至体积为投料量的5倍,于70 ℃加稀盐酸调pH值为1～2,保温30min后静置8h;以药效学为指标,确定了琥珀等药材渗漉提取用乙醇的浓度为70%,同时以药效学和干浸膏得率为指标,通过单因素试验确定了琥珀等药材提取的最优条件为10倍量70%乙醇浸渍24h,调渗漉速度为3 ml·min-1·kg-1进行渗漉提取.结果:眠安胶囊的有效部位为黄芩用水煎煮、琥珀等用乙醇渗漉提取的部位.结论:该工艺稳定,重复性好,适合于眠安胶囊原料药的提取.     

Clonal diversity of Clintonia udensis Trautv. et Mey. populations and its correlation with ecological factors

The clonal diversity of Clintonia udensis Trautv.et Mey.was detected by ISSR markers among 16 populations,and its correlation with ecological factors was analyzed as well in this work.Results showed that individuals(clonal ramets)per genotype were 1.12 and 1.149 at population and species levels,respectively,and that the 16 populations were all multiclonal.The detected genotypes were localized,without exception,within populations but demonstrated relatively high clonal differentiation among populations.The clonal diversity of the studied populations was high,with the average Simpson's index of 0.975,while the genets showed a clonal architecture of"guerilla".The population genetic diversities revealed by genet were consistent with those by ramet,further confirming their genetic differentiation among populations.And its genotype diversity within populations probably resulted largely from the frequent seedling regeneration and self-compatibility.In addition,the correlation analysis further revealed that,among the ecological factors,Simpson's index of C.udensis had a significant positive correlation(P<0.05)with pH values in the soil but not others.     

雌二醇对蒙古绵羊输卵管上皮细胞内β-防御素(sBD-1)表达的影响

为了探索雌二醇与β-防御素(sBD-1)表达量的关系,体外模拟蒙古绵羊(Ovis aries)生理周期.用添加雌二醇浓度10-11、10-10、10-9、10-8、10-7、10-6 mol/L的培养液及不添加雌二醇的培养液(即对照组)分别培养蒙古绵羊输卵管上皮细胞,作用24 h、48 h、72 h后,提取细胞总RNA,应用SYBR Green I荧光定量RT-PCR法进行定量分析.结果显示.添加不同浓度雌二醇培养的输卵管上皮细胞中sBD-1的相对表达量0.000 740～0.001 758,与对照组0.000 190之间差异显著(P＜0.05),且小于10-8 mol/L雌二醇添加浓度与sBD-1基因相对表达量变化基本呈正相关.此结果为进一步研究雌激素参与机体防御功能奠定了基础.     

Agouti和Agouti相关蛋白的一些生物学内涵

Agouti 有多方面的意义.首先,它是分属几种不同物种的哺乳动物的俗称.其次,它是一些啮齿类动物的属名.第三,它代表了一种啮齿类动物特有的毛色.第四,它是一个与黑素皮质素受体信号转导途径的调控有关,存在于从人(Homo sapiens)到啮齿类动物,乃至斑马鱼(Danio rerio)的一个特定基因的名称,又是该基因产生的一种特定信号蛋白的名称.Agouti和Agouti相关蛋白是肿瘤、肥胖与糖尿病等人类疾病的研究热点之一.Agouti黄色肥胖小鼠最近成了表观遗传学研究的一个重要模型动物.本文阐述并区分了与agouti有关的一些重要概念与科学术语,并综述了相关领域的研究进展.     

安徽滁州雌性丽斑麻蜥繁殖特征

在安徽滁州地区丽斑麻蜥(Eremias argus)年产两窝卵。窝卵数及窝卵重与雌体体长呈正相关,相对窝卵重与雌体体长无关,卵重与窝卵数无关。窝卵数、窝卵重及卵重在窝序间无明显的差异。卵长径与卵短径呈正相关,卵长径与窝卵数呈负相关,而卵短径与窝卵数无关。雌体主要通过增加窝卵数增加繁殖输出。