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961.
将重组克隆质粒(PGEM-λMZ)用EooRⅠ酶切后,电泳回收目的的片段,克隆到经EooRⅠ酶切、CIAP处理的表达载体pET-28a中,转化大肠杆菌JM109感受态细胞,得到的转子化经PCR鉴定和酶切分析,筛选出符合正确阅读框的重组子,构建成重组表达质粒(PET-λMZ),并在大肠杆菌BL21(DE3)表达菌中成功地表达了含目的蛋白的融合蛋白,融合蛋白的分子量的34KDa,加入IPIG诱导6h后,蛋白表达接近最高 水平。表达产物经Ni-NTA亲和层析柱纯化,SDS-PAGE检测为要带。经Western-blotting杂交实验,纯化出的目的蛋白能与兔抗E.tenella第二代裂殖子抗血清发生反应,说明MZP蛋白是E.tenella第二代裂殖子抗原蛋白,具有一定的免疫原性,为进一步研究重组疫苗创造了一定的条件。 相似文献
962.
为探讨表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)在胚泡着床过程中的作用。本文应用原位杂交和免疫组织化学方法,检测了EGE及其受体在胚泡着床前后小鼠子宫内膜中的转录和表达。结果显示:未孕和受精后第4-5天,子宫内膜表面上皮和腺上皮细胞仍呈EGF,EGFR原位杂交和免疫组化阴性着色,受精后第4-5天子宫内膜基质细胞EGF及其受体转录和表达较未孕期增强,受精后第6天,EGF及其受体免疫组化和原位杂交阳性着色主要分布于初级蜕膜带(primary decidual zone,PDZ);随着胚泡植入的进行,PDZ区蜕膜细胞EGF及其受体的转录和表达明显减少,而PDZ周围蜕膜细胞EGF及其受体的转录和表达增强,结果提示,EGF是小鼠胚泡着床过程中的一个重要调节因子。 相似文献
963.
渗透胁迫对花生幼叶细胞性氧伤害的定量分析 总被引:5,自引:0,他引:5
在渗透胁迫条件下不同花生(Arachis hypogaea Linn.)品种的水势、质膜相对透性(RPMP)、超氧离子、丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性两两之间都呈显著相关。而花生各品种的过氧化氢酶活性、过氧化物酶活性、谷胱甘肽含量和抗坏血酸含量与水势、RPMP、超氧离子、MDA含量和SOD活性等指标之间相关程度波动较大。水势对RPMP、MDA含量、超氧离子和SOD活性的弹性系数处于负效应阶段。SOD活性对RPMP、MDA含量和超氧离了的弹性系数的效应处于递减阶段。超氧离了对RPMP和MDA含量的生系数的效应处于递减阶段。各指标的弹性系数和相应的边际量因花生品种的抗旱能力不同而异。 相似文献
964.
利用1983-1992年NOAA/AVHRR逐月的归一化植被指数(NDVI)资料和中国国家气象局全国160个基本标准气象站的月均温和降雨数据,探讨气温,降水对中国植NDVI动态变化驱动作用。首先计算了NDVI与气温,降水偏相关和复相关系数,研究了中国植被NDVI变化的气候因子驱动的区域分异规律,并据此,对中国植被NDVI变化的气候因子驱动进行了分区,共分出4个一级区,6个二级区和14个三级区,进一步表明了中国植被NDVI变化气候因子驱动的区域差异。 相似文献
965.
水面和水下长航对艇员肠道菌群影响的比较及意义探讨 总被引:7,自引:3,他引:4
比较研究和水下两种长期航行条件对航艇和核潜艇艇员肠道菌群的影响并对其意义进行初步探讨。结果显示两种长航条件均对人体肠道菌群产生显著影响,可打破肠道微生态平衡,但两者所致的肠道菌群构成变化的特点不同。提示不同长航条件可造成不同的微生态失调,需区别对待。 相似文献
966.
用0.02mol/L磷酸盐缓冲液和不用磷酸盐缓冲液透析生产无细胞百日咳(aP),按《2000年版生物制品规程》制备和检定氢氧化铝吸附无细胞百日咳、白喉、破伤风联合疫苗(DTaP)。发现用磷酸盐缓冲液和不用磷酸盐缓冲液透析生产aP组成DTaP免疫效力差异非常显著,后者100%(10/10)合格,前者合格率只有27%(3/11),用钼兰法测定DTaP中PO4^3-离子浓度。结果表明后者的PO4^3-浓度只是前者的1/10,PO4^3-依次影响白喉、破伤风、百日咳免疫效价。 相似文献
967.
968.
人肝细胞生长因子(hdHGF)基因在毕赤酵母中的分泌表达 总被引:2,自引:0,他引:2
研究了hdHGF基因在毕赤酵母中的表达 .以人胎盘mRNA为模板 ,经逆转录、重叠PCR获得hdHGF全长和成熟基因片段 .将该基因片段克隆到pPIC9载体上 ,将重组表达质粒转化巴斯德毕赤酵母 (Pichiapastoris)GS115,筛选mut+ 表型 ,经甲醇诱导可实现rhdHGF的分泌表达 .经摇瓶培养筛选出 4株表达水平较高的酵母工程菌株 ,SDS PAGE分析和Western印迹试验表明 ,产物分子量约为80kD ,5L发酵罐高密度培养已使生物量达 13 5g L(干重 ) ,发酵液上清总蛋白量为 8 0g L ,电泳结果表明rhdHGF表达水平为总蛋白的 12 3 % . 相似文献
969.
巨噬细胞、内皮细胞对高密度脂蛋白的氧化修饰 总被引:6,自引:0,他引:6
为了探讨高密度脂蛋白 (HDL)在体内发生氧化修饰的部位及机制 ,分别观察了培养人动脉平滑肌细胞 (SMC)、动脉内皮细胞 (EC)及巨噬细胞 (MΦ)与HDL共同温育过程中 ,HDL的琼脂糖电泳相对迁移率 (REM)、硫代巴比妥酸反应物质 (TBARS)以及溶血卵磷脂 卵磷脂 (LPC PC)值等氧化指标的变化 .结果发现 ,HDL与 3种细胞温育 12h时 ,HDL几乎不发生氧化修饰 ,而HDL与MΦ和EC温育 2 4h后 ,其REM、TBARS、LPC PC值均显著上升 (p <0 0 1) ;而HDL与SMC温育后 ,其REM、TBARS值无显著改变 ,LPC PC值增加 (p <0 0 1) .结果提示 ,活体内HDL可能主要在动脉壁的内皮细胞及巨噬细胞的作用下发生氧化修饰 相似文献
970.
Guoxing Zheng Changying Jiang Yulin Li Dandan Yang Youcai Ma Bing Zhang Xuan Li Pei Zhang Xiaoyu Hu Xueqiang Zhao Jie Du Xin Lin 《蛋白质与细胞》2019,10(2):104
Arrhythmogenic right ventricular dysplasia/cardiomyopathy (ARVD/C) is a genetic cardiac muscle disease that accounts for approximately 30% sudden cardiac death in young adults. The Ser358Leu mutation of transmembrane protein 43 (TMEM43) was commonly identified in the patients of highly lethal and fully penetrant ARVD subtype, ARVD5. Here, we generated TMEM43 S358L mouse to explore the underlying mechanism. This mouse strain showed the classic pathologies of ARVD patients, including structural abnormalities and cardiac fibrofatty. TMEM43 S358L mutation led to hyper-activated nuclear factor κB (NF-κB) activation in heart tissues and primary cardiomyocyte cells. Importantly, this hyper activation of NF-κB directly drove the expression of pro-fibrotic gene, transforming growth factor beta (TGFβ1), and enhanced downstream signal, indicating that TMEM43 S358L mutation up-regulates NF-κB-TGFβ signal cascade during ARVD cardiac fibrosis. Our study partially reveals the regulatory mechanism of ARVD development. 相似文献