猪源戊型肝炎病毒基因IV型ORF3编码蛋白的表达及鉴定

通过PCR从已构建的猪源戊型肝炎病毒全基因克隆扩增ORF3全基因,将扩增产物插入到pMD18-T载体中,亚克隆至原核表达载体pET28a（+）,构建pET28a-ORF3表达载体,转入E.coli BL21 (DE3),IPTG诱导表达。Ni-NTA层析柱纯化表达蛋白,用SDS-PAGE、免疫印迹、ELISA等方法分析鉴定表达产物。结果成功扩增到345 bp的目的基因;构建了重组表达载体pET28a-ORF3;转化宿主菌E.coli BL21 (DE3)后表达产物的相对分子质量在6.50~16.5 kDa之间,与预期表达的目的蛋白相对分子质量相符;表达的目的蛋白能与阳性猪源和人源血清发生特异性反应,证实其具有较好的反应原性。     

铝合金轮毂生产废水处理系统的设计和运行

某汽车零部件有限公司年产汽车铝合金轮毂200万只,每天产生酸性废水80m³、碱性废水524m³、含锌含铜废水181m³、含铬废水48m³和含镍废水40m³,生产废水总产生量为873m³·d^-1。废水总镍、总锌、总铬、总铜、pH、氟化物和COD的变化范围分别是5.34~18.72mg·L^-1、50.11~97.63mg·L^-1、2.66~16.21mg·L^-1、1.50~11.36mg·L^-1、5.2~8.4、5.0~17.4mg·L^-1、80.9~161.9mg·L^-1。铝合金轮毂生产废水处理系统设计水量为1052m³·d^-1,每个处理周期的运行时间为20h,系统运行稳定,连续30d出水均能达到广东省地方标准《水污染物排放限值》(DB44/26-2001)第二时段二级标准。     

口蹄疫病毒3D基因的克隆表达及功能分析

利用RT-PCR技术扩增了口蹄疫病毒(FMDV)编码RNA依赖的RNA聚合酶的3D基因,并将其克隆到原核表达质粒载体pET-28a(+)中.3D基因经测序确认后在大肠杆菌BL-21中表达,表达产物纯化的目的蛋白进行Western-blotting检测,获得分子量约55KDa的单一3D基因表达产物.利用RNA体外复制体系和荧光定量PCR技术,证明纯化的3D基因表达产物RNA依赖的RNA聚合酶具有较高的酶活性,可以在体外从头合成FMDV RNA,且主要以引物依赖的方式合成病毒基因组.     

Three new species in the genus Polygonum (Polygonaceae) from China

Three new species in Polygonum section Polygonum (Polygonaceae) from Xinjiang, China, are described and illustrated. Polygonum urumqiense F. Z. Li, Y. T. Hou & F. J. Lu is similar to P. aviculare L. in habit, but differs by having flowers densely clustered and spicate in the upper part of branches, stamens 5–6, and two types of achenes (the longer one densely and irregularly granulate on surface). Polygonum tachengense F. Z. Li, Y. T. Hou & F. J. Lu is similar to P. aviculare in the flowers not forming a raceme in the upper part of branches, the stamens 8, and the achenes striate-granulate on surface, but differs by the leaf blades linear-lanceolate, the midvein and lateral veins conspicuously raising abaxially, the ochreae longer, up to 1.1 cm, 15–20-veined, the flowers 3–6 clustered together in the upper axils of branches. This species is also similar to P. patulum M. Bieb. in the erect stem, and the flowers 3–6 clustered together in the axils of the upper part of branches, but differs by the midvein and lateral veins of leaves conspicuously raising abaxially, the ochreae longer, up to 1.1 cm, 15–20-veined, the leaves in the upper part of branches not becoming smaller gradually, and the flowers clustered in the upper axils of branches not forming a raceme, and the achenes striate-granulate on surface. Polygonum shiheziense F. Z. Li, Y. T. Hou & F. J. Lu is similar to P. argyrocoleon Steud. ex Kunze in the erect stem, the 3–6 flowers clustered in the upper axils of branches, the stamens 8, and the slightly smooth achenes, but differs by the midvein and lateral veins of leaves conspicuously raising abaxially, the ochreae longer, up to 1.1 cm, 15–20-veined, and the flowers clustered in the upper axils of branches not forming a raceme. This species is also similar to P. tachengense in habit, but differs in the leaves borne in the upper part of branches becoming smaller gradually and the smooth, slightly shiny achenes. The pollen morphology, leaf epidermal characters and achene micromorphology of the three new species and their relatives were comparatively observed under the scanning electron microscope (SEM).     

人内皮细胞抑制生长素在毕赤酵母中的高效表达

根据人胶原蛋白ⅩⅧNC结构域C末端编码内皮细胞抑制生长素 (Endostatin)的成熟多肽序列 ,人工合成了由毕赤酵母 (Pichiapastoris)中偏爱密码子组成的内皮细胞抑制生长素基因序列。该基因以N端融合的方式正确插入毕赤酵母诱导型表达载体pPICZαA中。通过电激将线性化的重组质粒转化到毕赤酵母SMD1 1 68细胞中 ,筛选获得表达具有生物活性的内皮细胞生长抑制素的高产菌株。在摇瓶发酵水平上 ,产量达到 80mg L。而利用生物反应器进行高密度发酵 ,Endostatin的产量可达 1 2 5mg L。纯化后的Endostatin具有抑制小鼠血管内皮细胞增殖的活性     

两个基因座位的遗传平衡原理

由于许多教科书中关于连锁平衡的介绍,多是引用结论或是推导不太严谨,使学生在学习群体遗传学时对理解连锁平衡的原理感到困难。本文从遗传平衡的基本条件出发,通过较严谨的数学推导,介绍了两个基因座的连锁平衡条件、平衡过程等原理,供教师和学生在群体遗传学教学中参考。Abstract: Because linkage equilibrium is introduced by directly quoting the conclusions or imprecise mathematical reasoning in most of textbooks, many students are puzzled with the problem of linkage equilibrium when they learn population genetics. Based on the radical conditions of genetic equilibrium, the principle of linkage equilibrium condition and process, for two gene loci is introduced by precise mathematical reasoning. The article may provide reference to teachers and students in the teaching and learning of population genetics.     

稀土元素钬对蚕豆的细胞毒性和遗传毒性研究

运用氧化钬与稀硝酸反应制备结晶,以去离子水溶解并且稀释成梯度溶液,对蚕豆根尖染毒6 h,分别修复培养22h和24h,观察根尖变化,统计微核率、染色体畸变率及有丝分裂指数。结果表明,4mg/L（以氧化钬质量体积浓度计）以下剂量对根尖生长具有促进作用;随着浓度的递增,微核率、染色体畸变率逐步上升,有丝分裂指数逐步下降,表现出明显的剂量-效应关系,说明稀土元素钬具有一定的细胞毒性和遗传毒性。同时,不同修复组在微核率、染色体畸变率及有丝分裂指数上也存在一定差异,表现为微核率22h修复组低于24 h 修复组,而染色体畸变率和分裂指数均高于24h修复组。微核检测应在染色体畸变检测之后进行。      

CHS基因起源初探及其在被子植物中的进化分析

利用PCR与TAlL-PCR方法,从半月苔(Lunularia cructata(L.)Dum.ex Lindb)中获得了一段长约l 000 bp的基因片段,它与已知的CHS基因在核苷酸水平上的相似性大于56%,在氨基酸水平上的相似性大于60%,所推断的氨基酸序列中酶反应的4个催化位点与已知晶体结构的紫花苜蓿MCHS2A上的催化位点相同,首次证明了苔类植物中可能存在类CHS基因,将CHS基因的起源时间推到苔藓类植物出现之前.以该序列和两种蕨类植物(Psilotumnudum(L.)Griseb.和Equisetum arvense L.)的CHS序列作为外类群,应用邻接法、最大简约法和最大似然法分别构建了被子植物的CHS的分子系统树.结果表明,大部分科中的CHS分布在不同的分支上,而十字花科、可科和禾本科各自聚成一个单系类群.以邻接树为依据,对茄科、旋花科和菊科的CHS基因进行了相对碱基替换速率的检测,发现这三个科内或科间序列的替换速率不一致.被子植物的CHS基因在基因拷贝数目、碱基替换速率以及重复/丢失事件的发生上都存在较大的差异,这种差异可能与被子植物的生活史、生活环境、花的特性以及对外界的防御系统等的多样性相关.     

丙肝病毒全基因组克隆转染细胞体系的初步研究

采用一种含有HCV全基因组和噬菌体T7启动子和终止子序列的载体(pHCV)转染Vero-E6细胞,随后感染高效表达T7 RNA聚合酶的重组痘病毒(vTF7-3),通过vTF7-3的辅助作用,使Vero-E6细胞高效增殖HCV病毒体,建立了一种新的HCV体外细胞培养体系.RT-PCR、荧光定量PCR检测转染细胞裂解液中HCV滴度的结果显示pHCV转染细胞内HCV基因拷贝达107-108/mL,同时有HCV正链RNA合成;免疫印迹显示该培养体系中有HCV结构蛋白、非结构蛋白的表达;pHCV转染细胞经透射电镜观察,可见清晰的HCV病毒体,直径在40-50nm.这一新体系的初步建立,为研究HCV的复制机制、制备HCV疫苗和研发抗病毒药物奠定了基础.     

松嫩平原羊草草甸草原主要植物种群能量积累和分配

在松嫩平原羊草草甸草原,羊草、拂子茅、碱茅和虎尾草各器官热值的季节变化呈波动型,但总的规律是穗＞叶＞茎＞立枯体．4种植物种群地上部能量现存量的季节变化均呈单峰曲线,能量积累量为羊草＞拂子茅＞虎尾草＞碱茅．能量增长率一般呈双峰曲线,第一次峰值出现在抽穗期,第二次在种子成熟期,生长末期出现负值．地上部能量的水平分布规律,不同生育期在各器官中的分配比率不同．4种植物种群能量的垂直分布规律相似,即地上部能量的垂直空间分配格局基本上呈塔形,最大值出现在10-30cm空间内．地下部能量垂直结构由地表至土壤深层呈典型的倒塔形,最大值在0-10cm层．地下部的能量现存量约为地上部的3-4倍。