口虾蛄肠道细菌种群多样性的分子分析

目的探讨口虾蛄肠道细菌种群的多样性。方法通过不依赖于分离培养的分子生物学分析方法,以直接提取虾蛄肠道细菌的总DNA为模板经过PCR扩增16S DNA,然后经与T载体连接建立质粒文库。用限制性内切酶(BsuRⅠ和Hin6Ⅰ)对阳性克隆的PCR扩增产物进行限制性酶切片段长度多态性(RFLP)分析,选取有代表性的克隆进行测序。结果16S DNA序列通过CLUSTALX进行多序列比对及NCBI数据库中的BLAST分析后发现口虾蛄肠道细菌主要分成4类:未培养细菌,未培养支原体科细菌,未培养δ变形菌和马特斯支原体。结论口虾蛄肠道细菌种类较为简单,且多为未培养的细菌。     

生活污水慢渗对'中林2001'杨树人工林生长的影响

采用不同污水水力负荷(每周0、3、6、9、12、15 cm),在'中林2001'杨树人工林林地进行了污水慢渗试验.结果表明:不同负荷生活污水处理使'中林2001'杨树人工林土壤平均有机质、全氮、全磷、全钾和Na+含量分别比对照(0 cm)增加1.940、0.115、O.029、1.454和0.030 g·kg-1;在较低水力负荷(3～12 cm)时,杨树平均总生长量增加17.583 t·hm-2·a-1,各器官的平均氮、磷、Na+含量分别增加3.086、0.645和0.121 g·kg-1,水力负荷在每周6～12 cm时,杨树平均总生长量和各器官平均氮、磷、Na+含量达到最大值(36.252 t·hm-2·a-1、13.162 g·kg-1、5.137 g·kg-1、0.361 g·kg-1),负荷继续升高则有所下降.杨树各器官钾含量随着水力负荷的增加而降低;污水处理使杨树的叶长增加,叶不对称性减少、使林木延迟落叶.当水力负荷＞每周12 cm时,土壤中较高的Na+和水分含量将危害杨树生长.适宜'中林2001'杨树人工林生长的污水水力负荷在每周3～12 cm.     

252例胸膜恶性肿瘤的临床病理分析

目的：探讨胸膜恶性肿瘤的病理类型、肿瘤所占比例、临床病理特征及鉴别诊断。方法：结合病理形态学及免疫组化方法对252例胸膜恶性肿瘤进行诊断及鉴别诊断。结果：252例胸膜恶性肿瘤包括胸膜穿刺活检120例,胸腔镜活检25例,伴有胸膜转移的恶性胸水107例;男性143例,女性109例,年龄19—87岁,平均年龄59．9岁。临床主要症状是胸闷、气短、咳嗽、胸痛等。CT表现为胸膜增厚、胸水（90％）、多发或单发胸膜结节和原发器官占位性病变。活检病例中,转移性癌86例（34．1％）,包括肺腺癌64例（25．4％）,小细胞癌11例（4．4％）,鳞癌11例（4．4％）,恶性间皮瘤47例（18．7％）,滑膜肉瘤9例（3．6％）,非霍奇金淋巴瘤3例（1．2％）;恶性胸水病例病例中转移性癌95例（37．7％）,包括肺腺癌85例（33．7％）,小细胞癌6例（2．4％）,鳞癌2例（0．8％）,乳腺腺癌2例（0．8％）,恶性间皮瘤8例（3．2％）,非霍奇金淋巴瘤4例（1．6％）。结论：胸膜恶性肿瘤中以转移性腺癌多见,其次为恶性间皮瘤,结合形态学及免疫组织化学检测不同标志物的表达有助于诊断胸膜恶性肿瘤的种类。     

lncRNA XIST-miR137-ATG5调节细胞自噬功能在肠癌细胞5-氟胞嘧啶耐药性中的作用

摘要 目的：本文旨在研究长链非编码RNA XIST-miR137-ATG5的相互作用,同时探讨其调节细胞自噬功能与肠癌细胞5-氟胞嘧啶敏感性的关系。方法：实时聚合酶链反应(real time PCR)检测XIST与miR-137在肠癌细胞中的表达;采用脂质体转染法将si-XIST,miR-137转染入肠癌SW480及HCT116细胞中。采用CCK-8检测瞬时转染si-XIST对肠癌细胞增殖及5-FU敏感性的影响;并利用双荧光素酶报告实验检测miR-137与XIST, miR-137与ATG5相互关系。Western blot方法检测XIST- miR137- ATG5对细胞自噬的影响。结果：与正常结肠细胞FHC比较, XIST在结肠癌细胞系明显高表达,miR-137在结肠癌细胞系明显低表达。与阴性对照组比较,转染si-XIST后,SW480及HCT116细胞增殖能力明显受到抑制,对F-5U的敏感性增强,且抑制自噬蛋白Beclin-1及LC3II/LC3 I的表达。miR-137可与XIST,ATG5 3''UTR结合,抑制XIST和ATG5的表达及功能。在结肠癌SW480细胞中共转染miR-137 inhibitor或过表达ATG5可逆转XIST沉默引起的5-FU耐药,同时可逆转因XIST沉默引起的自噬蛋白表达的抑制。结论：LncRNA XIST或可通过调控mir137-ATG促进结直肠癌细胞SW480自噬从而提高其对5-FU的耐药,针对其这一机制,可为将来针对结肠癌的靶向治疗提供一定的实验基础。     

饥饿对尼罗罗非鱼肌肉和肝KLF15基因节律性表达的影响

Krüppel样转录因子15 (Krüppel-like factors,KLF15)是Krüppel样转录因子家族的一员。Krüppel样转录因子家族的特征是含有3个高度保守的Cys2His2锌指结构,与DNA的CACCC元件和富含GC区连接,从而调控转录激活或抑制。KLF15在糖、脂肪酸、氨基酸代谢过程中发挥重要的调控作用。本研究克隆了尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus) KLF15基因全长cDNA序列,根据推测的氨基酸序列分析,发现其具有KLF15的两个典型结构域zf-H2C2-2和zf-C2H2。系统进化树的比较分析表明,尼罗罗非鱼KLF15与雪鲷(Maylandia zebra) KLF15亲缘关系最为接近。尼罗罗非鱼短期饥饿实验结果显示:正常进食状态时尼罗罗非鱼肌肉、肝中KLF15基因都呈现明显的昼夜节律性,均为昼低夜高;饥饿7 d后KLF15基因依然有显著昼夜节律性,但振幅降低,且在肝中表现出昼高夜低现象。以上结果说明尼罗罗非鱼的营养变化在一定程度上直接或间接影响KLF15基因节律性表达。     

HBI-8000诱导成人T细胞白血病/淋巴瘤的细胞凋亡与Bim和NLRP3活化的相关性

本研究通过评估HBI-8000对日本ATL患者ATL细胞系和原代细胞的作用,来研究HBI-8000诱导成人T细胞白血病/淋巴瘤的细胞凋亡与Bim和NLRP3活化的相关性。选取若干侵袭型ATL患者作为研究对象,口服新型HBI-8000,跟踪并分析药物效果。研究表明,在大多情况下,HBI-8000在原代ATL细胞和细胞系中诱导细胞凋亡。Bim活化、NLR族、NLRP3炎症体通道对HBI-8000诱导ATL细胞死亡具有重大作用。实验为临床研究HBI-8000对ATL患者的疗效提供了理论基础。NLRP3可用于癌症新型治疗策略研究,但对ATL细胞死亡的作用仍有待验证。     

中国4个民族群体HLA-G基因14bp插入/缺失多态的分布特征及其HLA-A位点的相关性

近年来,位于HLA-G基因第8外显子3′UTR的一个14 bp插入/缺失多态位点与复发性流产、自身免疫性疾病和肝癌等疾病相关而引起广泛关注。本实验室前期的研究表明,不同群体的HLA-G基因14 bp插入/缺失频率具有群体语系分布特点。文章对土族、裕固族、傈僳族和怒族进行HLA-G基因14 bp插入/缺失的基因分型,结合HLA-A基因分型数据,分析土族、裕固族、傈僳族和怒族4个民族群体中14 bp插入/缺失与HLA-A等位基因的关系。研究结果显示:(1)尽管HLA-G基因14 bp插入频率在不同群体中的分布具有各自群体的特点,但遵循着按语系及语族分布的规律,除汉藏语系汉语族与阿尔泰语系蒙古语族无差异外,语族间差异明显;(2)不同群体中,14 bp插入与不同的HLA-A等位基因相关联。     

结果初期黄冠梨对春施15N-尿素的吸收、分配与利用

以3年生黄冠梨为材料,探讨了早春施用¹⁵N尿素后,树体在萌芽期-新梢缓慢生长期和新梢缓慢生长期-果实成熟期对氮素的吸收、分配与利用特性。结果表明: 梨树在萌芽期-新梢缓慢生长期主要以新梢和叶片等营养器官生长为核心;在新梢缓慢生长期-果实成熟期则以根系等贮藏器官生长为主,果实产量品质形成为辅,且树体尤其是贮藏器官的生物量成倍增加。由于各器官尤其是新梢和叶片生长旺盛、新梢缓慢生长期吸收的标记氮量相对较多,各器官吸收的肥料氮(Ndff)值相对较高;果实成熟期除粗根外各器官的Ndff值均低于新梢缓慢生长期。萌芽期到新梢缓慢生长期吸收的标记氮主要分配在新梢和叶片营养器官中,新梢缓慢生长期到果实成熟期吸收的标记氮则主要分配在贮藏器官中;整个生育期间,植株吸收的标记氮在贮藏器官中分配率最高,营养器官次之,生殖器官中分配率最低。3年生梨树从萌芽期-新梢缓慢生长期、新梢缓慢生长期-果实成熟期吸收的肥料氮分别占当年总吸氮量的31.1%和21.0%,而两个时期内吸收的土壤氮占比分别达68.9%和79.0%。     

免疫融合蛋白sFcεRIα/mIg(IgG2)的研制

哮喘、过敏性鼻炎、特应性皮炎及食物过敏等疾病为一类常见疾病,但存在治疗效果不佳,患者病程长等特点.IgE分子是导致过敏性疾病的关键分子.抑制IgE分子与效应细胞膜表面FceRI受体的结合可抑制过敏反应的发生.通过克隆FcεRI受体α亚基的cDNA与IgG2的稳定区铰链区、CH2和CH3的cDNA连接,以二聚化融合蛋白sFcεRIα/mIg(IgG2)的形式在CHO细胞中表达,达到提高sFcεRIα生物半衰期的目的.表达载体构建和初步的功能性试验等一系列研究证实,所表达的融合蛋白的分子量为170kDa,并与人IgE和鼠IgE有较好的结合活性.这些研究为该融合蛋白最终实现产业化打下良好基础.     

2型糖尿病肾病患者尿ENA-78水平的变化及意义

目的:探讨上皮来源的中性粒细胞活化肽(ENA-78)在糖尿病肾病(DN)水平变化及其临床意义.方法:将56例糖尿病(DM)患者根据尿白蛋白排泄率(UAER)分为三组,对照组为健康体检者(NC)25例,应用ELISA法检测各组尿ENA-78的浓度.结果:DN患者尿ENA-78水平明显高于对照组,且临床蛋白尿组尿ENA-78水平显著高于微量蛋白尿组及正常蛋白尿组.DN组尿ENA-78水平与UAER、SCr呈正相关,与MDRD呈负相关,与LDL-C、HbAlc无统计学相关性.结论:ENA-78可能参与了DN的发生发展并起着重要作用,检测尿ENA-78对于DN早期的诊断及治疗都有重要意义.