蛋白激酶C抑制剂Staurosporine对HeLa细胞周期的影响

用蛋白激酶C的抑制剂Staurosporine(10nmol/L)处理HeLa细胞,明显抑制HeLa细胞的增殖。这种抑制作用不是由于引起细胞死亡,而是因为细胞被阻断在G2期。这种阻断作用伴随着HeLa细胞多倍体的形成,提示Staurosporine抑制了HeLa细胞蛋白激酶C活性后引起的细胞阻滞,对细胞核的周期运转没有影响。进一步的探讨发现这种抑制作用可能是通过干扰细胞骨架的正确分布形成的,表明蛋白激酶C对于HeLa细胞由G2到M期正确过渡起重要作用。     

细菌表面展示技术的应用研究进展

细菌表面展示系统是微生物表面展示系统的一个重要分支。由于呈现载体灵活多样,可根据不同的需要呈现蛋白或多肽等特点,细菌表面展示技术近年来得到了迅猛发展,在重组细菌疫苗、抗原表位分析、全细胞催化剂、全细胞吸附剂、多肽库筛选等多个领域得到广泛应用。本文就细菌表面展示技术的应用研究作一综述。     

人血管内皮生长因子基因治疗动脉损伤的实验研究

血管内皮生长因子 (ｖａｓｃｕｌａｒｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ,ＶＥＧＦ)是近年发现的高效、特异促血管内皮细胞有丝分裂 ,继而促进血管形成的一种糖蛋白[1 ] 。我们克隆了人ＶＥＧＦ1 6 5基因 ,构建了含人ＶＥＧＦ1 6 5ｃＤＮＡ的真核表达载体 ,并经肌肉直接注射该质粒对兔动脉损伤模型进行治疗 ,通过血管造影观察血管新生和侧支循环的建立情况。1　材料与方法1.1　ＶＥＧＦ1 6 5ｃＤＮＡ的克隆及序列分析取人肝癌细胞 (ＳＭＭＣ ｌｉｎＭ) ,细胞数约 2× 10 7,用ＲＮＡ提取试剂盒 (Ｐｒｏｍｅｇａ)抽提细胞总ＲＮ…     

幽门螺杆菌空泡毒素研究进展

幽门螺杆菌空泡毒素是该菌产生的已知其它细菌毒素无明显源性的唯一蛋白毒素。该毒素是幽门螺杆菌重要的毒力致病因子,它的产生与感染胃肠上皮损伤和溃疡形成密切相关。本就幽门螺杆菌空泡毒素的结构与功能研究进展以及在未来免疫预防与免疫治疗中的作用进行了阐述。     

血管内皮细胞生长因子基因治疗闭塞性血管病研究进展

概述了近年来利用血管内皮细胞生长因子（ＶＥＧＦ）基因治疗闭塞性血管病的成果,初步探讨了ＶＥＧＦ基因的临床疗效及其应用的安全性。     

细菌菌蜕作为新颖药物递送体系的研究进展

细菌菌蜕是革兰氏阴性菌被噬菌体PhiX174的裂解基因E裂解后形成的完整细菌空壳.由于它具有完整的细菌表面抗原结构,所以它能直接作为疫苗使用.利用基因工程手段,可以非常便利地将外源抗原蛋白插入菌蜕的内膜、外膜或周质等多个部位,构建重组菌蜕多价疫苗.目前,菌蜕作为新颖的药物递送体系也开始受到关注.利用菌蜕可以递送DNA和蛋白质疫苗以及其他药物,能较好地产生免疫反应和治疗作用.     

幽门螺杆菌重组腺病毒双价疫苗的构建及免疫学评价

幽门螺杆菌(Hp)是导致胃炎、消化道溃疡和胃癌的的主要病原菌.利用基因重组技术,成功将Hp的ure B和hsp A基因融合.将ure B-hsp A融合基因成功构建到腺病毒载体上.检测结果表明,该重组腺病毒具有侵染真核细胞能力,且能在真核细胞中表达目标抗原.以血清中IgG和新鲜粪便中sIgA,评价其免疫效果,结果显示,该重组腺病毒载体双价疫苗能在小鼠体内激发体液免疫和黏膜免疫反应.     

表达幽门螺杆菌粘附素保守区的减毒鼠伤寒沙门菌免疫治疗作用的研究

探讨表达幽门螺杆菌（Helicobacter pylori,Hp）粘附素保守区（AB）的减毒鼠伤寒沙门菌X4072（pYA248-AB）的免疫治疗效果,以及可能的免疫治疗机制,以确定X4072（pYA248-AB）在Hp疫苗研制中的应用价值.建立Hp感染小鼠模型,在该模型中评价X4072（pYA248-AB）治疗Hp感染的效果,运用细菌培养法观察Hp根除率及定植量的改变,流式细胞术分析免疫后小鼠脾细胞亚型,IL-2和IL-4细胞依赖株的细胞测活法检测细胞因子,ELISA法检测小鼠血清及肠液中抗AB抗体产生情况.结果表明,免疫治疗后疫苗治疗组根除率为53.3%,显著高于X4072（pYA248）和PBS对照组（P＜0.01）.未根除Hp的小鼠,疫苗治疗组Hp的定植密度明显低于其他两组（P＜0.01）.应用流式细胞仪分析免疫小鼠脾CD4⁺/CD8⁺ T淋巴细胞的比值时,发现疫苗治疗组和鼠伤寒菌对照组的比值均显著高于PBS对照组（P＜0.05）,而疫苗治疗组的比值又显著高于鼠伤寒菌对照组（P＜0.05）.进一步对细胞因子进行分析发现,与PBS对照组相比免疫治疗组和鼠伤寒菌对照组IL-2和IL-4明显升高(P＜0.05).同时,免疫治疗组与鼠伤寒菌对照组相比,IL-4增高明显(P＜0.05).针对AB的抗体测定结果发现,仅在免疫治疗组的小鼠肠液中检测到了IgA抗体.免疫治疗组IgG抗体滴度较其他两组明显升高,第二次加强免疫后2周即上升至1∶10 000.动物实验表明,X4072（pYA248-AB）能根除或显著降低Hp在小鼠胃内的定植,其可能的免疫治疗机制包括提高CD4⁺/CD8⁺比值,诱导Th1和Th2反应以及产生针对AB的特异性抗体.     

树突状细胞和癌症的免疫学治疗

树突状细胞(dendritc cells,DC)是一种抗原提呈细胞,能特异地引发和调控机体免疫。它具有抗原呈现功能而不损害免疫系统,不仅能够激活CD4^ 辅助T细胞和CD8^ 细胞毒性T细胞,还能活化B细胞和自然杀伤细胞。已有的研究让人们看到了癌症疫苗的希望,但还处于早期阶段,有许多尚未确定的因素。因此有关DC疫苗用于对肿瘤的保护性和治疗性免疫还有待于进一步的研究。     

产肠毒素大肠杆菌的热敏肠毒素B亚基（LT—B）和耐热肠毒素（ST）基？…

采用基因重组技术构建了表达产肠毒素大肠杆菌（ＥＴＥＣ）的耐热肠毒素（ＳＴ）基因和热敏肠毒素Ｂ亚基（ＬＴ－Ｂ０基因融合抗原的疫苗候选株。将ＳＴ基因的５‘端与ＬＴ－Ｂ基因的３’端连接,并置于同一阅读框。编码ＳＴ的基因是通过ＰＣＲ从ｐＳＬＭ００４质粒中扩增得到的,含有ＳＴ的ｐｒｏ序列,并应用寡核苷酸定点突变技术将编码ＳＴ的第１４位氨基酸残基发生突变,使ＳＴ的第１４位氨基酸残基Ａｌａ突变为Ｌｅｕ。