我国植物组织、器官培养再生植株文献汇编

植物组织培养发展极快,目前它不仅是一种研究的手段,而且在生产实践上的作用日益明显,有广泛的应用前景。根据(1982)杨乃博统计,目前国内外“试     

Gβ类似蛋白-WDR26对细胞增殖的影响

WD40重复序列蛋白是一类结构保守、功能复杂的蛋白．关于此类蛋白和细胞内信号传导途径的研究显示,该家族成员很可能通过调控胞内信号转导而影响细胞基本生命活动．在此前的研究中,我们报道了一个新基因WD40 repeat protein26的克隆．其初步研究结果显示WDR26蛋白与MAPK信号途径的负调控相关．在最近的研究中,我们构建了稳定转染pCMV—WDR26表达载体的HeLa细胞系,结果显示WDR26蛋白在HeLa细胞系中的过度表达,能够促进细胞分裂,加快细胞的倍增速度．因此,WDR26很可能具有通过MAPK信号途径调节细胞增殖的功能．     

S-扁桃酸脱氢酶基因的克隆及表达

S-扁桃酸脱氢酶能够选择性催化S-扁桃酸生成苯甲酰甲酸。通过PCR扩增获得Pseudomonas p utida NUST的S-扁桃酸脱氢酶全长基因(mdlA),并构建了表达载体pET30a(+)-mdlA,转化大肠杆菌E.coli BL21(DE3)后,经异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导获得表达,SDS-PAGE结果显示表达蛋白为43kDa。所以工程菌细胞具有转化S-扁桃酸生成苯甲酰甲酸能力。     

人egf基因在突变枯草芽孢杆菌WYBS2001中的转化、分泌表达及其产物功能研究

通过紫外线突变诱导获得了对感染致病菌具有显著抑菌作用的枯草芽孢杆菌突变株WYBS2001。采用PCR技术人工合成了175bp的人表皮生长因子（hEGF)的基因片段,并引入Pst I、Hind Ⅲ酶切位点,起始密码子及pUS186载体信号肽序列CTTAGA。经DNA测试分析,合成的片段与人egf基因序列完全一致。然后将其克隆至枯草杆菌分泌型质粒载体pUS186上构建成重组质粒pUSE,并转化枯草杆菌突变菌株WYBS2001,获得转入egf基因的枯草杆菌生态工程菌WYBS2001T。RIA检测结果表明,WYBS2001T阳性工程菌培养的上清液中可检测到hEGF。含量为7.6ng/ml,如果培养液中添加蛋白酶抑制剂可提高hEGF检测量,通过多代的培养仍然能够稳定地分泌表达hEGF。生物学功能实验表明,分泌的hEGF对人K562体外培养细胞的增殖和生长具有明显生物学活性。对烧伤动物模型的功能性实验观察到,WYBS2001T工程菌制剂对动物的烧伤有明显的治疗作用,该研究表明,微生态基因工程菌有很好的应用前景。     

观赏性苹果"红霞"的组织培养和快速繁殖

1植物名称"红霞苹果"(Malus redglow). 2材料类别顶芽、腋芽. 3培养条件(1)诱导芽培养基:MS 6-BA 0.5～1.0mg·L-1(单位下同) NAA 0.5～1.0 GA 0.2～0.5;(2)增殖培养基:MS 6-BA 1.0～3.0 IBA 0.05～0.5;(3)壮苗培养基:MS 6-BA 0.3～0.8 IBA0.1～0.5;(4)生根培养基:1/2MS IBA 0.5～0.8.上述培养基均附加3.0%蔗糖和0.6%琼脂,培养室温度23～27℃,光照度1 500～2000 1x,光照时间12 h·d-1.     

高产莪术细胞悬浮系建立及产物前体对挥发油合成的调控研究

研究了高产莪术细胞悬浮系培养的条件及前体物质添加对挥发油合成的调控。结果表明：淡黄色颗粒状愈伤组织是建立高产细胞悬浮系的最佳供试愈伤组织;最佳培养基成分是MS培养基添加葡萄糖与蔗糖各15—30g／L(1：1),氮源为NH4^ 和NO3^-,比例为1：3,总量为80mmol／L;激素组合为6-BA3．0—5．0mg／L、2,4-D1．0mg／L;光下培养10—15天再转入优化条件下的暗培养,可形成稳定的高产细胞悬浮系;其细胞周期中的最大细胞生长量及挥发油含量分别是248g／L和2．28％;前体物质泛酸钙、乙酸铵、乙酸钾的添加均可有效提高培养细胞合成挥发油的百分含量,其中乙酸铵最有效,在指数生长中期添加0．5mmol／L乙酸铵,挥发油的最高含量可达3．11％,产量为8．27g/L,分别是添加前的1.25倍及1.2倍。     

高产细菌素菌株WJ K84-1的诱变筛选及其对植物病原菌抑菌机理的研究

以发根土壤杆菌K84为供试菌株,对其进行紫外诱变,采用定向竞争选择技术,筛选出高产细菌素的目的菌株WJK84-1,并对根癌农杆菌的抑菌作用及其抑菌机理进行了研究。通过琼脂扩散法和液体培养法测试表明,WJK84-1菌株和其产生的P-2001细菌素均对C58病原菌有明显的抑制作用。蛋白电泳谱带分析示出,细菌素对C58病原菌的作用是抑制蛋白合成,使其蛋白总量表达水平呈下降趋势,尤其是大分子量蛋白含量下降显著,有的蛋白谱带(R1、R4)缺失,且随细菌素浓度的增加,抑制作用更加强烈。扫描电镜观察,细菌素作用后的菌体不同部位出现缢痕,直至缢缩成颗粒状残体而死亡。透射电镜观察进一步证明,C58菌细胞膜被裂解,细胞结构被破坏而致死。樱桃接瘤实验表明,WJK84-1菌株和其产生细菌素均可抑制根瘤发生,抑瘤率达到83．4％左右。     

植酸酶产生菌的筛选与酶纯化及其性质的研究

对从土壤中分离得到的一株产植酸酶的细菌进行了生理生化鉴定,并对植酸酶进行了分离纯化,该酶反应的最适温度约为55℃,最适pH值为5．8,植酸酶蛋白分子量约为14kD。     

高产莪术细胞悬浮系建立及产物前体对挥发油合成的调控研究

研究了高产莪术细胞悬浮系培养的条件及前体物质添加对挥发油合成的调控.结果表明淡黄色颗粒状愈伤组织是建立高产细胞悬浮系的最佳供试愈伤组织;最佳培养基成分是MS培养基添加葡萄糖与蔗糖各15-30g/L(11),氮源为NH+4和NO-3,比例为13,总量为80mmol/L;激素组合为6-BA 3.0-5.0 mg/L、2,4-D 1.0 mg/L;光下培养10-15天再转入优化条件下的暗培养,可形成稳定的高产细胞悬浮系;其细胞周期中的最大细胞生长量及挥发油含量分别是248g/L和2.28%;前体物质泛酸钙、乙酸铵、乙酸钾的添加均可有效提高培养细胞合成挥发油的百分含量,其中乙酸铵最有效,在指数生长中期添加0.5mmol/L乙酸铵,挥发油的最高含量可达3.11%,产量为8.27g/L,分别是添加前的1.25倍及1.2倍.     

美洲黑杨的组织培养和快速繁殖

1植物名称美洲黑杨(Populus deltoids). 2材料类别叶片. 3培养条件(1)芽萌发培养基:MS 6-BA 1.0 mg·L-1(单位下同) IAA 0.5;(2)诱导丛生芽培养基:MS BA 0.5 IAA 0.05 GA 0.5;(3)生根培养基:MS NAA 0.1.上述培养基中加30 g·L-1蔗糖和0.6%的琼脂粉,pH 5.8.培养温度为(28±2)℃,光照时间12 h·d-1,光照度1000 lx.