假单胞菌DLL-E4尿黑酸降解基因的克隆与功能的初步分析

通过接合转移将质粒pSC123上的转座子Tn5随机插入到DLL-E4基因组DNA中,从大约8,000个突变子中筛选到1株在LB培养基上积累红褐色物质的突变株M18,该突变株不能以L-苯丙氨酸(L-Phenylalanine, Phe)为唯一碳源生长。SEFA-PCR扩增转座子侧翼序列发现其与已报道的尿黑酸1,2-双加氧酶基因hmgA的同源性为92%。将hmgA定向克隆至表达载体pET-29a中,转化至Escherichia coli BL21,经IPTG诱导后可表达分子量约为48kD的蛋白;诱导后转化子粗酶液对尿黑酸有很好的降解效果。将hmgA连入自杀性载体pEX19Gm,通过同源重组整合至M18染色体中,使其恢复了DLL-E4利用Phe的能力,证实了HmgA是尿黑酸苯环裂解酶。     

PNP降解相关基因温敏突变株的分离及其特性研究

通过接合转移将质粒pSC123上的转座子Tn5随机插入到DLL-E4基因组DNA中,从大约8,000个突变株中得到1株温度敏感型突变株MT54。根据转座子上的已知序列设计引物以MT54基因组DNA为模板进行PCR扩增,证实MT54的染色体中有转座子插入。MT54在30℃条件下能够以对硝基苯酚(p-nitrophenol,PNP)为唯一碳源生长,但在37℃不能生长。格里斯试色剂法检测NO_2~-的生成情况进一步证明了MT54的这种特性。通过30℃和37℃两种温度条件下MT54和原始出发菌株DLL-E4对PNP和对苯二酚降解情况的比较,推测温敏突变位点可能发生在与PNP降解相关的基因中。     

用间接免疫荧光法检测流行性出血热病人尿中特异性抗体的研究

用间接免疫荧光法检测110例不同病程、病期及病型的流行性出血热病人尿中及血清中特异性抗体。尿中IgM型抗体阳性率为62.7％。尿中IgG型抗体阳性率91.8％与血清IgG型者90.9％相似,而总阳性率(IgG或IgM有一项以上阳性者的总检出率)99.1％则高于血清IgG者。20例其它疾病及10例正常人尿抗体均为阴性。结果表明尿抗体检查法是特异且可靠的,它比血清学方法简便、灵敏、为临床诊断可早期快速得出结果,不用采血有利于病人。IgM型抗体阳性率受病程、病期、病型及尿蛋白量的影响较明显。     

透明颤菌血红蛋白的结构功能和应用进展

透明颤菌血红蛋白(VHb)是科学家发现的第一种微生物血红蛋白,它的结构、生化功能以及表达调控机制都已经得到广泛的研究。VHb可以在很多宿主细胞中表达,通过促进氧的输送增强呼吸和能量代谢,以提高许多有用的代谢产物(抗生素、蛋白质、聚合物等)的产量和宿主抗逆性,还能降低有害化合物的毒害。重点从VHb的功能与结构、在提高微生物代谢产物的产量,以及对动植物某些特性的影响和增加生物修复能力等方面的应用进展进行了综述,并对VHb在植物代谢和动物代谢中具有很大的发展空间进行了展望。     

不同年龄女性急性ST段抬高型心肌梗死患者冠状动脉病变特点、PPCI治疗临床疗效的差异及院内死亡的危险因素分析

摘要 目的：分析不同年龄女性急性ST段抬高型心肌梗死（STEMI）患者冠状动脉病变特点、经急诊经皮冠状动脉介入（PPCI）治疗后的临床疗效差异及院内死亡的危险因素。方法：选取2018年1月~2022年3月期间在我院接受PPCI治疗的女性STEMI患者408例,根据患者不同的发病年龄将其分为A组（年龄≤65岁,n=161）与B组（年龄>65岁,n=247）。对比不同的发病年龄PPCI冠状动脉病变特点、治疗后的临床疗效差异及院内不良事件发生情况。单因素和多因素Logistic回归分析女性STEMI患者院内死亡的危险因素。结果：A组、B组的病变血管数量、钙化病变组间对比有统计学差异（P<0.05）。A组、B组的病变血管部位、术前TIMI血流分级、分叉病变组间对比无统计学差异（P>0.05）。两组主动脉内囊反搏术比例组间对比未见明显差异（P>0.05）,B组症状发生到血管开通时间（S-to-D）、门-球囊扩张时间（D-to-B）时间长于A组（P<0.05）。两组术中死亡、支架内血栓、BARC3~5级出血比例组间对比无统计学差异（P>0.05）。B组术后死亡的发生率低于A组（P<0.05）。根据患者不同的预后结局分为存活组（n=369）和死亡组（n=39）。单因素分析结果显示女性STEMI患者院内死亡与年龄、糖尿病、体质量指数（BMI）、Killip心功能分级、术前TIMI血流分级、术后TIMI血流分级、住院天数、S-to-D时间、D-to-B时间、收缩压（SBP）、舒张压（DBP）、白细胞计数（WBC）、中性粒细胞、血小板体积分布宽度（PDW）、左心室射血分数（LVEF）、肌酸激酶同工酶（CK-MB）有关（P<0.05）。多因素Logistic回归分析,结果显示年龄偏大、LVEF偏低、CK-MB偏高、术后TIMI血流分级0~I级、S-to-D时间偏长是女性STEMI患者院内死亡的危险因素（P<0.05）。结论：不同年龄女性STEMI患者冠状动脉病变特点、且PPCI 的治疗效果存在一定的差异。此外,年龄偏大、LVEF偏低、CK-MB偏高、术后TIMI血流分级0~I级、S-to-D时间偏长是女性STEMI患者院内死亡的危险因素。     

微生物处理地下水石油污染的应用研究

探讨中国淄博地区地下水源石油污染的微生物治理技术 .从污染地分离筛选出1 0株除油菌 ,经测定单菌株的降油率在 2 0～ 50 % ,混合菌群MZ940 2的降油率可达71 .4% .在含油地下水模拟反应器中 ,当投菌浓度保持在 1 0 6 个·ml- 1 时 ,混合菌群MZ940 2的降油率可达 53.1 % .在地下水石油污染的现场治理时 ,MZ940 2的投菌量为1 0L·d- 1 ( 1 0 9个·ml- 1 ) ,1 1d后在地下水流段面形成较稳定的微生物带 ,降油率保持在35%左右 .经初步鉴定 ,所投加的MZ940 2菌群未发生变异 .     

植酸酶产生菌的筛选与酶纯化及其性质的研究

对从土壤中分离得到的一株产植酸酶的细菌进行了生理生化鉴定,并对植酸酶进行了分离纯化,该酶反应的最适温度约为55℃,最适pH值为5．8,植酸酶蛋白分子量约为14kD。     

右美托咪定联合丙泊酚用于老年患者无痛肠镜的临床观察

目的:探讨右美托咪定联合丙泊酚用于老年患者无痛纤维结肠镜检查术的麻醉效果及安全性。方法:选择ASA 1-II级择期行无痛肠镜检查术的86例患者随机分为两组,即右美托咪定联合丙泊酚(实验组)和丙泊酚和芬太尼组(对照组),每组各43例。实验组先于10 min内缓解静脉输入右美托咪定0.5μg/kg,对照组同样时间内静脉输入1μg/kg芬太尼。两组均静脉给予丙泊酚1.5 mg/kg,必要时追加丙泊酚。观察两组患者注药前(T0)、注药镜检前(T1)、过脾曲时(T2)、过肝曲时(T3)、退镜时(T4)的心率(HR)、收缩压(SBP)、血氧饱和度(Sp O2)的变化,镇痛效果(VAS评分)、丙泊酚用量、苏醒时间及麻醉后不良反应发生情况。结果:实验组丙泊酚用量和苏醒时间明显短于对照组(P0.05),但两组VAS评分无统计学差异。实验组在T1-T4时间的HR和SBP显著低于对照组(P0.05),实验组Sp O2在T2-T3时间显著高于对照组(P0.05)。观察组低血压、呼吸抑制、不良体动均显著低于对照组(P0.05)。两组嗜睡、头晕、恶心呕吐发生率无统计学差异。结论:右美托咪定联合丙泊酚用于老年患者无痛肠镜检查麻醉效果确切,相对丙泊酚联合芬太尼,可以减少丙泊酚用量,不良反应少,值得临床推广。     

SEFA-PCR法克隆灵芝鲨烯合酶基因启动子及其序列分析

鲨烯合酶是灵芝三萜生物合成的关键酶,灵芝鲨烯合酶基因的表达和活性的高低决定了灵芝中三萜含量的高低。根据已经获得的灵芝鲨烯合酶全长cDNA序列设计一对专一引物,通过PCR扩增得到了灵芝鲨烯合酶基因的基因组全长,序列长1984bp,含有3个内含子。根据其基因组序列设计引物,采用SEFA-PCR的方法,以总DNA为模板,克隆了灵芝鲨烯合酶基因的启动子序列,长1042bp。序列分析发现灵芝鲨烯合酶基因启动子中没有明显的TATA和CAAT框,但是含有CCAAT-bindingfactor、GATA-1、GC-box、TFⅡD等重要的转录因子的结合位点,以及在人和酿酒酵母鲨烯合酶基因启动子中发现的甾醇调节相关的顺式调控元件。     

右美托咪定联合地佐辛用于结肠癌术后镇痛的临床效果观察

目的:探讨右美托咪定和地佐辛用于结肠癌术后患者静脉自控镇痛(Patient-controlled intravenous analgesia,PCIA)的临床效果与安全性。方法:选择ASA I-II级行结肠癌根治术的82例患者并将其随机分为两组:观察组为右美托咪定联合地佐辛组,对照组为舒芬太尼组,每组41例。所有患者均行全麻手术,术后予PCIA。观察组将右美托咪定5μg/kg、地佐辛1 mg/kg、帕洛诺司琼0.75 mg和0.9%氯化钠共配制成100 mL,对照组将舒芬太尼3μg/kg、帕洛诺司琼0.75 mg和0.9%氯化钠共配制成100 mL。两组患者镇痛泵参数相同,监测术后2、6、12、24、48 h的VAS镇痛评分和Ramsay镇静评分,同时记录主要不良反应的发生情况。结果:观察组术后24 h内各时间点的VAS评分均明显低于对照组(P0.05),两组48 h的VAS评分比较差异无统计学意义。观察组患者术后12 h内的Ramsay镇静评分均明显低于对照组(P0.001),两组24 h和48 h的Ramsay评分比较无统计学差异。观察组恶心呕吐的不良反应发生率较对照组明显降低(P0.05),两组嗜睡、头晕、心动过缓发生率比较无统计学差异。结论:右美托咪定联合地佐辛用于结肠癌术后PCIA的镇痛效果明显优于舒芬太尼,且安全性更高。