淇河流域生态系统服务权衡及空间分异机制的地理探测

复杂的地形地貌使小流域具有生产、水源供给和调节等多种生态系统服务功能和显著的区域差异性,然而对小流域生态系统服务权衡关系及外部驱动机制集成测度一直是地理学、生态学和经济学研究的难题。以太行山南段淇河流域为研究对象,利用气象数据、土地利用/覆被数据、植被NDVI等多源数据,使用CASA模型和InVEST模型分别估算固碳、土壤保持及水源供给服务,运用空间叠置法和相关性分析测度生态系统服务权衡关系,进一步利用地理探测器中因子探测和交互探测分析自然环境和人类活动影响对生态系统服务权衡关系的空间影响。结果表明：①2000-2015年,淇河流域多年平均固碳量为375.55 gC m^-2 a^-1,且多年递减速率为18.20 gC m^-2 a^-1;多年平均土壤保持量为396.72 t hm^-2a^-1,多年递减速率为1.2 t hm^-2 a^-1;多年平均水源供给量为67.26 mm/a,以0.16 mm/a的速率递减。②研究时段内,生态系统服务关系以强权衡和低协同为主导,且存在显著的空间分异特征,低协同分布区域减幅为16.21%,强权衡增幅最多（11.85%）,表明流域生态系统服务能力呈升高趋势;生态系统服务两两关系中固碳与水源供给、水源供给与土壤保持表现为权衡关系,固碳与土壤保持呈协同态势。③地理探测器结果表明：固碳与土壤保持方面,植被NDVI（0.306） > 气温（0.241） > 土地利用程度（0.002）;固碳与水源供给方面,植被NDVI因子解释力最强（0.381）;水源供给与土壤保持方面,降水、气温和高程因子解释力均高于0.5;交互探测后各影响因子解释能力显著增强。     

“小组学习”模式在基础医学课程中的实践应用：以医学免疫学为例

将"小组学习"模式应用于基础医学课程"医学免疫学"的教学,在理论课堂采用案例导学、问题导学、角色转换导学和专题讨论导学,实践教学过程针对课堂实验、实验选修课和大学生创新创业项目进行层次化导学。综合运用思维导图、问卷星、成长袋等多元化教学方法和手段,编写思政案例库进行专业课课程思政,结合小组过程性考核进行多元化考核评价。该模式通过培养学生自主学习能力、小组合作能力、实践能力、创新能力和人文素质,为培养高素质、高能力的应用型医学人才奠定基础。该教学模式得到了绝大多数学生的认同,可为基础医学及其他相关课程的开展及高校人才培养提供思路和参考。     

新疆维吾尔族、哈萨克族2型糖尿患者群肠道菌群中直肠真杆菌与多形拟杆菌的定量研究

目的分析新疆维吾尔族、哈萨克族正常糖耐量人群和2型糖尿患者群肠道菌群中直肠真杆菌与多形拟杆菌的量变差异,探讨肠道菌群与2型糖尿病（T2DM）的相关性。方法采用16S rDNA实时荧光定量RT-PCR技术相对定量法。结果分别比较4组人群肠道菌群中直肠真杆菌与多形拟杆菌数量的对数值,与维吾尔族正常组比较,该民族T2DM组中直肠真杆菌的量差异有统计学意义（P=0.0125）,与哈萨克族正常组比较,该民族T2DM组中直肠真杆菌的量差异有统计学意义（P=0.0261）,两民族正常组、T2DM组之间直肠真杆菌的量差异均未见统计学意义;与维吾尔族正常组比较,该民族T2DM组中多形拟杆菌的量差异有统计学意义（P=0.0003）,哈萨克族T2DM组与正常组中多形拟杆菌的量差异有统计学意义（P=0.0055）,两民族正常组之间多形拟杆菌的量差异有统计学意义（P=0.0154）,两民族T2DM组之间多形拟杆菌的量差异未见统计学意义。结论直肠真杆菌与多形拟杆菌数量的变化,与新疆维吾尔族、哈萨克族2型糖尿病的发生（可能）相关,需要进一步深入探讨。     

昆仑雪菊提取物对α-葡萄糖苷酶的抑制作用

目的：探讨昆仑雪菊提取物对α-葡萄糖苷酶的抑制活性。方法：将昆仑雪菊干燥花序粉碎,分别用水提法和乙醇法制备5种提取物。采用α-葡萄糖苷酶体外活性抑制模型,测定昆仑雪菊的5种提取物对α-葡萄糖苷酶的抑制活性。结果：这5种提取物对α-葡萄糖苷酶活性有较强的抑制作用,抑制活性均高于阿卡波糖。其中提取物Ⅰ的抑制活性最强,IC50=28.2 mg/L。结论：昆仑雪菊提取物具有较高的α-葡萄糖苷酶抑制活性,提示昆仑雪菊在抗糖尿病产品开发方面具有很好的应用前景。     

云芝糖肽在ROS、p3 8信号通路中对巨噬细胞Raw264.7的免疫调节作用

目的:探究云芝糖肽(PSP)对静息和脂多糖(LPS)过度刺激两种不同状态的巨噬细胞Raw264.7产生活性氧簇(ROS)及p38、p-p38的影响及其相关机制。方法:采用流式细胞术方法检测ROS的表达;Western blot方法检测MAPK信号通路中p38磷酸化及非磷酸化的相对表达量。结果:100g/ml PSP下调1g/ml LPS单独作用于巨噬细胞时ROS及p-p38的表达量;100g/mlPSP上调正常巨噬细胞p-p38的表达量;p38表达量基本不变。结论:PSP通过ROS,p38两条通路参与巨噬细胞的免疫调节作用。     

假单胞菌铁载体及色素研究

假单胞菌分布广泛,种类繁多,能够产生多种结构的铁载体及具有特定颜色的色素化合物,这使假单胞菌在生物病害防治、医学研究等领域应用潜力巨大.假单胞菌铁载体具有菌种和菌株特异性,可在一定程度上作为其分类依据.假单胞菌色素具有色调、结构、功能多样性,与其铁载体在功能上具有一定重叠性.假单胞菌铁载体及色素分离纯化方法相对比较简单,但它们的生物合成及转运代谢机制非常复杂.     

链脲佐菌素诱导树鼩2型糖尿病

链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)是链球菌产生的天然化合物,对哺乳动物的胰岛B细胞有特异毒性,被广泛用于诱导1型和2型糖尿病。该研究通过多次小剂量注射STZ来建立树鼩2型糖尿病动物模型。24只树鼩被分为对照组以及60、70和80mg/kg剂量STZ诱导组。注射STZ后,成模树鼩出现明显的多饮、多食和多尿症状,平均体重未减轻,高血糖症状持续8～16周,尿糖显著阳性,肾功能及糖耐受明显受损,糖脂代谢紊乱,但未出现糖尿病乳酸中毒和高血糖高渗等并发症。该结果表明,多次小剂量STZ注射可诱导树鼩出现类似2型糖尿病症状和糖尿病肾脏损伤,且综合考虑STZ注射次数、成模率以及成模稳定性,两次注射80mg/kg剂量的STZ较适合用于创建树鼩2型糖尿病模型。     

肺炎球菌1型荚膜多糖多克隆抗体制备与夹心ELISA法建立及其在多糖浓度测定中的应用

目的：利用肺炎球菌1型全菌体制备多克隆抗体,并且利用该抗体建立肺炎1型荚膜多糖夹心酶联免疫吸附分析法（ Enzyme-linked immunosorbent assay ,ELISA）,用于检测发酵和纯化过程中的多糖浓度。方法用灭活的1型肺炎链球菌免疫家兔6周,获得高滴度的抗多糖血清,经过亲和层析纯化,获得高纯度的兔抗肺炎1型多糖抗体IgG。以纯化IgG作为包被抗体,加入多糖样品,再以生物素化的抗体作为检测抗体,建立夹心ELISA法检测肺炎1型多糖浓度。确定标准曲线的最佳线性范围,并对该方法进行特异性、准确性和精密度验证。结果兔免疫血清经过双向免疫扩散检测抗体滴度可达1∶32;该方法的线性检测范围为1．56～50 ng/mL;最低检测限为3．13 ng/mL。在标准品中混入其他型别多糖或培养基,回收率分别为102％和108％;该方法批内精密度和批间精密度分别为6．08％和7．01％。结论建立的夹心ELISA方法,其特异性、准确性和精密度均良好,可以特异地检测肺炎球菌1型多糖浓度。     

多形拟杆菌对糖尿病模型小鼠的影响

目的研究多形拟杆菌(BT)干预糖尿病模型小鼠后对血糖、体重和C肽的影响。方法 (1)用四氧嘧啶(200 mg/kg腹腔注射)制备糖尿病模型小鼠,并分成四组:空白组(n=10)、空白给菌组(n=10)、四氧嘧啶糖尿病模型组(n=11)和模型给菌组(n=11),15 d。(2)BHI血琼脂培养基培养ATCC 29148标准菌株,比浊法测定混悬菌液数量。(3)用多形拟杆菌菌液干预空白给菌组和模型给菌组小鼠,观察15 d中四组小鼠的体重、空腹血糖水平的变化;实时荧光定量PCR测定小鼠肠道内多形拟杆菌的数量;运用酶联免疫法(ELISA)测定血清中C肽的水平。结果 (1)给予菌悬液后,空白给菌组与空白组相比,BT在第3天就可以定植并维持到第15天。与模型组相比,模型给菌组在第15天时可以定植;(2)线性回归相关性分析显示,肠道内多形拟杆菌与体重呈负性相关(r=-0.70,P0.05);与空腹血糖(FPG)呈正性相关(r=0.71,P0.05);与C肽呈负性相关(r=-0.62,P0.05);与胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)呈正性相关(r=0.55,P0.05);与胰岛素分泌指数(HOMA-IS)呈负性相关(r=-0.43,P0.05)。结论 (1)外源性灌胃给予多形拟杆菌可以在肠道内定植。(2)肠道内多形拟杆菌的数量变化与糖尿病有相关性。     

大鼠瘦素基因重组腺相关病毒的构建及在原代神经元细胞中的过表达

目的构建携带大鼠瘦素(leptin)基因的重组腺相关病毒(adeno-associated virus,AAV),并鉴定其在原代鼠神经元细胞中介导的瘦素过表达,为肥胖症基因治疗研究奠定实验基础。方法提取大鼠脂肪组织总RNA,利用RT-PCR技术,获取目的基因瘦素cDNA,通过重组DNA技术,得到瘦素cDNA与pGEM-T载体的重组质粒,阳性重组子用PCR及测序分析鉴定。用Spe I和EcoR V双酶切将pGEM-Leptin中的瘦素基因片段切出,再克隆到AAV2表达质粒pTR-UF22中,构建瘦素重组AAV2载体pAAV2-CBA-leptin。以pDG作为辅助质粒用HEK293细胞包装AAV2-CBA-Leptin,并用一步重力流柱法纯化病毒,由荧光定量PCR测定病毒基因组DNA的拷贝数即为病毒滴度。然后将AAV2-CBA-Leptin及对照病毒AAV2-CBA-EGFP感染大鼠原代神经元细胞,分别用免疫染色和Western blotting鉴定外源基因在神经元的表达。结果测序证实瘦素基因与GenBank提供的原始序列完全一致。重组载体经酶切鉴定与预期结果完全一致,HEK293细胞包装病毒效果良好,得到滴度为1.5×1012vg/mL纯化的重组瘦素病毒AAV2-CBA-Leptin。Western blotting检测显示AAV2-CBA-Leptin能介导瘦素在大鼠神经元细胞中过表达,并随着病毒量的增加而增强。AAV2-CBA-EGFP感染鼠神经元细胞5d后95%左右的细胞有明显的绿色荧光,免疫染色和DAPI核酸染色显示荧光细胞均为神经元而神经胶质细胞无荧光。结论成功构建并包装了瘦素重组AAV2病毒并可介导瘦素在神经元细胞中高效、特异表达,从而为研究瘦素在中枢神经系统控制体重和糖尿病等方面的功能及基因治疗研究打下基础。