Smad5双等位基因剔除ES细胞的建立及其初步研究

Smad5是TGF-信号的细胞质内信号转导分子. Smad5的定位剔除导致小鼠胚胎期死亡. 为了进一步研究Smad5在组织器官发育中的功能, 利用同源重组技术获得了Smad5双等位基因剔除的胚胎干(ES)细胞. 首先利用Cre-LoxP系统删除了Smad5中靶ES细胞的抗性基因, 再用相同的打靶载体进行转染, 经Southern杂交筛选获得了Smad5双等位基因剔除的ES细胞. 嵌合体研究的结果表明, Smad5在心脏和神经管的正常发育中可能起重要的作用. Smad5双等位基因剔除ES细胞在裸鼠皮下可以形成畸胎瘤, 并可分化成包括神经细胞、肌肉细胞、软骨细胞、内皮细胞等在内的多种细胞, 因而Smad5双等位基因剔除的ES细胞可用于研究Smad5介导的TGF-信号在多种组织器官发育和ES细胞体外定向分化中的作用.     

基因打靶方法制备乳腺生物反应器

基因打靶技术制备乳腺生物反应器,克服了显微注射法的众多缺陷,并随着第一例基因打靶家畜的诞生而成为这一研究领域的热点。本文从制备乳腺生物反应器过程中基因打靶策略、打靶细胞到打靶位点的选择等各个方面,详细分析了其中的技术难点、解决问题的对策、国内外研究进展以及应用前景。     

自蔓延高温合成镍钛形状记忆合金的生物医学基础研究——第一部分:多孔体的研制

目的:研制孔洞分布均匀,孔隙率高又有一定强度的镍钛合金多孔材料,研究其生物学特性,探寻修复颌骨缺损的新材料和新方法。材料和方法:应用自蔓延高温合成工艺,制成镍钛合金多孔体,观察多孔体的孔洞分布,孔洞形貌及孔隙率。结果:预热温度是影响多孔体的最重要的因素,当预热温度为400℃时,多孔体孔隙形成率达最大值70％,压缩强度为100MPa,形状恢复率达92％。结论:自蔓延高温合成钛镍形状记忆合金多孔体比重轻,强度高,孔隙可能有利于与周围组织的结合,可望成为良好的颌骨修复代用品。     

腕踝针联合耳穴压豆治疗肝癌癌痛的疗效及对心理状态和血清疼痛介质的影响

摘要 目的：观察腕踝针联合耳穴压豆治疗原发性肝癌（PHC）癌痛的疗效及对心理状态和血清疼痛介质的影响。方法：选取湖南中医药大学第一附属医院2020年3月~2022年12月期间收治的PHC癌痛患者117例,按随机数字表法分为对照组和联合组,例数分别为58例和59例。两组患者均接受常规疼痛处理,对照组患者接受耳穴压豆治疗,联合组在对照组的基础上接受腕踝针治疗。对比两组疼痛缓解率、临床指标、心理状态和疼痛介质水平。结果：联合组的疼痛缓解率高于对照组（P<0.05）。联合组的数字疼痛法（NRS）评分低于对照组,止痛起效时间、每次疼痛持续时间短于对照组,爆发痛次少于对照组（P<0.05）。治疗后,两组焦虑自评量表（SAS）、抑郁自评量表（SDS）评分下降,且联合组低于对照组（P<0.05）。治疗后,两组5-羟色胺（5-HT）、P物质（SP）、前列腺素E₂（PGE₂）下降,且联合组低于对照组（P<0.05）。结论：腕踝针联合耳穴压豆治疗PHC癌痛,可有效减轻疼痛症状,降低血清疼痛介质水平,同时还可有效调节患者的心理状态,应用价值较好。     

表达大肠杆菌LT—B抗原的减毒鼠伤寒沙门氏菌株的构建

采用无毒的鼠伤寒沙门氏菌sR一1l△Cya,△Crp,△asd菌株作为宿主菌,选择相应的asd+表达载体构建了含大肠杆菌肠毒素B亚基基因(toxB)的重组质粒,并通过两次转化引入宿主菌,构成了平衡致死的重组体。特异性的测定表明,这种无抗药性的杂合菌株能较高水平地表达LT—B抗原,可望成为预防ETEC腹泻和相应的沙门氏菌病双价口服活疫苗的研究基础。     

HBV基因中GRE相关DNA片段能介导多种激素对转录的调节作用

本文用寡聚核苷酸介导的定点突变改造乙型肝炎病毒(HBV)基因中的糖皮质激素应答元件(glucocorticoid response element,GRE),并将改变前后的GRE相关DNA片段与氯霉素乙酰基转移酶(CAT)基因融合,与多种激素受体的表达质粒共转染肝细胞,分别用不同的激素处理,测定CAT基因的表达活性以确定HBV上GRE相关DNA片段对各种激素的应答。结果表明HBV上GRE相关DNA片段能介导异源基因对糖皮质激素、孕激素和雌激素的应答。不含Enl的GRE相关片段与CAT基因融合后,在不加激素诱导的情况下,CAT基因活性明显降低。     

人Pescadillo能够诱导大规模染色质伸展

人Pescadillo基因编码的蛋白分子中含有一个BRCT结构域,Pescadillo在DNA合成、细胞增殖和转化中发挥重要作用.考虑到BRCT结构域能够诱导大规模染色质伸展,对Pescadillo在大规模染色质伸展中的作用进行了研究.首先从人乳腺MCF10A细胞中得到了Pescadillo编码区的cDNA,其序列在第580～582位氨基酸发生缺失,将该cDNA片段与lac阻遏物在AO3-1细胞中融合表达,通过lac阻遏物结合细胞基因组中含有lac操纵基因的区域将Pescadillo靶向至染色质周围,发现Pescadillo能够诱导大规模染色质伸展,并将诱导大规模染色质伸展活性的结构域定位至其BRCT结构域,这为深入理解Pescadillo的重要作用提供了新的线索.     

酪酸梭菌二联活菌辅助治疗儿童幽门螺杆菌感染的

摘要：目的 评价酪酸梭菌二联活菌（常乐康）联合标准三联疗法对儿童幽门螺杆菌（Helicobacter pylori,H. pylori）感染的治疗效果,探讨更优化的H. pylori根除方案。方法 采用前瞻性、随机病例对照研究方法,纳入符合H. pylori感染诊断标准的患儿144例,完成120例,随机分为2组：A组（标准三联组）：奥美拉唑0.8~1.0 mg/kg?d,分2次,餐前30 min口服;克拉霉素15 mg/kg?d,分2次口服,总量＜1 000 mg/d;阿莫西林50 mg/kg?d,分2次口服,总量＜2 000 mg/d,疗程10 d。B组（常乐康组）：在标准三联疗法基础上加用常乐康840 mg,日2次,与抗生素间隔2 h以上服用,疗程14 d。于治疗前及治疗后4周进行症状评分,治疗过程中由患儿家长记录不良反应,停药4 周后复查13C呼气试验。比较两组症状缓解率,H. pylori根除率及不良反应的发生率。结果 治疗4周后,标准三联组的症状缓解率为74.1%,常乐康组为90.3%,两组比较,差异有统计学意义（χ2=6.27,P=0.04）;H. pylori根除率,标准三联组为58.6%,常乐康组为80.6%,P=0.009,差异有统计学意义;治疗期间不良反应主要表现为恶心、呕吐、腹泻、腹胀和食欲不振等,常乐康组较标准三联组发生率明显下降,分别为16.1%和25.8%,差异有统计学意义（P=0.03）。结论 酪酸梭菌二联活菌辅助治疗儿童幽门螺杆菌感染可以提高临床症状缓解率,增加H. pylori根除率,减少不良反应发生率。     

青藏高寒区退化草地生态恢复:退化现状、恢复措施、效应与展望

青藏高寒区属于独特而典型的高原生态系统,草地生态系统作为其重要组成部分,在对高寒区生态安全以及农牧民生计的维系中,占有举足轻重的地位。目前,青藏高寒区的草地生态系统退化严重,因此该区退化草地的生态恢复工作是国家生态工作的重中之重。近年来,已有大量研究提出了各种有效的恢复手段,但缺乏因地制宜的系统性总结和论述。基于此,在已有研究的基础上,阐述了青藏高寒区退化草地现状,总结了高寒区各生态类型分区的主要生态问题,明确了不同集成技术与模式的适用区域和范围,同时对这些技术、措施和模式的恢复效果和恢复机制进行分析和讨论。并对未来高寒草地生态系统的研究进行了展望,以期为青藏高寒区退化草地的恢复治理、高寒草地生态系统结构和功能稳定性维系提供系统的理论基础与技术支撑。     

灭活贝氏柯克斯体免疫小鼠抗登革病毒感染的实验研究

目的 研究灭活贝氏柯克斯体增强小鼠非特异性抗登革病毒感染的免疫效能。方法 用灭活贝氏柯克斯体全细胞疫苗(WCV)免疫BALB/c小鼠,每只小鼠皮下注射50μg WCV,初次免疫后第5周及第7周分别腹腔注射20μg WCV加强免疫。1周后,用10~5 TCID_(50)剂量的登革病毒2型经尾静脉注入感染小鼠,于感染后48、72h分别解剖小鼠.自血和脑组织提取RNA样本,用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测样本。结果 用登革病毒特异的定量PCR检测感染小鼠血RNA样本,结果显示感染72h血样本中病毒含量显著低于48h样本,但免疫小鼠与未免疫小鼠之间无显著差异。检测脑组织RNA样本,未免疫小鼠和免疫小鼠的感染48h样本检出病毒均为少量;但未免疫小鼠感染96h样本检出病毒量明显增加,显著高于免疫小鼠。结论 灭活贝氏柯克斯体可诱导机体产生非特异的免疫应答,具有一定增强小鼠抗登革病毒感染的能力,但具体机制有待进一步研究。