Establishment of Smad2 conditional gene targeting mice based on the Cre-LoxP system

Smads is a new gene family in transforming growth factor-β (TGF- β signaling pathway. Smad2 mutated in multiple human tumors and may be a candidate tumor suppressor gene. Targeted disruption of murine Smad2 gene resulted in embryonic lethality at E6.5. To study the function of Smad2 in vertebrate organgenesis and tumorigenesis, we constructed the Smad2 conditional targeting vector in which two LoxP sequences were placed to flank the sequences encoding the C terminal functional domain of Smad2. The validity of the LoxP sites in the targeting construct was tested in E. coli that express the Cre recombinase constitutively. The vector was electropo-rated into ES cells and 3 targeted ES cell clones were obtained by Southern blot screening. Targeted ES cells were introduced into C57BL/6J blastocysts by microinjection to generate germ-line chimeras. Genotyping analysis showed that 2 progeny among these chimeras carried the Smad2 conditional targeted allele. The establishment of Smad2 conditional gene targetin     

颈动脉超声定量参数联合MPV/PC比值、NLR对急性缺血性脑卒中患者预后不良的预测价值

摘要 目的：探讨颈动脉超声定量参数联合平均血小板体积（MPV）/血小板计数（PC）比值、中性粒细胞/淋巴细胞比值（NLR）对急性缺血性脑卒中（AIS）患者预后不良的预测价值。方法：选择2020年3月至2022年3月合肥市第二人民医院收治的97例AIS患者,所有患者均行颈动脉超声检查和血常规检查,获得颈动脉超声定量参数,计算MPV/PC比值、NLR。出院后90 d采用改良Rankin量表（mRS）评估患者预后,将患者分为预后不良组和预后良好组。受试者工作特征（ROC）曲线分析颈动脉超声定量参数、MPV/PC比值、NLR联合预测AIS患者预后不良的价值。结果：预后不良组动脉内膜中层厚度（IMT）、舒张末期血流速度（EDV）、MPV/PC比值、NLR大于预后良好组（P＜0.05）,收缩期峰值血流速度（PSV）小于预后良好组（P＜0.05）。IMT、PSV、EDV、MPV/PC比值、NLR预测AIS患者预后不良的曲线下面积分别为0.751、0.710、0.693、0.769、0.771,联合IMT、PSV、EDV、MPV/PC比值、NLR预测AIS患者预后不良的曲线下面积为0.883,高于单独指标预测。结论：颈动脉超声定量参数联合MPV/PC比值、NLR在AIS患者预后不良评估中具有较高的预测价值。     

白头鹎鸣唱特征的季节差异分析

许多动物的声通讯行为存在显著的季节变化,鸟类的鸣唱也是如此。雄鸟鸣唱具有宣告领域和吸引配偶的功能,在繁殖季节与非繁殖季节之间应存在一定差异,但差异如何？具体表现在哪些方面？这在很多鸟类中尚未可知。本研究以一种在秋季也有显著鸣唱行为的城市常见小型鸣禽——白头鹎（Pycnonotussinensis）为研究对象,比较其在春季（繁殖季）与秋季（非繁殖季）的鸣唱差异,并分析可能的原因。于2020至2021连续两年的春、秋季分别在武汉地区各采集了27只和30只雄性白头鹎的鸣唱录音,共测量分析春季鸣唱372个,秋季鸣唱435个。对测得的各鸣唱参数数据进行季节间比较,结果显示,白头鹎的鸣唱持续时间和鸣唱音节数存在显著季节差异,春季鸣唱的持续时间较秋季更长,鸣唱音节数更多。鸣唱的频率、能量分布等其他声学参数,以及鸣唱型出现率（反映鸣唱曲目大小）均未表现出显著季节差异。白头鹎鸣唱的时程特征相对其他鸣声特征更具季节可塑性。此外,还发现同一采样点的白头鹎春、秋两季使用相同的鸣唱型。本研究结果表明,春季白头鹎的单位时间鸣唱输出量更大,鸣唱行为更活跃,这与繁殖季节鸟类的领域性更强、为繁殖成功投入更多相一致。白头...     

濒危物种川陕哲罗鲑在汉江上游太白河再发现

正川陕哲罗鲑(Hucho bleekeri)隶属于鲑形目(Salmoniformes)鲑科(Salmonidae)哲罗鲑属,是我国特有物种,主要分布在29°~33°N秦岭以南长江流域北侧一级支流岷江水系和汉江水系的上游山区激流环境中,是欧亚大陆鲑鳟鱼类中分布纬度最低的种类。20世纪60年代以前,川陕哲罗鲑资源还较丰富,在岷江上游的干流、大渡河、青衣江及其附属支流均有分布。20世纪60年代以后,受环境恶化、过度捕捞等影响,资源量锐减,分布区域不断缩     

局灶性皮质发育不良的MRI表现及生活质量水平的评估

目的:探讨局灶性皮质发育不良(FCD)与影像学改变的相关性,并应用日常生活能力量表(ADL)评价FCD患者手术前后的生活质量改善以及癫痫缓解率。方法:回顾性分析60例FCD癫痫患者MRI检查,观察病变部位影像学变化;回顾60例FCD癫痫患者手术前后所填写的生活质量量表,分析患者总体健康水平,总体生命质量,情绪健康,日常精力,认知能力,对药物副作用的担忧,对癫痫发作的担忧,以及社会功能的变化。结果:60例FCD患者有23例(阳性率为38.3%)表现出FCD的病理特征。这23例中表现有四种:灰白质交接模糊,皮层增厚,异常脑沟脑回图案,脑叶萎缩。生活质量量表显示FCD患者(术前)生活质量明显差于正常人群,FCD患者术后的生活质量比术前得到改善。结论:FCD患者的MRI表现呈现多样性,但主要有四种类型。FCD患者术后生活质量得到改善,提示癫痫缓解率提高。     

肥大软骨细胞特异性表达Cre重组酶转基因小鼠的建立

肥大软骨细胞是软骨细胞的终末分化形式,在软骨内成骨过程中发挥十分关键的作用。为了研究肥大软骨细胞在骨骼发育过程中的功能,我们构建了在8.2 kb小鼠X型胶原基因（Col10a1）启动子控制下表达Cre重组酶的转基因小鼠品系（Col10a1-8.2-Cre）。采用显微注射法将11.5 kb的转基因片段引入小鼠基因组,共注射受精卵328枚,获得子代鼠51只,经PCR基因型鉴定有3只在基因组上整合有Cre重组酶基因。PCR检测发现Col10a1-8.2-Cre转基因在含有肥大软骨细胞的组织中表达。为了检测Cre重组酶表达的强度和组织特异性,转基因小鼠与ROSA26报告小鼠交配。子代ROSA26;Col10a1-8.2-Cre双转基因小鼠LacZ染色检测的结果显示,Cre重组酶在所有的肥大软骨细胞中表达。原位杂交的结果验证Col10a1-8.2-Cre转基因表达在肥大区的上端。以上结果表明,我们建立的肥大软骨细胞特异性表达Cre重组酶的转基因小鼠品系可以作为一种遗传学工具,介导目的基因在肥大软骨细胞中的敲除。     

Ⅱ型肺泡细胞特异表达SARS冠状病毒核衣壳蛋白转基因小鼠的建立

目的:建立Ⅱ型肺泡细胞特异表达SARS冠状病毒(SARS-CoV)核衣壳蛋白(N蛋白)的转基因小鼠。方法:用分子克隆的方法构建包括肺表面活性蛋白A(SP-A)启动子、SARS-CoVN蛋白基因、β-半乳糖苷酶(LacZ)报告基因和人生长激素(hGH)polyA的转基因载体pSP-A-N。以显微注射的方法将8.3kb的转基因片段引入小鼠受精卵。通过PCR、Southern印迹和LacZ染色检测子代小鼠中转基因的整合及表达。结果:共注射952枚受精卵,移植至42只假孕母小鼠的输卵管中发育,获得子代小鼠128只,经PCR、Southern印迹鉴定,其中11只小鼠基因组上整合有SARS-CoVN蛋白基因,整合率为8.6%。鉴定结果显示,11只转基因首建者小鼠中有1只表达外源基因并能正常传代。LacZ染色结果表明N蛋白基因在转基因小鼠Ⅱ型肺上皮细胞中特异表达。结论:成功构建了Ⅱ型肺泡细胞特异表达SARS-CoVN蛋白的转基因小鼠,为深入研究该基因的病理生理学效应奠定了基础。     

p8-应激调节的多功能核蛋白

1997年,Iovanna等在研究急性胰腺损伤的分子变化中首先克隆得到了p8基因.人的p8分子是一个由82个氨基酸组成的小分子核蛋白,分子内含有一个保守的核定位序列,蛋白质二级结构与HMG-I/Y蛋白十分相似,该分子在包括胰腺、肝脏、肾脏在内的诸多脏器受到损伤刺激后,能够在短时间内迅速、高水平地上调,因此被认为是一个应激分子(stress associated protein).随后的研究显示该基因具有复杂的表达调节模式,在个体发育、肿瘤形成、组织损伤、心肌肥大以及糖尿病性肾病中都发挥重要作用,并且其功能表现在不同组织、细胞中不尽相同.     

糖尿病肾病患者与相关细胞因子水平的变化

目的:研究糖尿病肾病(DN)患者的血清肿瘤坏死因子(TNF-α)、干扰素-γ(IFN-γ)、白介素-6(IL-6)、血管内皮生长因子(VEGF)、和肝细胞生长因子(HGF)水平的变化在肾病发生、发展过程中的作用。方法:应用ELISA法分析20例糖尿病肾病患者和20例正常人进行了血清TNF-α、IFN-γ、IL-6、VEGF和HGF水平。结果:糖尿病肾病患者血清中TNF-α、IL-6、VEGF和HGF水平非常显著地高于正常人组(P<0.01),而IFN-γ水平则显著地低于正常人组(P<0.01)。结论:TNF-α、IFN-γ、IL-6、VEGF和HGF水平的变化在糖尿病肾病的发生和发展中相互作用,观察其浓度的变化对探讨其发病机理、预防和指导导用药均有十分重要的临床价值。