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191.
应用反向遗传学技术在哺乳动物细胞中产生甲型流感病毒 总被引:19,自引:1,他引:18
在国内首次应用反向遗传学技术将多个质粒共转染哺乳动物细胞,得到了具有活性的甲型流感病毒.采用自行构建的含有polⅠ和polⅡ启动子和终止子序列的pIVV2质粒,将A/PR/8/34(H1N1)流感病毒基因组全部8个RNA节段的cDNA分别克隆到该质粒的两个启动子之间,得到了8个可在真核细胞中复制和表达的质粒.将这8个质粒共转染293T细胞,培养48h后吸取上清液,转接入MDCK细胞中,再经过72h培养,发现在MDCK细胞中有明显的流感样细胞病变产生,测上清病毒血凝滴度为1:10.将MDCK细胞冻融液继续接种鸡胚和MDCK细胞,培养后将鸡胚尿囊液和MDCK细胞冻融上清液进行血凝和血凝抑制实验,证明所得病毒为A/PR/8/34(H1N1).此结果将有助于国内今后对流感疫苗的研究. 相似文献
192.
崇安地蜥(Platyplacopus sylvaticus)属蜥蜴亚目,蜥蜴科,地蜥属,系C.H.Pope 1926年4~9月在我国福建省崇安县挂墩采到,并于1928年发表的新种,仅5号标本,均存于美国自然历史博物馆,此后再无采集报道[1]. 相似文献
193.
水果果肉的组织特征决定了从果肉中抽提线粒体的方法与其它组织有所不同。采用平面细孔瓜果刨破碎果肉、差速离心、密度梯度纯化等方法能够得到活性较高的线粒体。Brother氧电极能够判断线粒体膜是否完整。利用PAGE凝胶电泳、WesternBlot(AOX单克隆抗体 )等分析手段 ,对‘RoyalGala’苹果中AOX进行了分离和鉴定。结果表明 :‘RoyalGala’苹果果肉线粒体中AOX单体的分子量约在 35~ 37kD之间 ,二聚体约为 90kD左右。这与其它已分离鉴定的产热植物或烟草等线粒体中AOX蛋白的分子量基本一致。 相似文献
194.
195.
烤烟品种资源的RAPD分析 总被引:20,自引:0,他引:20
从156个随机引物中筛选出30个引物,对来自国内外的31个烤烟品种进行了遗传多样性和亲缘关系的RAPD分析。在检测的246个位点中,127个位点为多态位点(52%)。聚类分析表明,不同烤烟品种之间存在明显差异,31个品种基本上可分为4大类,品种最多的第一大类(19个)主要由来自美国的Orinoco烤烟选育而成,反映了我国现在推广的烤烟品种遗传基因比较狭窄。研究结果表明,RAPD技术可用于烤烟品种的鉴别和纯度测定。研究为烤烟杂种育种中亲本的选配提供了一定的理论依据。 相似文献
196.
虽然具有广泛用途的L( ) 酒石酸的生产方法有 4种[1 ] ,但目前研究最多 ,最具工业生产前景的方法 ,是应用化学合成的前体为底物 ,发酵生产L( ) 酒石酸的方法。该法中的微生物发酵转化适宜在弱碱性的条件下进行 ,通常都是把顺式环氧琥珀酸制备成相应的二钠盐来作为前体 ,再进行微生物转化生成L( ) 酒石酸。张建国[2 ] 、黄腾华等人[3 ] 在实验室按以上路线生产L( ) 酒石酸 ;孙志浩等人[4] 以明胶为载体固定化微生物细胞生产L( ) 酒石酸 ;张建国等人[5 ]在他们自己工作的基础上进一步探讨了细胞固定化的方法 ,找到了一种… 相似文献
197.
建立一种靶点蛋白质快速定量检测方法。在原有侧向流动免疫层析技术的基础上,通过优化层析材料和纳米微球的均一性、改进检测区的检测方法,经逐点扫描技术,建立标准浓度曲线,以达到对临床靶点蛋白质的定量检测。以乳腺癌组织中的Her2表达为例,通过对已知浓度样品的检测,验证本技术方法的准确度大于96%。另外,以蛋白质免疫印迹作为组织中特定蛋白质检测金标准,分析临床肿瘤组织中Her2蛋白的含量,其准确率也达到95.5%,而免疫组织化学方法检测准确率仅为69.58%。新型免疫层析法检测结果与靶向治疗患者的愈后密切相关(P<0.01)。改进后的新型免疫层析方法能够准确地对临床靶点蛋白质进行定量检测,而且结合侧向流动技术的简单、快速和易用性,这种新型检测方法可以广泛应用于临床组织标本、血液标本和体液标本中靶点蛋白质的临场定量检测,在一定程度上可以替代免疫组化技术。 相似文献
198.
白植生 《微生物学免疫学进展》1980,(2)
<正> 病毒必须依赖宿主细胞的酶和代谢系统才能生存和进行复制。组织培养法由于其本身的许多优点已成为理想的病毒培养系统。组织培养技术的发展为病毒学提供了很好的工具和方法,它已广泛应用于病毒性疾病的诊断、疫苗生产、抗病毒药物的研究以及病毒学基础理论的研究,如病毒复制过程、病毒免疫和病毒生物化学等。 从培养类型来看,组织培养可分为组织块培养、原代细胞培养、次代细胞培养、传代细胞系、传代细胞株和器管培养等。 相似文献
199.
200.