| 应用反向遗传学技术在哺乳动物细胞中产生甲型流感病毒 |
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| 引用本文： | 陈稚峰,张立国,董婕,吴昆昱,陈爱珺,孙梅生,黄银霞,齐立,张智清,郭元吉.应用反向遗传学技术在哺乳动物细胞中产生甲型流感病毒[J].病毒学报,2002,18(3):193-197. |
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| 作者姓名： | 陈稚峰 张立国 董婕 吴昆昱 陈爱珺 孙梅生 黄银霞 齐立 张智清 郭元吉 |
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| 作者单位： | 中国疾病预防控制中心,病毒病预防控制所,北京,100052 |
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| 基金项目： | 科技部专项基金;NCSTE-2000-JKZX-231; |
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| 摘 要： | 在国内首次应用反向遗传学技术将多个质粒共转染哺乳动物细胞,得到了具有活性的甲型流感病毒.采用自行构建的含有polⅠ和polⅡ启动子和终止子序列的pIVV2质粒,将A/PR/8/34(H1N1)流感病毒基因组全部8个RNA节段的cDNA分别克隆到该质粒的两个启动子之间,得到了8个可在真核细胞中复制和表达的质粒.将这8个质粒共转染293T细胞,培养48h后吸取上清液,转接入MDCK细胞中,再经过72h培养,发现在MDCK细胞中有明显的流感样细胞病变产生,测上清病毒血凝滴度为1:10.将MDCK细胞冻融液继续接种鸡胚和MDCK细胞,培养后将鸡胚尿囊液和MDCK细胞冻融上清液进行血凝和血凝抑制实验,证明所得病毒为A/PR/8/34(H1N1).此结果将有助于国内今后对流感疫苗的研究.
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| 关 键 词： | 质粒 共转染 甲型流感病毒 反向遗传学 |
| 文章编号： | 1000-8721(2002)03-0193-05 |
Generation of Influenza A Virus from Separated Cloned cDNA Fragments |
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| CHEN Zhi feng,ZHANG Li guo,DONG Jie,WU Kun yu,CHEN Ai jun,SUN Mei sheng,HUANG Yin xia,QI Li,ZHANG Zhi qing,GUO Yuan ji.Generation of Influenza A Virus from Separated Cloned cDNA Fragments[J].Chinese Journal of Virology,2002,18(3):193-197. |
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| Authors: | CHEN Zhi feng ZHANG Li guo DONG Jie WU Kun yu CHEN Ai jun SUN Mei sheng HUANG Yin xia QI Li ZHANG Zhi qing GUO Yuan ji |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | plasmid cotransfection influenza A virus reverse genetics |
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