利用PCR法扩增透明颤菌血红蛋白基因条件的优化

以透明颤菌染色体基因组DNA为模板,利用PCR技术获取透明颤菌(Vitreoscilla)血红蛋白基因(vgb)。在多聚合酶链式反应中采用碱变性模板与热启动等方法进行透明颤菌血红蛋白基因体外扩增,成功地扩增出约0.5 kb的透明颤菌血红蛋白基因,并对vgb的PCR条件进行了研究。获取理想的目的基因PCR反应的综合参数比十分重要。     

ADAPTIVE PHYSIOLOGY OF DIFFERENT ECOTYPES OF Phragmites Communis TO SALINITY IN THE YELLOW RIVER DELTA

山东省黄河三角洲分布4种不同生态型芦苇——淡水沼泽芦苇、咸水沼泽芦苇、低盐草甸芦苇和高盐草甸芦苇。1994年与1995年的8～9月份对不同生境生态型芦苇的生长情况、群落组成及优势度进行观测,并测定4种不同生态型芦苇的有机和无机渗透剂以及渗透势和渗透调节能力。结果表明不同生态型芦苇的多度、盖度、植株高度、叶片含水量和渗透势均随生境盐度的增大而降低;低盐度下的芦苇其渗透剂以K     

四膜虫rDNA表达载体的改造及用于异源基因的高效表达

基于四膜虫小核rDNA改造得到的pD5H8载体,在转染进接合生殖时期的四膜虫后能发育成9000~10000拷贝的大核rDNA,因此pD5H8载体是四膜虫异源基因表达的研究热点;但其载体上匮乏合适的克隆位点和无启动子结构阻碍了该载体的进一步发展。本研究在四膜虫启动子HSP70-2和终止子HSP70-1之间,通过稀有酶切位点I-Sc e玉导入细菌绿色荧光蛋白(HGFP)这一筛选标记,由此组成的DNA片段(HSP70-25' UTR-I-Sce玉-HGFP-I-Sce玉-HSP70-13' UTR)整合进pD5H8,将之改造成pD5H8-HGFP表达载体。来自真核生物的绿色荧光蛋白(GFP)藉由I-Sc e玉酶切位点一步导入pD5H8-HGFP表达载体后,在四膜虫中大量表达且具有生物学活性。因此,改造后的pD5H8-HGFP表达载体拥有一步法引入异源基因,几乎无酶切位点的限制,有效的筛选标记,高效的异源基因表达能力,以及环境友好、便捷可控等诸多优点,这对于深入开展四膜虫基因功能的过表达研究和开发异源基因在四膜虫这一真核表达系统中的应用奠定了技术基础。     

水分胁迫下大丽花光合及叶绿素荧光的日变化特性

以大丽花品种‘粉西施’为试验材料,采用盆栽方法,研究了不同土壤含水量处理对‘粉西施’叶片光合及荧光特性日变化的影响。结果表明:随着水分胁迫程度的加深,大丽花叶片的Pn、Tr和Gs日平均值均降低,Ci日平均值在轻度和中度胁迫下降低,在重度胁迫下升高;在轻度和中度水分胁迫下大丽花Pn降低的主要原因是气孔限制,而重度水分胁迫下是非气孔因素;Pn在水分胁迫下的日变化曲线由单峰型变成双峰型,出现"午休"现象,且Tr和Gs在水分胁迫下的日变化曲线和Pn一致,但Ci日变化较平稳,与Pn相反。随着水分胁迫程度的加深,大丽花叶片的初始荧光(F0)日平均值升高,日变化曲线呈倒"V"型,PSⅡ反应中心可能破坏或可逆失活;Fm、Fv/Fm和ΦPSⅡ日平均值均降低,日变化曲线呈"V"型。水分胁迫使大丽花光抑制程度加深,抑制了PSⅡ的光化学活性,致使用于光化学反应的光能及实际光化学效率降低。研究结果发现,大丽花品种‘粉西施’在不同水分胁迫下都产生了光合作用的光抑制而使净光合速率降低;光合机构可适应轻度和中度水分胁迫而发生可逆失活,没有受到不可恢复的伤害,而重度水分胁迫降低了叶片的光合机构活性,加剧了光抑制程度,严重限制了光合作用;适宜大丽花生长的土壤含水量应为田间最大持水量的30%以上。     

培养基对透明颤菌生长的影响

目的:为了从环境中分离透明颤菌(Vitreoscilla),对培养基和生长条件进行了优化。方法:采用富集培养的方法,对透明颤菌生长的培养基成份进行了筛选试验。结果:在培养温度为32±2℃,50ml/500ml三角瓶,pH 7.8,醋酸钠浓度为0.02%,摇床转速120r/min条件下,透明颤菌生长最佳培养基是:酵母粉0.7%,蛋白胨0.3%。结论:透明颤菌在上述培养基中生长12h可达到高峰。     

透明颤菌(沈阳株)血红蛋白基因克隆与序列分析

目的：以透明颤菌（Vitreoscilla）基因组DNA为模板,扩增透明颤菌血红蛋白基因（vgb）。方法：采用PCR81与摹甲季缉彗术,将PCR产物插入到克隆载体PET28a中,测序应用DNA测序仪。结果：获得了约0．5kbDNA片段,测序结果与已发表的透明颤菌血红蛋白基因核苷酸序列比较,同源性为97％。结论：所扩增的DNA片段确认是透明颤菌血红蛋白基因。     

LPS对冷应激大鼠Mφ、Sertoli细胞分泌IL-1的影响

目的 为探讨LPS对冷应激大鼠外周血巨噬细胞（Mφ）和睾丸支持细胞（Sertoli）分泌IL-1的影响,本文检测了大鼠Mφ细胞和Sertoli细胞IL-1的含量。方法体外分离培养大鼠Mφ细胞、大鼠睾丸Sertoli细胞和小鼠胸腺细胞,设37℃对照组与0℃、-4℃冷应激实验组,IL-1含量测定采用放免分析方法。结果外周血MφIL-1含量：0℃组高于37℃对照组,分别为20444.7±8936.3和10281.2±1435.8,差异有显著性（P〈0.05）;-4℃和37℃对照组分别为10307.2±2648.6和10281.2±1435.8,差异无显著性（P〉0.05）。睾丸Sertoli细胞IL-1含量：0℃组高于37℃对照组,LPS-和LPS＋分别为54.31±0.35和41.52±0.42与99.74±0.09和82.96±0.33,差异有显著性（P〈0.05）;-4℃和37℃对照组分别为38.11±0.14和41.52±0.42与45.84±0.11和82.96±0.33,差异有显著性（P〈0.05）。结论冷应激抑制LPS诱导Mφ和Sertoli细胞的IL-1含量分泌,但在早期Mφ和Sertoli细胞均出现免疫系统激活的过程,其作用机制有待深入研究。     

有污染物二氯二苯三氯乙烷、三丁锡和2,3,7,8-四氯二苯并二噁英暴露下的四膜虫毒理因组学研究

有污染物二氯二三氯乙烷(DDT)、三丁锡(TBT)和2,3,7,8-四氯二并二噁英(TCDD)因对水生生态系统的害以对人体健康造成的重伤害而受到重视.实验以生物原生动物嗜热四虫为究对象,利用microarray技筛选了在上3种污染物下分别露24h后差异表达2倍以上的因,并在gene ontology功能注释的础上,通过富分析考察了这些因涉的主要功能,其中许多功能和多细胞生物中的道相一致.随后,以TCDD中富功能注释的因为核心,通过CLR算法构建了TCDD相关因的相互作用网络,依照功能将其划分为2个亚网络,并在此础上推测了TCDD在四虫中的作用制型.结果显,四虫有成为在因组水平究毒物作用制的单细胞生物型的大潜力.     

黑龙江立克次体与黑龙江蜱传斑点热研究概况

黑龙江立克次体是近年发现的斑点热群立克次体新种,由其引起的疾病为黑龙江蜱传斑点热。综述了黑龙江立克次体的发现、分离鉴定、病原学和分子生物学特征,介绍了黑龙江蜱传斑点热的流行病学、临床表现及治疗与预防。