南京地区2010～2011年度呼吸道感染患儿腺病毒的流行病学研究

本研究为了解南京地区儿童腺病毒(ADV)感染的流行特点及型别,收集2010年8月至2011年7月南京医科大学附属南京儿童医院住院及门诊呼吸道感染患儿的鼻咽抽吸物(NPA)及咽拭子(NPS)共644例,采用巢氏聚合酶链反应法(Nested-PCR)检测ADV hexon基因,将阳性PCR扩增产物进行测序、同源性和进化分析。同时对12种其他呼吸道相关病毒进行PCR检测,包括人博卡病毒(HBoV),呼吸道合胞病毒(RSV),人鼻病毒(HRV),副流感病毒1～4型(PIV1-4),流感病毒A和B(IFVA/B),人偏肺病毒(HMPV),冠状病毒NL63和HKU1(HCoV-NL63和HCoV-HKU1)。结果显示:644例标本中共检出ADV阳性扩增产物171份,检出率为26.55%,3型120例(70.18%,120/171),7型16例(9.36%,16/171),1型12例(7.02%,12/171),2型10例(5.85%,10/171),5型6例(3.51%,6/171),6型3例(1.75%,3/171),57型3例(1.75%,3/171),41型1例(0.58%,1/171)。ADV感染呈全年散发,其发病高峰主要在4～7月。以7岁以下儿童多见(96.49%)。171例ADV感染患儿中有99例(57.89%)存在混合感染,其中以呼吸道合胞病毒(RSV)、人鼻病毒(HRV)多见。ADV阳性患儿诊断以下呼吸道感染为主(63.16%),肺炎占30.41%。结论:ADV是2010年8月到2011年7月南京地区儿童呼吸道感染的重要病原之一,其优势流行株为3型,长期监测其流行型别具有重要意义。     

不同中枢神经系统感染患儿血清和脑脊液炎症标记物及MMP-9水平及临床意义

摘要 目的：探讨不同中枢神经系统感染患儿血清和脑脊液中炎症标记物及基质金属蛋白酶9（Matrix metallo protein 9,MMP-9）的水平及临床意义。方法：选取本院2017年8月至2018年6月收治的198例脑膜炎儿童患者分为感染组,根据不同患病原因分成化脓性脑膜炎（Purulent Meningitis, PM=107例）和病毒性脑膜炎（Viral Meningitis, VM=91例）,另选取同期58例体检健康儿童作为对照组（Normal Control, NC=58例）。采用双抗夹心免疫荧光发光法检测患者血清和脑脊液（Cerebrospinal fluid,CF）中降钙素原（Prcoalcitonin,PCT）水平;采用免疫荧光分析仪检测患者血清和脑脊液内C反应蛋白（C-reactionprotein,CRP）水平;酶联免疫吸附实验（ELISA）检测三组患儿治疗前后血清和脑脊肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α, TNF-α)及MMP-9表达水平;电化学发光全自动免疫分析仪分析血清白蛋白和脑脊液白蛋白含量,并计算白蛋白指数。结果：与对照组相比,化脑组和病脑组患儿血清和脑脊液中CRP、PCT、TNF-α及MMP-9水平均明显增高（P<0.05）,化脑组患儿血清和脑脊液中CRP、PCT、TNF-α及MMP-9水平显著高于病脑组（P<0.05）。与对照组相比,化脑组患儿治疗前、治疗72小时和治疗1周后血清和脑脊液PCT水平降低（P<0.05）,与对照组相比,病脑组患儿治疗前后血清和脑脊液PCT水平表达差异无统计学意义（P>0.05）;化脑组和病脑组患儿脑脊液中CRP、PCT、TNF-α及MMP-9水平与患儿白蛋白指数均呈正相关。结论：血清和脑脊液炎症标记物及MMP-9变化可对化脓性脑膜炎和病毒性脑膜炎进行初步的鉴别。     

三种方案治疗小儿重症肺炎的临床效果及安全性比较

目的:比较三种方案治疗小儿重症肺炎的临床效果及安全性。方法:选取我院于2012年1月~2016年1月收治的120例重症肺炎患儿,按照不同的治疗方法随机分为观察组1(多巴胺联合多巴酚丁胺)42例,观察组2(多巴胺联合酚妥拉明)40例及对照组38例。比较三组患者临床疗效及炎症因子水平的变化。结果:观察组1的总有效率为90.48%,观察组2的总有效率为87.5%,均显著高于对照组的总有效率(63.16%)。观察组(1、2)的肺啰音消失时间、咳嗽症状消失时间、呼吸困难改善时间、退热时间以及住院天数均显著短于对照组(p0.05)。治疗后,三组患者的血清白介素6(IL-6)、白介素8(IL-8)、C反应蛋白(CRP)以及肿瘤坏死因子(TNF-α)的水平与治疗前相比均显著降低,差异均具有统计学意义(p0.05),且观察组患者以上指标的水平均显著低于对照组(p0.05)。结论:多巴胺联合多巴酚丁胺和多巴胺联合酚妥拉明治疗小儿重症肺炎的疗效和安全性相当,二者均明显优于常规治疗。     

pGEM-8Hepc克隆载体的构建与序列分析

hepcidin是一种由肝脏合成的富含半胱氨酸的小分子肽,它的主要生物学功能是维持机体铁稳态,并且具有抗菌活性.本实验从大鼠肝脏组织克隆出hepcidin基因,用同尾酶法构建多拷贝串联基因克隆载体pGEM-nHepc(n=1,2,4,8)(单个hepcidin基因之间用一段连接肽的DNA连接),分别含有不同拷贝首尾串连的hepcidin cDNA,并在大肠杆菌DH5 α中扩增.重组体经双酶切和PCR鉴定后进行序列测定,所得结果与genbank中的大鼠序列比对,结果完全正确,为后续进一步的表达纯化奠定了基础.     

大肠杆菌甘露糖异构酶(MI)基因克隆及功能研究

甘露糖异构酶(EC 5.3.1.7,Mannose isomerase,简称MI)能够催化果糖和甘露糖之间的异构转化.甘露糖加氢催化形成甘露醇,因此甘露糖异构酶的研究为工业生产甘露糖和甘露醇提供了新的可能途径.本研究以Escherichia coli JM109基因组DNA为模板,PCR扩增mi基因.结果表明,所克隆的mi基因与E.coli str.K-12 substr.MG1655的MI基因序列一致性为99.9%,氨基酸序列一致性为99%.该基因能够在E.coli BL21(DE3)中进行高效诱导表达,诱导出51.4 kD的特异性融合蛋白.酶学研究表明,该酶最适反应温度为37℃,最适pH为7.5,甘露糖为最佳反应底物,反应平衡时果糖与甘露糖的比值约为2.7.