四株昭通乌天麻共生蜜环菌的生理生化特征及其分子鉴定

目的对4株昭通乌天麻(Gastrodia elata)共生蜜环菌(Armillaria mella)的生理生化活性进行研究,并鉴定其分类地位。方法通过测定不同碳源和氮源对蜜环菌生长以及胞外酶活性的影响,掌握该蜜环菌生理生化特性,再结合rDNA-IGS序列分析方法进行鉴定。结果不同蜜环菌需要不同的碳源、氮源。3种胞外酶中木聚糖酶活性最大,其次是羧甲基纤维素酶,漆酶活性最小。供试蜜环菌与云南、贵州地区天麻共生蜜环菌以及猪苓共生蜜环菌的亲缘关系比较远。结论蜜环菌能否作为天麻共生菌与其分类地位无关。     

不同蜜环菌菌株对乌天麻产量的影响

用不同的蜜环菌(Amillaria mellea)菌株与长白山乌天麻(Gastrodia elata)进行伴栽试验,以探索不同蜜环菌菌株对乌天麻产量的影响。结果表明:不同蜜环菌菌株对乌天麻产量的影响不同,其中菌株Ar-4能显著提高天麻产量,仿野生栽培和室外箱栽试验均表现出良好的伴栽效果。     

海拔对乌红杂交天麻产量与品质的影响及其酶学作用机制

蜜环菌生物种和天麻的共生关系是二者侵染-消化系统相互作用的结果,受到温度等环境因子的调节。为揭示海拔对天麻产量及品质的影响,以及温度升高影响蜜环菌生物种-天麻共生关系的作用机制。该研究通过测定不同海拔栽培天麻的产量、主要药用成分天麻素和对羟基苯甲醇的含量;在室内对天麻共生体进行升温处理,测定天麻组织液几丁质酶、β-1,3-葡聚糖酶、苯丙氨酸解氨酶与多酚氧化酶的活性变化,及天麻组织提取液对蜜环菌菌丝体的抑制效应。结果显示:(1)海拔对乌红杂交天麻的产量和有效药用成分存在显著影响,在1 600 m产量最高,且杂交天麻在海拔1 600 m有效成分含量最高。(2)温度显著影响天麻组织的抑菌系统,且天麻的消化酶及防御酶系统对其的响应具有差异性,具体表现为低温状况下天麻的消化酶系统活性增强,高温时防御酶系统活性提升。(3)温度升高导致天麻组织液对蜜环菌菌丝体的抑制效果显著下降,天麻活体中可能存在促进蜜环菌生长的热失活因子。研究表明,天麻种植区海拔下降引起的温度升高可能削弱天麻消化和抑制蜜环菌的能力,从而破坏天麻-蜜环菌的共生平衡。该研究对于揭示蜜环菌-天麻的共生机制具有重要科学价值,并对天麻栽培的区划具有实际指导意义。     

天麻的第二营养来源研究

用同位素32P、15N、86Rb标记技术,证实天麻除必需由蜜环菌获得营养外,还能从土壤养分中得到补充营养,可称为第二营养来源。土壤养分(肥料)可通过蜜环菌或天麻表皮进入天麻体内(参与天麻代谢生理活动),可能影响天麻和蜜环菌的关系和天麻生长,因此研究天麻施肥技术和对产量、质量的影响是很有意义的。     

蜜环菌和天麻共生营养关系的放射性自显影研究

本文利用3H-葡萄糖以打孔浇灌法标记天麻。用标记的天麻伴栽蜜环菌,追踪标记化合物是否存在蜜环菌中。显微放射自显影的结果表明：天麻自身能吸收标记物,同化的标记物其长距离运输靠天麻的纵向维管组织进行。天麻表皮外的蜜环菌菌索的光镜、电镜自显影显示,蜜环菌能从天麻中获取营养,蜜环菌和天麻之间存在营养物质的相互交流,菌麻之间存在着特殊的共生关系。     

蜜环菌和天麻共生营养关系的放射性自显影研究

本文利用＾３Ｈ－葡萄糖以打孔浇灌法标记天麻。用标记的天麻伴栽蜜环菌,追踪标记化合物是否存在蜜环菌中。显微放射自显影的结果表明：天麻自身能吸收标记物,同化的标记物其生距离运输靠天麻的纵向维管组织进行。天麻表皮外的蜜环菌菌索的光镜、电镜自显影显示,蜜环菌能从天麻中获取营养,蜜环菌和天麻之间存在营养物质的相互交流,菌麻之间存在着特殊的共生关系。     

猪苓与天麻共生蜜环菌类群的比较

猪苓和天麻都是传统中草药,具有很高的药用价值。它们的生长都离不开蜜环菌,蜜环菌可以为其生长提供营养。对于猪苓和天麻共生的蜜环菌种类是否有一定的异同,目前尚未有相应的报道。本研究在前期完成的从全国11个省份收集野生猪苓菌核,分离得到47株蜜环菌以及ITS、β-tubulin和elongation factor-1 alpha 3种序列的基础上,与文献报道的天麻共生蜜环菌的序列进行比较,并构建系统发育树,结果显示猪苓和天麻共生的蜜环菌共分为10个clade,其中和猪苓共生的蜜环菌有6个clade,和天麻共生的蜜环菌有7个clade,有3个clade的蜜环菌既可以和天麻共生,也可和猪苓共生。在这3个共同类群中,菌株来自于陕西、山西、吉林、黑龙江、贵州、甘肃、四川几个省份。西藏、云南等地的蜜环菌则具有较高的专一性。本研究从系统发育角度明确了猪苓和天麻共生蜜环菌的异同,该结果可为猪苓和天麻栽培过程中蜜环菌种类的选择提供一定的理论依据。     

蜜环菌胞外多糖的发酵条件研究

蜜环菌是天麻的共生菌 ,有研究证明 ,蜜环菌的菌丝及发酵液有与天麻相类似的药理作用 ,为此 ,我们进行了蜜环菌深层发酵产胞外多糖条件的研究。研究结果表明 :菌丝生长和多糖产生的最适初始pH为 5.0左右 ;消泡剂用量在一定范围内增加 ,有利于菌丝的生长 ,但增加消泡剂用量会不利于多糖的产生 ;接种量大 ,菌丝得率高 ,但接种量为1 0 %时的多糖得率最高 ;装液量试验证明 ,通气量大 ,有利于菌丝的生长和多糖的产生 ;机械搅拌对菌丝的生长和多糖的产生都不利 ;生长动态试验证明 ,蜜环菌可在 6d内完成液体     

北方蜜环菌菌索生长、发育对环境氧气及土壤湿度的响应

蜜环菌属Armillaria spp.真菌是重要的植物病原菌和兰科Orchidaceae植物天麻Gastrodia elata的专性共生菌,能以菌索形式在土壤中存活和传播,因此,土壤环境变化对蜜环菌菌索生长、发育的影响,是关系天麻栽培和森林蜜环菌病害的重要过程。为了揭示蜜环菌生长发育对土壤水分和氧气的适应特征,本研究以北方蜜环菌Armillaria borealis为研究材料,设计氧气浓度5%、15%、20%和30%的4个水平与土壤湿度20%、40%、60%和80%的双因素实验,在室内24 ℃及黑暗条件下培养,观察菌索发生时间(T)、测定菌索生物量(DW)、菌索长度(L)、菌索数(Nt)、菌索分枝数(Nf)和菌索直径(AD)。结果表明,土壤湿度和氧气浓度对北方蜜环菌菌索发育和生长具有显著影响,在15%的氧气浓度和60%的土壤湿度发育最快。本研究为人工模拟蜜环菌生长发育的环境提供了部分依据,对提高天麻人工栽培的产量,揭示森林蜜环菌病害发病机制具有重要价值。     

天麻生活史

天麻Gastrodia elata Blume的生活史系指天麻种子由萌发到下代种子成熟生长变化的全过程。由于天麻奇特的营养型,在其整个生长发育过程中与蜜环菌Armillariellamellea(Vahl.ex Fr.)Karst.的关系至今人们在认识上还存在着很大的分歧。日本人草野俊助1911年在“天麻及其与蜜环菌共生关系”一文中提到“对(天麻)种子发芽及幼苗成长,至今还一无所知。”此后很长时间,天麻种子发芽情况一直未见有人报道过;因而也无从获得对天麻生长发育全过程的全部认识。     

天麻栽培用蜜环菌的遗传多样性、生长和水解酶

蜜环菌Armillaria是一种广泛分布的担子菌,是栽培中药天麻所必须的共生菌。为揭示我国天麻栽培用和鄂西地区部分野生蜜环菌资源的遗传多样性和生物学特性,本文收集了9个省市EF-1-α的19个蜜环菌商品菌株和鄂西地区20株野生蜜环菌菌株,以IGS、ITS和elongation factor-1-alpha（EF-1-α）为分子标记对这些菌株进行系统发育与遗传多样性分析,并对影响与天麻共生的生物学特性（菌索发育和胞外水解酶活性）进行对比研究。结果表明,这19株蜜环菌商品菌株分别归属于2个clade。其中,有18个菌株聚在cladeⅢ,说明不同来源的蜜环菌商品菌株之间系统发育关系很近;通过对蜜环菌的系统发育、菌索生长以及胞外水解酶活性的研究,总体上商品种优于鄂西的野生蜜环菌生物种。从鄂西野生蜜环菌中筛选出4个具有潜在栽培价值的菌株。本研究为天麻栽培生产中蜜环菌菌种的选择提供参考。     

天麻矿物质吸收及其营养机理探讨

探讨了天麻吸收矿物质过程和天麻的营养机理。研究蜜环菌在天麻的金属元素、非金属元素吸收中起的作用, 阐明天麻的有机营养吸收过程。提出了天麻吸收非金属元素的两个途径,分析了天麻吸收金属元素的“泵”的作用机理。指出了天麻蜜环菌之间的游离氨基酸特别是天冬氨酸和谷氨酸的交流是天麻和蜜环菌生长发育的关键。     

人工种植天麻的影响因子优化研究

天麻是一种名贵的中草药,可用于治疗多种疾病。自然条件下,天麻通过与真菌蜜环菌的共生从腐木获取营养进行生长。为了对人工大规模种植天麻的影响因子进行优化研究,利用正交设计方法,在昭通小草坝地区开展了一个样本量较大的种植实验。在测试的4种因子中,接种蜜环菌对种植天麻影响最大：其次,在露天灌木丛地种植的天麻产量明显高于在林地下的种植。此外,开展了12个树种对蜜环菌生长以及天麻种植的影响研究。结果发现十齿花（Dipentodonsinicus）对蜜环菌的生长最好,同时,也在天麻种植实验中有最高的产量;然而,添加磷、钾元素并不提高天麻的产量。     

不同蜜环菌菌株对红天麻农艺性状、产量及质量的影响

为研究不同蜜环菌菌株对菌材的侵染情况以及对红天麻主要农艺性状、产量及有效成分含量的影响,筛选适宜黔西北地区天麻生长的野生蜜环菌菌株。采用不同蜜环菌菌株培养菌材,并与红天麻伴栽,观察记录不同蜜环菌栽培种对青冈菌材的侵染情况以及不同处理红天麻的农艺性状,检测天麻的有效成分含量。不同蜜环菌栽培种对青冈菌材的侵染情况不同,对红天麻农艺性状、产量及质量的影响也不同。其中菌株MHJ-1满袋时间最短、上菌速度最快,对菌材的侵染效果最好,且能显著提高红天麻产量,每平方米鲜天麻平均产量为（8.78±0.38）kg,比对照菌株提高5%;其伴栽的天麻醇溶性浸出物含量、天麻素含量、天麻素与对羟基苯甲醇总含量均最高,分别为（29.24±0.43）%、（0.946±0.012）%、（1.140±0.009）%,且极显著高于对照菌株,仿野生栽培试验表现出良好的伴栽效果。结果表明菌株 MHJ-1与红天麻的伴栽效果最好,适宜用于黔西北地区红天麻种植。     

一种简便的蜜环菌分离法

一种简便的蜜环菌分离法张玉方（四川省药物种植研究所,南川６４８４０８）蜜环菌（ＡｒｍｉｌｌａｒｉａｍｅｌｌｅａＱｕｅｌ）既是一种美味的食用菌,又是贵重药材天麻和猪苓赖以生长的供养菌￣［１,４］。蜜环菌的分离可用其子实体、菌索和染菌天麻作为分离材料。一...     

天麻与蜜环菌的关系

天麻(Gastrodia elata Bl.)除开花结实期外,蜜环菌对天麻幼苗的形成、营养器官的更新以及营养生长转向生殖生长,都起决定性的作用。块茎潜伏芽的萌动及其后的发育程度也完全由蜜环菌的侵染部位和程度所决定,不存在内在的顺序性。观察了蜜环菌对天麻侵染的详细过程,并发现有正常生理侵染和病理侵染两种状况。病理侵染的突出表现是入侵的菌索可冲破消化层而瓦解深层的组织,致使新生块茎生长不良。不仅块茎可以同化蜜环菌,营养茎也起同化蜜环菌的作用。幼苗期营养茎是唯一的同化器官;以后的营养生长期,它仍占重要地位;只是进入生殖生长期以后,营养茎才居于次要地位。正生长的块茎不能同化蜜环菌,只有经过越冬以后才能执行同化器官的作用。     

蜜环菌培养物代天麻研究成果鉴定会

天麻又名赤箭,系兰科多年生草本植物。药用其地下块茎,为常用中药之一。中医用于治疗风虚眩晕头痛,四肢拘挛,小儿风(?)惊,瘫痪不遂。根据天麻生长依赖于蜜环菌存在的事实,说明天麻的药用有效部分可能与蜜环菌有关,又根据一般真菌类可以进行液体培养的特点,我所科研人员,设想以     

天麻人工栽培技术的改进

天麻是名贵的中药材,近几年人工栽培发展较快,但在生产过程中,也遇到了一些实际问题,例如:由于“菌柴”笨重,运输不方便;人工栽培天麻容易腐烂等,故发展受到一定的限制。天麻(Gastrodia elata)是无根无绿叶的植物,它的块茎生长在地下,与蜜环菌共生,依靠蜜环菌来提供营养。老的栽培方法是将引进的“菌柴”按照一根新柴,一根“菌柴”依次排放在地窖里,然后放上“米麻”。(无商品价值的小块茎,形似花生米,)用这种方法栽培天麻,“菌柴”的用量很大。故不能大力发展。现介绍一种新方法:先将霜降(一定要霜降)以后砍伐的阔叶落叶树,(冬天     

珍稀食药用菌——蜜环菌的开发与应用

蜜环菌是一种与传统中药天麻共生的药用真菌,其子实体、菌丝和菌索都可以入药,具有很高的研究开发价值,目前蜜环菌因具有极高的营养保健功能而倍受关注,国内外市场均有销售由蜜环菌及其多糖等提取物制成的药品和保健品。通过综述了蜜环菌的生物学特性、营养化学成分和药理作用的研究情况,并介绍了几种蜜环菌产品的制作方法和保健功能,旨在为蜜环菌的深入研究提供依据,并促进蜜环菌新型保健品或药品的开发,以满足国内外市场的需求。     

天麻的营养繁殖茎及其抑菌功能

天麻9Gastrodia elata Bl.）与蜜环菌（Armillaria mellea (Vahl.ex Fr.)Quel.)营共生生活,在正常情况下蜜环菌只侵染种麻及分化生长出的营养繁殖茎的表皮、皮层及大型细胞层。种麻的大型细胞层及营养繁殖茎隔离区的空腔细胞层和木栓细胞层,都是种麻与新生麻的防御结构,它们保护新生麻不遭蜜环菌病理侵染而正常生长。冬季,天麻进入冬期,隔离区的木栓细胞层形成断裂层,此层细胞是新生麻能够安全越冬的最后一道防御结构。