亚稀褶黑菇和稀褶黑菇的ITS序列分析

对亚稀褶黑菇和稀褶黑菇的ITS全序列进行了测定和比较,首次报道了亚稀褶黑菇的ITS1和5.8S区域。在ITS区域中,不同采集地的亚稀褶黑菇与稀褶黑菇的5.8S rDNA具有100%的同源性,而两侧ITS之间表现出种内和种间的多态性,种内的差异均不超过5%,种间的差异达10%左右。ITS序列分析方法可以作为两者的鉴定方法。     

亚稀褶黑菇和稀褶黑菇的ITS序列分析

对亚稀褶黑菇和稀褶黑菇的ITS全序列进行了测定和比较,首次报道了亚稀褶黑菇的ITS1和5.8S区域.在ITS区域中,不同采集地的亚稀褶黑菇与稀褶黑菇的5.8S rDNA具有100%的同源性,而两侧ITS之间表现出种内和种间的多态性,种内的差异均不超过5%,种间的差异达10%左右.ITS序列分析方法可以作为两者的鉴定方法.     

亚稀褶黑菇对小白鼠肝肾超微结构的影响

对小白鼠用亚稀褶黑菇提取液进行毒性试验．测定了亚稀褶黑菇的半致死剂量LD50值;应用透射电镜观察了小白鼠亚稀褶黑菇中毒后的病理变化,结果表明．亚稀褶黑菇的LD50值为2852．1mg／kg,电镜检查发现。亚稀褶黑菇毒素主要损害肾脏,引起肾细胞核核膜肿胀．线粒体肿胀,溶酶体增多,肾细胞坏死．     

亚稀褶黑菇提取液诱导小白鼠肝肾细胞凋亡

采用琼脂糖凝胶电泳技术研究亚稀褶黑菇提取液诱导小打手势习肝肾细胞凋亡。结果显示,小白鼠亚稀褶黑菇抽提液中毒后,肝肾细胞DNA经琼脂糖凝胶电泳出现180－200bp整数倍的DNA梯形带,19.0-28.5g/L范围内,亚稀褶黑菇提取液诱导肝肾细胞凋亡表现出和剂量依赖性,结果表明,亚稀褶黑菇提取液能诱导小白鼠肝肾细胞凋亡。亚稀褶黑菇提取液诱导肝肾细胞凋亡是亚稀褶黑菇中毒后机体病变死亡的重要表现形式之一。     

亚稀褶黑菇中毒的临床表现和中毒机理探讨

本文通过对湖南省茶陵县亚稀褶黑菇中毒事件的调查,获得了尽的临床资料,并通过分析中毒病人的临床表现,首次探讨了亚稀褶黑菇的中毒机理, 结果表明,亚稀褶黑姑毒素作为一种外界信号分子与细胞膜受体结合,引起细胞内Ｃa^2 浓度上升,通过一系列生理生化反应过程,导致细胞死亡。     

亚稀褶黑菇的化学成分

从剧毒蘑菇─亚稀褶黑菇(Russula subnigricans Hongo)子实体中分离出5个已知化合物,经波谱分析鉴定为4个麦角甾醇(22E,24R)-ergosta-7,22-diene-3β,5α,6α,9α-tetraol(1)、(22E,24R)-ergosta-7,22-dien-3β,5α,9α-trihydroxy-6-one(2)、(22E,24R)-ergosta-7,22-dien-3β,5α,6β-triol(3)、(22E,24R)-5α,8α-epidioxyergosta-6,22-dien-3β-ol(4)和神经酰胺(2S,3S,4R,2′R)-2-(2′-hydroxytetracosanoylamino)octadecane-1,3,4-triol(5)。     

亚稀褶黑菇菌丝体最适培养基的正交试验研究

以四因素三水平的正交试验设计培养条件,pH5．6,26．2℃,45d,对亚稀褶黑菇茵丝体进行固体培养。通过对菌丝体直径的测定及分析,得到该菌种生长最适培养基配方为：(NH4)2HPO4 1g／1000mL,甘露糖15g/1000mh,KH2PO4,0．5g／1000mL;维生素B1 100μg/1000mL,并证明氮源为其生长的最重要营养因素。     

基于Taqman-MGB探针的亚稀褶红菇实时荧光定量PCR检测方法

本研究建立了一种基于Taqman-MGB探针的亚稀褶红菇Russula subnigricans实时荧光定量PCR检测方法。根据亚稀褶红菇与其近似种的内转录间隔区（internal transcribed spacers,ITS）序列差异,设计合成1对引物和1条特异性Taqman-MGB探针,并用常见有毒红菇种类进行验证。结果显示,引物特异性良好,仅亚稀褶红菇出现荧光信号,完成整个检测过程只需2h。该法能够为毒蘑菇中毒的快速检测提供技术支持。     

裸盖菇和斑褶菇属真菌菌种的有效分离方法

【目的】探讨获取裸盖菇属及斑褶菇属真菌纯培养的有效分离方法。【方法】采用菌褶接种法和孢子弹射法进行分离,以形态鉴定为基础,通过ITS区测序并与DNA序列库中已知序列进行比对的分子鉴定方法鉴别分离培养物的真伪,以确定分离方法的可靠性。【结果】对采自云南的28个裸盖菇属和斑褶菇属菌株进行了分离,菌褶接种法有24个菌株分离纯化成功,成功率达86%,而孢子弹射法仅有7个菌株分离成功,成功率为25%。【结论】菌褶接种法对于裸盖菇属和斑褶菇属真菌是一种有效而简便易行的分离方法,该法利用菌褶为产孢组织的优势,无需对菌褶进行表面消毒,易于纯化成功,值得在其他类似的腐生小型薄盖伞菌类群的分离中尝试应用。     

亚稀褶红菇对SD大鼠肾功能的影响

以SD大鼠为研究对象,用霍恩氏法(Horn法)计算亚稀褶红菇的半数致死剂量(LD₅₀),测定亚稀褶红菇对大鼠尿素氮(BUN)、肌酐(CREA)、钾(K)、钠(Na)、氯(Cl)、白细胞(WBC)计数及分类、尿蛋白、尿糖和潜血水平的影响,并对左侧肾脏进行病理学观察。亚稀褶红菇对雌性SD大鼠的LD₅₀及95%可信区间(95%CI)为271 (169–441) mg/kg,雄性SD大鼠的LD₅₀及95%CI为233 (143–378) mg/kg;与对照组比,各亚稀褶红菇组SD大鼠BUN、CREA、K、WBC计数、中性粒细胞比例、尿蛋白、尿糖和潜血的发生率及严重程度均增加;各亚稀褶红菇组SD大鼠Na和Cl均降低;各亚稀褶红菇组大鼠SD肾小管坏死,表现为上皮细胞空泡变性和水样变性,刷状缘消失,管腔内可见脱落的上皮细胞;且随着亚稀褶红菇剂量的增加,各指标变化更显著。亚稀褶红菇可导致SD大鼠肾损伤,并呈剂量反应关系。     

帘蛤科贝类rDNA内转录间隔区序列的研究

根据18SrDNA、5．8SrDNA和28SrDNA保守序列设计引物,应用聚合酶链式反应（PCR）扩增了文蛤（Meretrix meretrix L．）、青蛤（Cyclina sinensis G）、硬壳蛤（Mercenaria mercenaria L．）和江户布目蛤（Protothaca jedoensis L．）4种帘蛤科贝类的第一内转录间隔区（ITS1）和第二内转录间隔区（ITS2）序列,并进行了测序。结果表明,文蛤、青蛤、硬壳蛤和江户布目蛤的ITS1扩增产物大小分别为978bp、663bp、757bp和942bp,GC含量分别为61．55％、60．78％、62．48％和64．86％～64．97％,其中ITS1序列长度分别为900bp、585bp、679bp和864bp,是迄今已报道双壳贝类中变化范围最大的,GC含量分别为61．67％、61．03％、63．03％和65．51％～65．62％,江户布目蛤种内ITS1序列有个体差异;ITS2扩增产物大小分别为644bp、618～620bp、593bp和513～514bp,GC含量分别为61．18％、61．29％～61．81％、62．73％和61．48％61．60％,其中ITS2序列长度分别为412bp、386～388bp、361bp和281～282bp,GC含量分别为65．29％、65．21％～66．06％、67．87％和67．38％～67．62％,青蛤和江户布目蛤种内ITS2序列有个体差异。4种蛤ITS1和ITS2序列种间差异很大,有明显的长度多态性,ITS2种间序列相似度73．0％～89．1％,与ITS1的种间序列相似度48．7％～81．5％相比略高。此外,在4种蛤ITS1和ITS2序列中各发现2个与rRNA加工有关的保守区。通过对ITS1和ITS2序列的组装获得了4种蛤5．8SrRNA基因完整序列,序列长度都是157bp,GC含量57．96％～58．60％,4种蛤5．8SrRNA基因相对保守,种间序列差异度0-6．0％,共有10个变异位点,其中转换4处,颠换6处,硬壳蛤和江户布目蛤5．8SrRNA基因序列完全相同。以ITS2序列（包含5．8SrRNA和28SrRNA基因部分序列）为标记,调用北极蛤科的Arctica islandica相应序列数据作外群,构建了帘蛤科贝类的系统发育树,其拓扑结构显示江户布目蛤与硬壳蛤亲缘关系最近,青蛤与其他3物种的亲缘关系最远。     

中国的球盖菇科(五) 广义斑褶菇属

通过观察吉林农业大学菌物研究所标本馆(HMJAU)、中国科学院微生物研究所菌物标本馆(HMAS)、广东微生物研究所标本馆(GDGM)及作者野外采集的共180份标本的宏观形态和微观结构,对中国球盖菇科的广义斑褶菇属及其所含的灰斑褶菇属(Copelandia Bres.)、疣孢斑褶菇属(Panaeolina Maire)和狭义斑褶菇属[Panaeolus(Fr.)Qul(s.str.)]进行了分类学研究,对中国分布的16个种进行了形态学描述、显微线条图绘制,并编写了分种检索表。其中,包括1个新组合:栗褶疣孢斑褶菇[Panaeolina castaneifolia(Murr.)Sarentoya et Tolgor];2个中国新记录种:热带灰斑褶菇[Copelandia tropicalis(Ola′h)SingerR.A.Weeks]、小型斑褶菇[Panaeolus alcidisM.M.Moser];12个省级新记录种:北京新记录种硬腿斑褶菇[Panaeolus solidipes(Peck)Sacc.],内蒙古新记录种硬腿斑褶菇[Panaeolus solidipes(Peck)Sacc.]、锐顶斑褶菇[Panaeolus acuminatus(Schaeff.)Qul.]、黑斑褶菇[Panaeolus ater(J.E.Lange)KhnerRomagn.]、紧缩斑褶菇[Panaeolus sphinctrinus(Fr.)Qul.]、红褐斑褶菇[Panaeolus subbalteatus(Berk.Broome)Sacc.],吉林省新记录种半卵圆斑褶菇[Panaeolus semiovatus(Sowerby)S.LundellNannf.]、栗褶疣孢斑褶菇[Panaeolina castaneifolia(Murrill)Bon],黑龙江新记录种红褐斑褶菇[Panaeolus subbalteatus(Berk.Broome)Sacc.],宁夏新记录种变蓝灰斑褶菇[Copelandiacyanescens(Berk.Broome)Singer]、锐顶斑褶菇[Panaeolus acuminatus(Schaeff.)Qul.],西藏新记录种红褐斑褶菇[Panaeolus subbalteatus(Berk.Broome)Sacc.]。     

疣孢斑褶菇属一新记录种——小孢疣孢斑褶菇

Panaeolina Maire, Meded. Proefstn W. Java, Kagok-tegal 15:109 [S閞.Bot.no.2] (1933) 疣孢斑褶菇属,模式种为:Panaeolina foenisecii (Pers.:Fr.) Maire。本属外观酷似Panaeolus,但斑褶菇属孢子光滑,本属孢子深紫褐色,孢子壁有明显疣状突起;也认为近似Psathrella,但本属菌褶明显花斑状。全球报道有6个种(Sathe & Daniel, 1980; Gerhardt,1996; Guzman et al ,2000),中国文献只报道了1种(臧穆等,1996)。本文报道该属的一个中国新记录种。 小孢疣孢斑褶菇 图1 Panaeolina microsperma Natarajan & Raman, Bibl. Mycol. 8…     

双孢斑褶菇菌丝体与子实体培养研究

双孢斑褶菇是一种著名的神经致幻菌物,菌丝体呈白色,具有明显的锁状联合。分类地位属于担子菌门,伞菌目,粪锈伞科。研究了C源、N源、C／N比、pH值、温度和培养料的料水比对该菌菌丝体生长的影响,及培养料的选择试验和出菇条件试验。菌丝体生长最佳的C源是淀粉、蔗糖、纤维素;酵母膏、硝酸钾、玉米粉和硝酸铵为最佳氮源;菌丝体生长对培养基碳氮比的适应比较广泛;适宜温度是5℃～35℃,最适为25℃～30℃：适宜的pH范围是4～13,最适为6．5～8．0;培养料适宜的含水量为45％～75％,最适为65％～70％。适合菌丝体和子实体生长的培养料为食用菌出菇废料、稻麦草、牛粪。子实体形成的温度是18℃～28℃,最适温度是20℃～25℃,空气相对湿度为70％～85％。子实体产量为0.1％～0.3％。     

裂褶菌培养、鉴定及氨基酸组成分析

目的:获得裂褶菌的纯培养物,鉴定培养菌丝,并分析子实体及菌丝氨基酸含量.方法:利用孢子分离法、组织分离法培养菌丝,扫描电镜观测其菌丝特征,结合ITS区序列分析,并利用出菇试验分析其菌丝体,全自动氨基酸分析仪分别测定裂褶菌子实体、菌丝体氨基酸组成.结果: 菌丝体ITS区序列与子实体完全一致,出菇试验亦表明裂褶菌菌丝体培养成功,子实体及菌丝体均含有丰富的氨基酸成分,两者氨基酸种类及含量相当,菌丝体总氨基酸含量14.01%,子实体总氨基酸含量15.59%,其中菌丝体必需氨基酸的含量(38.60%)比子实体稍高(37.95%).结论:裂褶菌菌丝亦具有丰富的营养价值,可作为重要的氨基酸来源及功能性食品.     

中国斑褶菇属一新记录种——双孢斑褶菇

斑褶菇属Panaeolus是世界著名的有毒担子菌,属蘑菇目(Agaricales)球盖菇科(Strophariacesa),迄今中国文献已经报道15种(贺新生,2001).本文报道我国该属的一个新记录种.     

绿褶托菇在我国首次发现

本文报道我国蘑菇科Agaricaceae的一个新记录种——绿褶托菇Clarkeinda trachodes (Berk.)Singer,该种所隶属的绿褶托菇属Clarkeinda O. Kuntze现知是个分布于热带亚洲的单型属。     

钟形斑褶菇的生理特性和子实体的培养研究

首次报道了钟形褶菇的苗种分离、菌丝体生理特性和栽培技术。钟形斑褶菇菌丝具有明显的锁状联合。菌丝生长适宜的温度是１０～４０℃,最适为２０～２５℃;适宜的ｐＨ范围是４．５～１３,最适为６～８．５;培养料适宜的含水量为４５％～７５％,最适为６５％～７０％;最佳的Ｃ源是：淀粉、蔗糖、纤维素;酵母粉、干酪素、硫酸铵、硝酸铵为最佳氮源。麦芽、麸皮、松针、干平菇、小麦、牛粪等天然材料的热水提取物对菌丝生长有利。子实体形成的温度范围为 ２０～３５℃,最适宜的温度范围应为２４～３０℃,正常的出菇季节为４～９月;最适宜的空气相对湿度应为７０％～８５％;子实体具有向光性、负向地性。栽培出菇的培养料为牛粪粉、草粉、麸皮及食用菌栽培的废料。瓶、袋栽均可,干物质生物学效率２％～５％。新鲜木屑、棉籽壳不适宜菌丝生长和出菇。说明该菌是草腐生菌物。子实体可直接在培养料上形成,出菇不需要覆刺激。     

黑鳞乳菇—乳菇属一新种

本文报道产自吉林省的乳菇属一新种：黑鳞乳菇。并根据Ｒ．Ｓｉｎｇｅｒ的系统将其置于红乳菇组之中。     

中国斑褶菇属——新记录种棗双孢斑褶菇

斑褶菇属Panaeolus是世界著名的有毒担子菌,属蘑菇目（Agaricales）球盖菇科（Strophariacesa）,迄今中国文献已经报道15种（贺新生,2001）。本文报道我国该属的一个新记录种。 双孢斑褶菇 图1 Panaeolus bisporus (Malen鏾n & Bertault ) Ew. Gerhardt, Bibliotheca Botanica 147:41,1996. Copelandia papilionacea (Bull.: Fr.) Qu閘. var. bispora Malen鏾n & Bertault (Gerhardt,1996). 菌盖白色,老时或受伤时变蓝色,直径2~4厘米,有时可达6厘米,近圆锥形、钟形至半球形,后平展,光滑,表面干,有时龟裂。菌肉白色…