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热稳定β-淀粉酶高产菌株选育及发酵条件研究 总被引:1,自引:0,他引:1
从土壤中分离得到一株高温放线菌V4菌株(Thermoactinomyces sp.v4),经测定能产生热稳定β-淀粉酶。V4菌株经过热诱变获得一株具高活力β-淀粉酶的变异株A61产酶活力从400u/ml提高到1000u/ml。A61菌株产生的β-淀粉酶最适反应温度为60℃,酶的热稳定性良好,50℃保温4小时不失活,55℃保温2小时仍具有最初活力的96%。 相似文献
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焦曲霉产木聚糖酶的研究* 总被引:2,自引:0,他引:2
从1144株真菌中筛选到一株产木聚糖酶活力较高的焦曲霉(Aspergillus ustus)。该菌株适宜的产酶条件为在4%麸皮液中添加0.5%葡萄糖,0.4%硝酸钠及0.1%氯化钠,30℃振荡培养6d,木聚糖酶活力可达2176 u/mL。酶反应的最适温度为55℃,最适pH为5.5,在pH5~8酶活力稳定。45℃保温1h,酶活力剩余35%。酶水解桦木木聚糖的Km值为4.3×10-3g/mL,Vmax值为4.9mg/(mL·min)。酶解产物以木三糖和木四糖为主,表明该酶是一种典型的内切糖苷酶。 相似文献
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从土壤中分离到两株产β-淀粉酶芽孢杆菌菌株,经紫外线、丫-射线,氯化锂、亚硝基胍等诱变和筛选,得到β-淀粉酶高产菌和耐热性β-淀粉酶产生菌各一株。将两菌进行原生质体融合,获得兼有两亲株遗传特性的融合子wg6。从菌落形态和产酶特性等证实此融合子系两亲株融台所得的杂交子代。W96菌株产酶能力介于两亲株之间,酶的热稳定性较高,60℃处理15min,酶活力仍达93.2%。此菌株还可产生少量茁霉多糖酶(一种支链淀粉酶).与所产生的β-淀粉酶协同作用,使淀粉水解率达到80.6%,因而有较高的应用价值。 相似文献
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多粘杆菌β-淀粉酶的产生及其性质的初步研究 总被引:1,自引:0,他引:1
多粘杆菌(Bacillus polymyxa) As1.546产β-淀粉酶的最适培养基成份(%)为:玉米粉4,豆饼粉2,酵母膏0.5,Na HPO4·12H2O 0.2,NaH2PO4·2H2O 0.03,MgSO4.7H2O 0.05,自然pH(7左右)。250毫升三角瓶装50毫升培养基,旋转式摇床(220转/分),温度为30a℃,培养时间为60小时,每毫升发酵液酶活力可达700单位。酶反应的最适温度为45℃,最适pH为6.5,水解可溶性淀粉生成麦芽糖可达96%。 相似文献
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高活力β-淀粉酶菌种的选育和发酵条件的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
产β一淀粉酶的腊状芽孢杆菌(Bacillus cereus)Asl.447,通过紫外线、亚硝基胍和利福平的反复处理诱变,获得一株具有高活力β-淀粉酶的变异菌株M一3,产酶活力从74u/ml提高到5000—7000u/ml。牛肉汁液体培养基成分为:每100ml牛肉汁中加人蛋白胨1g,可溶性淀粉1g,酵母膏0.5g,NaCl 0.5g pH6.0。该变异菌的最适培养条件是:pH6—6.5 30℃48小时。酶的最适反应条件是:温度40℃,pH7 0,pH稳定范围是6—9,酶的抗热性较差,对可溶性淀粉水解率达85%以上。 相似文献
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利用硫酸铵沉淀、羟基磷灰石柱层析、Sephadex G-75凝胶过滤和DEAE-52离子交换柱层析的方法,将枯草芽孢杆菌SA-22 β-甘露聚糖酶纯化了30.75倍,同时,该酶比活达到3478056 u/mg,收率达到23.43%。利用SDS-PAGE凝胶电泳和Sephadex G-75凝胶过滤的方法测得枯草芽孢杆菌SA-22 β-甘露聚糖酶的分子量分别为38 kD和34 kD。实验发现该酶的最适pH为6.5,在pH 5~10的范围内稳定;该酶最适温度为70℃,在50℃保温4h后其活力不变,在60℃保温4 h后剩余酶活为74.2%,70℃的酶活半衰期为3h。实验还发现Hg2+对酶活力有明显抑制作用。该酶对槐豆胶和魔芋胶的Km和Vmax值分别为11.30mg/mL, 4.76mg/mL和188.68(μmol·mL-1·min-1), 114.94(μmol·mL-1·min-1)。 相似文献
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从黑曲霉Aspergillus niger,发酵液中分离提纯了β-葡萄糖苷酶。提纯步骤通过(NH4)2SO4分级沉淀,DEAE-Sephadex A-50和Sephadex G-100等三步纯化,得到凝胶电泳均一的β-葡萄糖苷酶。该酶的最适pH4.5,最适温度60℃,Km为0.44(pNPG),并有较好的热稳定性。用SDS-凝胶电泳法和凝胶色谱法测得该酶的分子量为120 000。 相似文献
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乳酸克鲁维酵母β-半乳糖苷酶的分离纯化及性质研究 总被引:6,自引:0,他引:6
乳酸克鲁维酵母(Kluyveromyces lactis)经高压破壁后的粗提液,其β-半乳糖苷酶(E.C.3.2.1.23)比活力为5.56u/mg。经硫酸铵沉淀,丙酮沉淀,PAPMA—Sepharose 4B柱层析后,乳糖酶比活力达370u/mg,纯化了66.2倍,SDS—PAGE鉴定为一条带,分子量85000Da。酶作用的最适pH在6.4—6.8之间,最适温度40℃,50℃保温15min酶活丧失90%。以邻硝基苯一β一半乳糖苷(ONPG)为底物的米氏常数为2.78mmoI/L。酶的正常水解产物半乳糖对酶活力有一定的抑制作用,核糖强烈抑制酶活力,Fe2+、Zn2+、Cu2+、Ag+、PCMB和NBS都能使酶活丧失。Mg2+、Mn2+和还原剂巯基乙醇的存在能提高酶活力。 相似文献
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蜜环菌胞外漆酶的合成、纯化及性质研究 总被引:9,自引:0,他引:9
研究了蜜环菌胞外漆酶合成条件和酶学性质。实验表明,培养基初始pH5.5、培养温度25℃有利于菌株产酶;与麦芽糖、山梨糖和半乳糖相比,纤维二糖和棉子糖作为碳源时漆酶产量更高;有机氮源比无机氮源有利于漆酶合成。泥炭提取液可显著诱导漆酶生成,当其含量为50%时,菌株漆酶最高产量是对照组的7倍。在蜜环菌发酵上清液中检测到3个漆酶同功酶组分,其主要活性(约占75%)组份漆酶A经 (NH4)2SO4沉淀、制备级PAGE电泳和阴离子交换柱层析被分离纯化至电泳均一,SDSPAGE法测得酶亚基分子量59kD,凝胶过滤色谱法测定活性酶分子量58kD。纯化的漆酶A等电点pI为4.0,氧化愈创木酚的最适反应pH为5.6,最适温度为60℃,在60℃和65℃时半衰期分别为45min和36.8min,在pH5.2~7.2范围内稳定性较好。100mmol/L Cl-对该酶有显著抑制作用,1mmol/L SO2-4 对漆酶有激活作用,1mmol/L NaN3可完全抑制酶活性,10 mmol/L EDTA对漆酶活没有明显影响,1mmol/L Cu2+对漆酶有激活作用。以愈创木酚为底物时,测得酶的Km=1.026mmol/L,Vmax=5μmol/(min·mg);以ABTS为底物时,测得其Km=0.22mmol/L,Vmax=69μmol/(min·mg)。 相似文献
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青霉NXP25纤维素酶的产生及性质 总被引:4,自引:0,他引:4
青霉(Penicillium sp.)NXP25在5%玉米穗轴粉,3%(麦夫),0.35%氮源10号和0.3%氯化钙组成的液体培养基(起始pH 5.0)中,10%接种量,29℃,280r/min振荡培养72h。在50℃温度下测定,发酵液内切-1,4-β-葡聚糖酶,外切-1,4-β-葡聚糖酶,β-葡糖苷酶和滤纸酶活力分别为841u/mL,13u/mL,24u/mL和46u/mL。各类型酶最适作用条件分别为pH4.8和60℃、pH5.0和50℃、pH4. 相似文献
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筛选了真菌、细菌和放线菌共1121株,其中有β-HexNAcasc活力的有237株,在所筛选菌中只要有β—GlcNAcase活力,也就有β-GalNAcase活力,但两酶比值(β-GlcNAcase/β—Gal-Nacase)不同。所筛选出的溜曲霉(ASP.tamarii)S215为由土壤中分离的,其产酶最适条件为5%麸皮液体培养基,28—30℃振荡培养5—6天,补充碳源如纤维二糖、葡萄糖胺、半乳糖胺或者补充氮源(NH4)2SO4及NH4NO3,可以稍稍提高酶活。在溜曲霉的培养液中除β-GlcNAcase及β-GalNAcase外,还有a-半乳糖苷酶、β一半乳糖苷酶、β-葡萄糖苷酶、β-岩藻糖苷酶及α-甘露糖苷酶。 相似文献
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产气气杆菌10016异淀粉酶的研究 总被引:5,自引:0,他引:5
江西食品发酵工业科学研究所 《微生物学报》1976,16(4)
筛选出1株产异淀粉酶活力较高的产气气杆菌(Aerobucter aerogeues)10016。摇瓶试验表明较合适的培养基组成(%)为:甘薯淀粉(D.E.约10%)1,豆饼粉1,CH,COONH.0.8,MgSO4 7H2O 0.05, K2HPO4 3H2O 0.05,KCl 0.05,FeSO4·7H2O 0.005。30℃发酵4天。在500升罐发酵中通气量要求较低,酶活力可稳定在500单位/毫升以上。该酶作用的最适pH为5.6—7.2,pH5以下不稳定,酶作用最适温度为45一50℃,50℃以上不稳定,在55—60℃间活力急剧下降。受Ca++、Mg++的激活,受Fc+++、Al+++、Hg++、Cu++ 强烈抑制。与β-淀粉酶协同作用可增加β-淀粉酶酶解程度,应用于饴糖生产能增加麦芽糖含量,降低糊精含量和提高熬制温度;应用于啤酒生产的添加酶糖化过程能略微提高还原糖含量和提高发酵度5%。 相似文献
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从土壤中分离得到一株高温放线菌V_4菌株(Thermoactinomyces sp.V_4),经测定能产生热稳定β-淀粉酶。V_4菌株经过热诱变获得一株具高活力β-淀粉酶的变异株A_(61),产酶活力从400u/ml提高到1000u/ml。A_(61)菌株产生的β-淀粉酶最适反应温度为60℃,酶的热稳定性良好,50℃保温4小时不失活,55℃保温2小时仍具有最初活力的96%。 相似文献
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白腐菌Phanerochaeta chrysosporium MIG. 383降解桉木时具有显著的选择性,30天内降解37.23%Klason木素,7.29%综纤维素。该菌株产胞外锰过氧化物酶,并在高碳低氧培养基中显示较高酶活。静置液体培养的优化培养条件是(L-1):10g葡萄糖,2mmol酒石酸铵,10mmol pH4.5醋酸钠缓冲液,1g吐温80,2gK2PO4,0.5g MgSO4·7H2O,0.1g CaCl2·2H2O,lmg VB1,70ml微量元素混合液:最适产酶温度是37℃。上述条件下,该菌接种后静置培养4天,产锰过氧化物酶活达1840U/L,酶作用最适温度是37℃,最适DH是3.5。 相似文献