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3—脱氧铺糖松代谢酶产生菌的筛选及产酶条件 总被引:2,自引:2,他引:0
从霉菌和酵母中筛选到一株酵母,该菌株具有能够代谢3-脱氧葡糖松的酶,且活性较高,研究了该菌株的最适产酶条件:培养温度28℃,培养基起的PH7.0,培养时间12h,氮源分别为蔗糖,牛肉膏、添加KH2PO4、Ca(H2PO4)2,H2O能促进产酶。 相似文献
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细菌3-脱氧葡糖醛酮代谢酶的纯化及性质研究 总被引:7,自引:0,他引:7
细菌Bacillus sp.2粗酶液通过(NH4)2SO4分级分离、Q Sepharose FF、Sephadex G-100(Ⅰ)、Hydroxyapatite和Sephadex G-100(Ⅱ)柱层析分离,纯化了一种以NADPH为辅酶的3-脱氧葡糖醛酮(3-DG)代谢酶,定性为2-羰基醛还原酶.纯化酶的比活力为63.75 U/mg,在SDS-聚丙烯酰胺凝胶上显示一条蛋白质带.该酶分子质量约为32 ku,酶反应最适pH约为6.2, 在pH 5~8, 温度25~30℃之间酶保持稳定;该酶对3-DG的Km为2.3 mmol/L.添加适量的EDTA、巯基乙醇或二硫苏糖醇能明显提高酶的活性;而碘乙酸、N-乙基顺丁烯二酰亚胺抑制酶的活性. 相似文献
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酵母3-脱氧葡糖醛酮代谢酶的分离纯化及部分性质 总被引:1,自引:0,他引:1
3-脱氧葡糖醛酮 ( 3- deoxyglucosone)是美拉德反应的主要中间产物 ,对生物体具有毒性作用 .用硫酸铵分部沉淀、DEAE- cellulose52、Hydroxyapatite、DEAE- Sepharose CL- 6B柱层析从酿酒酵母 YBr-M( S.cerevisiae YBr-M)抽提液中分离纯化了 3-脱氧葡糖醛酮代谢酶 (以 NADPH为辅酶 ) .该酶是单一的分子 ,分子量为 44k D,反应最适 p H为 7.0 ,p H6.0~ 8.0之间酶活性相对稳定 ,以 3-脱氧葡糖醛酮为底物的米氏常数 Km 为 2 .2 5mmol/ L.在 35℃以下保温 30 min酶活不变 ,50℃保温 30 min后酶活损失 50 % .该酶对二羰基化合物的活性较高 ,对单羰基化合物则较低 ,其催化作用受碘乙酸、N-乙基顺丁烯二酰亚胺的抑制 ,而被β-巯基乙醇、二硫苏糖醇激活 ,催化作用必须以 NADPH为专一辅酶 ,当用 NADH代替 NADPH时 ,活力只有 5.3% . 相似文献
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