兔隔核刺激及隔核阿片受体在镇内脏痛中的作用

本工作以电刺激内脏大神经测定清醒家兔的内脏痛阈。实验观察到,以弱电流刺激隔核对内脏痛阈有升高、降低和无明显变化三种效应;向家兔双侧隔核注入阿片受体激动剂埃托啡(etorphine)2μg/2μl,注药后 5min,内脏痛阈即升高,维持 40min;静脉注射纳洛酮O.2mg/kg或 2μg/2μl纳洛酮注入中脑导水管周围灰质(PAG)均能阻断隔核内注入埃托啡的镇痛作用;电针刺激能抑制内脏痛,静脉注射纳洛酮 0.4mg/kg 能阻断这一效应,但对电针后效应无明显影响,向隔核内注入纳洛酮 2μg/2μl亦能阻断针效,而且后效应消失。结果提示,镇内脏痛与内阿片肽活动有关,隔核的阿片受体被激活即有明显抑制内脏痛的作用,其作用的传出通路可能通过 PAG;隔核的阿片受体参与电针镇内脏痛过程。     

家兔伏核注射吗啡引起的镇痛可被中脑导水管周围灰质注射纳洛酮或甲啡肽抗体所阻断

本实验室以往的资料表明,在家兔中脑导水管周围灰质(PAG)到伏核之间存在一条与镇痛有夫的神经通路,该通路以5-羟色胺(5-HT)和甲啡肽(ME)为其递质。本工作进一步探讨从伏核到PAG的下行镇痛通路。 以辐射热照射家兔嘴侧部皮肤,测量其躲避反应的潜伏期(ERL)作为痛反应阈,简称痛阈。通过预先埋植的慢性套管向伏核内微量注射吗啡,20min后向PAG内双侧注射纳洛酮(NX)或脑啡肽抗血清,观察ERL的变化。(1)伏核内注射吗啡20μg/1μl,引起ERL升高80％以上,作用持续50min以上。(2)PAG内注射NX(每侧0.5、1.0或2.0μg)可不同程度地阻断伏核内注射吗啡的镇痛效应,且呈明显的剂效关系。(3)PAG内注入甲啡肽抗血清(每侧1μl)可部分阻断伏核内注射吗啡的镇痛效应,而注入亮啡肽抗血清或正常兔血清则无效。 实验结果提示,从伏核到PAG存在一条下行镇痛通路,在PAG内可能以ME为其递质。该通路与PAG到伏核的上行镇痛通路构成一个环形的“中脑边缘镇痛回路”,并在针刺镇痛和吗啡镇痛中发挥重要作用。     

家兔中脑导水管周围灰质中甲七肽样免疫活性物质具有镇痛作用并参与电针镇痛

以辐射热照射家兔鼻嘴部皮肤,测定甩头反应潜伏期(ERL)作为痛阈。通过预先埋植的慢性套管向中脑导水管周围灰质(PAG)注射甲七肽降解酶抑制剂 Captopril,观察其镇痛作用以及加强电针镇痛的作用能否被特异的甲七肽抗血清所对抗。(1)单侧 PAG 注射 Captopril240 nmol 的镇痛作用可为同一部位注射甲七肽抗血清(1μl)所翻转,注入甲啡肽抗血清则无效。(2)单侧 PAG 注射 Captopril 60 nmol 有加强电针镇痛的作用。该作用可被1μl 甲七肽抗血清所完全取消,将抗血清量减少到0.1μl 则无效。以上结果说明 PAG 内的甲七肽样免疫活性物质在镇痛和电针镇痛中发挥重要作用。     

中央灰质内注射去甲肾上腺素对刺激兔下丘脑诱发室性期前收缩的影响

家兔用乌拉坦(700mg/kg)和氯醛糖(35mg/kg)静脉麻醉,用三碘季铵酚制动,在人工呼吸下进行实验。用电刺激下丘脑近中线区的方法诱发室性期前收缩(HVE)。中脑中央灰质(CG)内微量注射去甲肾上腺素(NA,4μg/2μl)对 HVE 有易化效应,使 HVE 次数增多。微量注射β-肾上腺素能受体阻断剂心得宁(2μg/2μl)使 HVE 次数明显减少,而α-肾上腺素能受体阻断剂酚妥拉明(2μg/2μl)则对 HVE 次数无明显减少作用。事先在 CG 内微量注射心得宁也可阻断 CG 内注入 NA 对 HVE 的易化效应。在 CG 内注射 NA 后,再在 CG 内微量注射吗啡,后者对 HVE 的抑制效应仍然存在。但在 GG 内注射 NA 可减少或消除刺激腓深神经对 HVE 的抑制作用。上述结果提示,在 CG 内β-受体的激活可增加 HVE 次数。刺激腓深神经对 HVE 的抑制作用可能部份是通过内源性吗啡样物质抑制 CG 内 NA 的释放而实现的。     

猫海马注射去甲肾上腺素对血浆皮质醇浓度的影响

本工作报道了在戊巴比妥钠麻醉猫的海马不同区域注射去甲肾上腺素(NE)时血浆皮质醇浓度的变化及其作用受体。腹侧海马(VHIP)注入NE(4 μg/2μl),血浆皮质醇浓度明显升高,在背侧海马(DHIP)注入NE,则此作用不大。进一步分析表明,注射β受体阻断剂心得安(10μg/2μl),对皮质醇升高效应无明显影响,但此效应可被α受体阻断剂酚妥拉明(10μg/2μl)、α_1受体阻断剂哌唑嗪(2μg/2μl)或α_2受体阻断剂育亨宾(4μg/2μl)所阻断。这些结果表明,VHIP的α受体对于调节血浆皮质醇浓度起着较大的作用。     

脊髓中的甲啡肽和强啡肽参与吗啡下行镇痛

在大鼠中脑导水管周围灰质(PAG)注射吗啡10μg 可引起明显的镇痛作用,并有部位特异性。在脊髓蛛网膜下腔注射抗甲啡肽 IgG20μg 或抗强啡肽 IgG20μg,均能大部分对抗 PAG内注射吗啡引起的镇痛作用,这提示甲啡肽和强啡肽参与自 PAG 到脊随的下行抑制作用。本实验利用蛋白质 A-琼脂糖 CL-4B 亲和层析柱从血清中纯化 IgG,这种方法简单,提纯速度快,且 IgG 纯度高,为中枢微量注射抗体研究神经肽的生理功能提供了方便。     

海马内注射肾上腺素能受体激动剂对细胞免疫功能的影响

目的 研究肾上腺素能受体激动剂对机体细胞免疫功能的作用及下丘脑-垂体-肾上腺轴(HPA轴)在此作用中的地位.方法以刀豆蛋白A(ConA)刺激脾淋巴细胞的增殖活性为细胞免疫功能指标,检测在正常及去肾上腺大鼠海马内注射去甲肾上腺素(noradrenaline,A)对机体细胞免疫功能的影响.结果①在正常大鼠,A(4 μl,.0×10-3mol/L)、β1受体激动剂杜丁胺 (dobutamine,ob,μl,.0×10-3mol/L) 和β2受体激动剂异丙喘宁(metaproterenol,et, μl,.0×10-3mol/L)均可抑制Con A刺激的脾淋巴细胞增殖反应、降低NK细胞的活性,其中NA的作用最强,et 次之,ob的作用最弱.α及β受体阻断剂酚妥拉明(Phen, μl,.6×10-2mol/L) 和心得安(Prop,μl,.6×10-2mol/L)均可部分阻断NA的免疫抑制作用,且Prop的作用较强.②在去肾上腺组,A的免疫抑制作用不明显.结论海马内NA对机体的细胞免疫功能具有明显的抑制作用,此作用由α及β受体共同介导,其中β受体的作用大于α受体,且β2受体的作用大于β1受体.此外,保持肾上腺结构和功能完整在NA调节机体细胞免疫功能作用中具有重要意义.     

外侧隔核注射促甲状腺素释放激素对丘脑束旁核痛放电的影响

本实验用细胞外记录法,观察大鼠外侧隔核(LS)微量注射促甲状腺素释放激素(TRH)对丘脑束旁核痛兴奋神经元(PEN)放电的影响。结果如下:(1)LS注射TRH对束旁核PEN痛放电产生明显的抑制效应;TRH的最大抑制效应及持续时间与TRH剂量(1,2.5,5μg/1μl)的对数呈正线性相关;(2)预先 LS 注射纳洛酮(3μg/1 μl)不能改变TRH抑制柬旁核PEN痛放电效应;(3)预先LS注射阿托品(5μg/lμl)阻断了TRH对束旁核PEN痛放电的抑制效应。结果表明:LS是TRH参与镇痛的一个有效的作用部位。LS胆碱能M受体可能参与了TRH的抑制PEN痛放电效应,而TRH的抑制效应未涉及阿片受体。     

猫隔核微量注射异丙肾上腺素对皮质醇浓度的影响

本工作采用猫隔核微量注射β受体激动剂异丙肾上腺素(ISO)及其阻断剂心得安,了解其对血浆皮质醇浓度的影响。实验观察到:隔核微量注射ISO,可引起血浆皮质醇浓度降低;β受体阻断剂心得安有颉颃ISO降低血浆皮质醇浓度的作用;心得安阻断ISO降低血浆皮质醇的结果提示,隔核内去甲肾上腺素能神经系统可能通过β受体对肾上腺皮质分泌机能进行调制。     

家兔缰核和导水管周围灰质内微量注射氯化钙拮抗电针和吗啡的镇痛作用

通过埋植套管向家兔双侧缰核或中脑导水管周围灰质(PAG)注射 CaCl_2每侧15—20nmol,对痛阈并无显著影响,但可使电针镇痛和吗啡(2rag/kg)镇痛效果明显降低。注入上述核团附近脑区则无效。双侧缰核注射的作用大于单侧。PAG 内注射 CaCl_2对抗电针镇痛的作用大于其对抗吗啡镇痛的作用。ca~(2 )对抗吗啡和电针镇痛的结果提示,吗啡或电针(释放内啡素)使神经元内 Ca~(2 )水平降低可能是吗啡或电针镇痛的共同机理。     

视前区微量注射吗啡对大鼠丘脑束旁核痛反应神经元电活动的影响

本实验观察了视前区(POA)内微量注入阿片样物质对丘脑束旁核(Pf)痛反应神经元电活动影响。结果如下:(1)POA 内微量注射高浓度吗啡(10μg/μl)能显著抑制 Pf 内大部分(20/26)痛兴奋神经元(PEN)的痛诱发放电,其中3个神经元注药后对伤害性刺激转变成抑制反应;POA 内微量注射低浓度吗啡(1μg/μl)也显著抑制 Pf 内大部分(19/23)PEN 的痛诱发放电。(2) POA 内微量注射两种浓度的吗啡,均使大多数痛抑制神经元(PIN,共27/33)的完全抑制时程缩短。上述结果提示,POA 内阿片样物质对 Pf 内痛反应神经元的电活动可能具有抑制作用。     

Through V2, not V1 receptor relating to endogenous opiate peptides, arginine vasopressin in periaqueductal gray regulates antinociception in the rat

Our previous study has proven that central arginine vasopressin (AVP) plays an important role in antinociception, and pain stimulation raises AVP concentration in the periaqueductal gray (PAG). The nociceptive effect of AVP in PAG was investigated in the rat. The results showed that microinjection of AVP into PAG increased pain threshold, whereas microinjection of V2 receptor antagonist-d(CH2)5[d-Ile2, Ile4, Ala9-NH2]AVP into PAG decreased pain threshold in a dose-dependent manner, but local administration of V1 receptor antagonist-d(CH2)5Tyr(Me)AVP did not change pain threshold; Pain stimulation elevated AVP, Leucine-enkephalin (L-Ek), Methionine-enkephalin (M-Ek) and beta-endorphin (beta-Ep), not dynorphinA(1-13) (DynA(1-13)) concentrations in PAG perfuse liquid; PAG pre-treatment with naloxone, an opiate receptor antagonist or V2 receptor antagonist completely reversed AVP-induced increase in pain threshold, however, PAG pre-treatment with V1 receptor antagonist did not influence this effect of AVP administration. The data suggest that AVP in the PAG, through V2 rather than V1 receptor, regulates antinociception, which progress relates to enkephalin and endorphin.     

下丘脑室旁核加压素能神经元参与电针刺激对实验性...

It has been demonstrated in animal model of somatic pain that hypothalamic paraventricular nucleus (PVN) participates in acupuncture analgesia, probably by mediation of vasopressin release. The role of PVN in acupuncture analgesia for experimental visceral pain in rats was further investigated in the present study. Experimental results demonstrated that electroacupuncture could inhibit the writhing response, produced by intraperitoneal injection of antimonium potassium tartrate and this inhibitory effect could be enhanced by electrical stimulation of PVN, but decreased by electrolytical lesion of PVN, intracerebroventricular injection of vasopressin antiserum (14 microliters) or the vasopressin antagonist, d(CH2)5Tyr(Me)-AVP (500 ng/5 microliters). Intraperitoneal administration of the latter drug (10 micrograms/kg), however, was ineffective. The above experimental results suggest that vasopressinergic neurons in PVN also participate in the inhibition of visceral pain by electroacupuncture.     

Arginine vasopressin induces periaqueductal gray release of enkephalin and endorphin relating to pain modulation in the rat

Previous study has proven that microinjection of arginine vasopressin (AVP) into periaqueductal gray (PAG) raises the pain threshold, in which the antinociceptive effect of AVP can be reversed by PAG pretreatment with V2 rather than V1 or opiate receptor antagonist. The present work investigated the AVP effect on endogenous opiate peptides, oxytocin (OXT) and classical neurotransmitters in the rat PAG. The results showed that AVP elevated the concentrations of leucine-enkephalin (L-Ek), methionine-enkephalin (M-Ek) and beta-endorphin (beta-Ep), but did not change the concentrations of dynorphinA(1-13) (DynA(1-13)), OXT, classical neurotransmitters including achetylcholine (Ach), choline (Ch), serotonin (5-HT), gamma-aminobutyric acid (GABA), glutamate (Glu), dopamine (DA), norepinephrine (NE) and epinephrine (E), and their metabolic products in PAG perfusion liquid. Pain stimulation increased the concentrations of AVP, L-EK, M-Ek, beta-Ep, 5-HT and 5-HIAA (5-HT metabolic product), but did not influence the concentrations of DynA(1-13), OXT, the other classical neurotransmitters and their metabolic products. PAG pretreatment with naloxone - an opiate receptor antagonist completely attenuated the pain threshold increase induced by PAG administration of AVP, but local pretreatment of OXT or classical neurotransmitter receptor antagonist did not influence the pain threshold increase induced by PAG administration of AVP. The data suggested that AVP in PAG could induce the local release of enkephalin and endorphin rather than dynophin, OXT and classical neurotransmitters to participate in pain modulation.     

头端延髓腹外侧区注射5—羟色胺对应激性高血粘度...

Experiments were carried out on 62 wistar rats. The hyperviscosity and elevation of blood pressure were induced by hanging and restraining the rats with their four limbs tied on a frame. It was found that microinjection of 5-HT (25 micrograms/10 microliters) into the 4th ventricle of the brain or bilateral microinjection of 5-HT (4 micrograms/0.5 microliters/site) into rostral ventrolateral medulla (rVLM) reduced stress-induced hyperviscosity (p < 0.01) and elevation of blood pressure (p < 0.01). The effect of 5-HT injected into the 4th ventricle or rVLM was blocked by bilateral microinjection of cinanserine (4 micrograms/0.5 microliter/site) into rVLM. These results suggest that microinjection of 5-HT into 4th ventricle and rVLM could reduce stress-induced hyperviscosity and elevation of blood pressure and these effects were probably mediated via 5-HT receptors in the rVLM.     

蝎毒中枢镇痛机制的初步探讨

目的：研究BmK蝎毒是能过何种受体实现其中枢镇痛作用的;外侧隔核是否是BmK蝎毒产生中枢镇痛作用的重要部位之一。方法：用辐射热一甩尾法测定痛阈,用玻璃微电极记录束旁核的单位放电;通过不锈钢套管向侧脑室和外侧隔核内微量注射0.01％BmK蝎毒。结果：向大鼠侧脑室2μl0.01%蝎毒可明显升高痛阂。该效应可被侧脑室注射2μl0.25%纳洛酮完全翻转,向隔核内注射0.5μl0.01%BmK蝎毒,分别对束帝核中的71％（15／21）痛兴奋单位和83％（5／6）痛抑制单位对痛刺激的反应减北,而对痛无关单位的电活动夫明显影响。结论：BmK蝎毒的中枢镇痛作用可能主要是通过吗啡受体实现的;隔核是BmK蝎毒产生中枢镇痛作用的重要部位之一。     

慢性应激性高压大鼠中刺激弓状核引起的压作用

Hypertension was induced by chronic foot-shock and noise stress in adult male Sprague-Dawley rats. Microinjection of 0.3 microliters (150 mmol) sodium glutamate (Glu) into the nucleus arcuatus (ARC) elicited a significant depressor effect in rats with chronic stress-induced hypertension. The depressor effect induced by excitation of ARC neurons was attenuated significantly by microinjection of 0.3 microliters beta-endorphin antiserum (beta-EPAS) into the dorso-medial periaqueductal gray (PAG) or 0.1 microliters into the area of locus coeruleus (LC) due to blockage of beta-endorphinergic fibres from ARC to PAG or LC.     

家兔孤束核区微量注射羟基马桑毒素对膈神经放电的影响

实验在44只乌拉坦麻醉、肌肉麻痹、切断双侧颈迷走神经的日本大耳白兔上进行。于一侧孤束核区微量注射不同浓度(0.1μg/μl,1μg/μl,5μg/μl,10μg/μl)的羟基马桑毒素1μl,可以引起膈神经放电活动产生可逆的吸气时程和呼气时程缩短,呼吸频率加快及膈神经放电积分的峰幅度降低。羟基马桑毒素0.1μg/μl组作用最弱,1μl/μl组作用最强。5μg/μl组,10μg/μl组还可使膈神经放电活动在呼气期出现短时的吸气性放电及呼气期间歇性不规则延长等呼吸节律紊乱现象。出现上述现象时血压、心率无明显变化,脑电图也未出现异常改变。结果提示:家兔孤束核区参与呼吸时相的转换,而羟基马桑毒素可能作用于孤束核区的呼吸时相转换机制,促进呼吸时相的转换。     

安定降低家兔血压和减少刺激下丘脑诱发室性期前收缩的机制分析

家兔62只,用乌拉坦(700mg/kg)和氯醛醣(35mg/kg)静脉麻醉,三碘季铵酚制动,在人工呼吸下进行实验。用电刺激下丘脑近中线区的方法诱发室性期前收缩(HVE)。静脉注射安定(0.5mg/kg)可降低基础血压(BP),减弱刺激下丘脑引起升压反应(指收缩压峰值SBP_(max))和减少HVE。在双侧延髓腹外侧头端区(rVLM)微量注射氟安定(200μg溶于0.5μl中),γ-氨基丁酸(GABA)(6μg溶于0.5μl中)均能降低BP、SBP_(max)和减少HVE,若微量注射印防己毒素(7.5μg溶于0.5μl中)则可使BP上升并增多HVE。而于双侧延髓腹外侧尾端区(cVLM)微量注射同样剂量氟安定、GABA则无上述反应。安定降低BP、SBP_(max)和减少HVE的作用可被双侧rVLM区微量注射GABA受体拮抗剂荷包牡丹碱(3μg溶于0.5μl中)或印防己毒素所消除,但在双侧rVLM区微量注射甘氨酸受体拮抗剂士的宁(1μg溶于0.5μl中)、阿片受体拮抗剂纳洛酮(0.5μg溶于0.5μl中)、胆碱能阻断药阿托品(0.25μg溶于0.5μl中)、东莨菪碱(1.5μg溶于0.5μl中)后仍然存在。 上述结果提示,在双侧rVLM应用GABA受体拮抗剂可消除安定降低BP、SBP_(max)和减少HVE的作用,安定降低BP、SBP_(max)和减少HVE的作用可能通过GABA这一中间环节,而胆碱能受体、阿片受体、甘氨酸受体可能不起重要作用。     

谷氨酸钠兴奋尾侧导水管周围灰质腹外侧部的升压反应及其在脑干内的传出通路

实验用乌拉坦麻醉、箭毒化、人工呼吸的大鼠,观察到:(1) 胞体兴奋剂L-谷氨酸钠(Glu)注入尾侧导水管周围灰质腹外侧部(PAG)引起明显的加压反应,(2) 该效应可被双侧延髓头端腹外侧(RVL)加压区内注射酚妥拉明或心得安衰减,但不受阿托品注入RVL影响;表明此升压反应是通过RVL及其内的α-及β-受体实现的。(3) RVL内注入心得安也可衰减电刺激腹侧臂旁核(NPV)的加压作用,却不影响Glu注入NPV的升压效应;结合以往的实验结果,提示尾侧PAG腹外侧部的神经元发出的轴突,可能一方面路过臂旁核直接作用于RVL内的β-受体,另一方面可能在臂旁核内换元,然后作用于RVL内的α-受体,而起升压作用。