滇产粗根荨麻水提取部分对大鼠佐剂性关节炎作用研究

观察滇产粗根荨麻水提取部分对大鼠佐剂性关节炎的治疗作用。用佐剂性大鼠关节炎模型观察不同剂量滇产粗根荨麻水提取部分对佐剂性关节炎模型大鼠足肿胀及关节炎指数改变的影响。滇产粗根荨麻水提取部分（400、200mg／kg）能明显抑制佐剂性关节炎大鼠的足肿胀并能降低其关节炎指数。滇产粗根荨麻水提取部分具有抗大鼠佐剂性关节炎作用。     

樟树抗炎活性及作用机制研究

以樟树提取香料后的残渣为研究对象,探讨其对脂多糖(LPS)刺激RAW 264. 7细胞的体外抗炎作用及其机制。采用95%乙醇提取,然后进行萃取分为正己烷、二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇和水5部分,采用噻唑蓝(MTT)法检测不同萃取相对RAW 264. 7细胞活性的影响;采用Griess法检测各萃取相对LPS刺激RAW 264. 7细胞的一氧化氮(NO)释放量;采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞上清液中PGE2和TNF-α的分泌量;采用反转录PCR(RT-PCR)和实时定量PCR(real time RT-PCR)检测环氧合酶-2 (COX-2)、诱导型一氧化氮合酶(i NOS)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α) mRNA的表达。樟树乙酸乙酯萃取相能明显抑制LPS诱导的RAW264. 7巨噬细胞NO、PGE2、和TNF-α的分泌而且无细胞毒性,从转录水平不同程度地抑制COX-2、i NOS和TNF-α的表达。证实了樟树乙酸乙酯萃取相具有抗炎作用,其作用机制与在转录水平上抑制COX-2、i NOS和TNF-α有关。     

绿原酸对小鼠腹腔巨噬细胞免疫调节作用的研究

研究绿原酸(Chlorogenic acid,CGA)对静息状态及脂多糖(Lipopolysaccharides,LPS)激活状态下小鼠腹腔巨噬细胞功能的影响。采用不同浓度的绿原酸作用于静息的和经LPS刺激的小鼠腹腔巨噬细胞,噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞活力,中性红吞噬实验检测巨噬细胞吞噬能力,Griess法检测NO的产生,酶联免疫法(ELISA)检测巨噬细胞细胞培养上清液中IL-1β、TNF-α、IL-10的分泌水平。试验结果表明在正常状态及LPS激活状态下,绿原酸均能提高下小鼠腹腔巨噬细胞的代谢活力、增强吞噬能力、增加NO、促炎性细胞因子IL-1β、TNF-α的分泌量,降低抑炎性细胞因子IL-10的分泌量,且作用效果呈剂量依赖性。     

余甘子不同溶剂提取物抗炎活性的研究

本试验旨在筛选出余甘子不同溶剂提取物的最佳抗炎活性部位。试验以水、乙醇、乙酸乙酯和石油醚为提取溶剂得到余甘子不同溶剂提取物(水提取物分成三个组分:水(1)组分分子量小于6000;水(2)组分分子量在6000到10000之间;水(3)组分分子量大于10000),采用LPS诱导RAW264.7巨噬细胞建立炎症模型;以NO分泌量和细胞因子(TNF-α、IL-1β、IL-6)释放量为指标,筛选出余甘子不同溶剂提取物最佳抗炎活性部位。余甘子不同溶剂提取物在浓度25~400μg/m L之间对细胞无明显细胞毒性(P0.05)。与模型组相比,水(1)、水(2)和乙醇提取物能显著抑制LPS诱导巨噬细胞分泌NO(P0.05)。在细胞因子实验中,乙醇提取物极显著抑制LPS诱导RAW264.7巨噬细胞分泌IL-1β和TNF-α(P0.01);乙酸乙酯提取物抑制LPS诱导RAW264.7巨噬细胞分泌IL-6的效果最佳。综合评价得出余甘子乙醇提取物作为筛选出的最佳抗炎活性部位,其极显著抑制LPS诱导RAW264.7巨噬细胞分泌NO和细胞因子(TNF-α、IL-1β、IL-6),可以作为后续分离鉴定抗炎活性物质单体的活性部位。     

新疆圆柏总黄酮对大鼠佐剂性关节炎的防治作用

利用弗氏完全佐剂(FCA)诱导的佐剂性关节炎(AA)模型对新疆圆柏总黄酮(JSTF)的抗炎作用进行研究。致炎前预防性给予JSTF后,AA大鼠急性期足肿胀的趋势有一定的改善,其血清IL-1β和TNF-α水平也显著降低(P0.05)。炎症继发期预防给药后,JSTF不同剂量组均可不同程度抑制大鼠皮肤的红斑、溃烂和降低外周血中TNF-α水平(P0.05),且高剂量组能明显降低关节炎指数(AI)(P0.05),并呈剂量-效应关系。炎症继发期治疗给药后,各给药组大鼠皮肤出现皱褶,皮肤色泽由暗红色变为正常,肿胀消退,继发侧的肿胀和红斑也有明显改善;与模型组比较,各组大鼠的AI值有明显的下降(P0.05),其中高、低剂量组还能显著降低TNF-α水平(P0.05)。结果表明JSTF对大鼠佐剂性关节炎具有一定的预防和治疗作用。     

蜜环菌提取物对佐剂性关节炎大鼠的治疗作用

本文通过对佐剂性关节炎大鼠原发性和继发性足肿胀度的测量、全身关节炎指数评分、体重及体态变化、免疫脏器指数、炎性踝关节切片的形态以及血清中肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β、白细胞介素6、前列腺素E2、一氧化氮和一氧化氮合成酶等指标来考察蜜环菌Armillaria mellea的5个不同提取物对佐剂性关节炎大鼠的影响及作用机理。结果表明,蜜环菌甲醇提取物对原发性和继发性足肿胀有明显的抑制;甲醇组能明显抑制佐剂性关节炎大鼠脾脏和胸腺萎缩,并能抑制血清中肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β、白细胞介素6和前列腺素E2的分泌,抑制大鼠踝关节炎细胞的形成。因此蜜环菌提取物中甲醇提取物对佐剂性关节炎大鼠治疗效果最显著。     

滇产粗根荨麻不同提取部位的镇痛抗炎作用研究

为探讨滇产粗根荨麻不同部位的镇痛抗炎活性,并作有效部位筛选,本文采用醋酸扭体法和角叉菜胶致大鼠足肿胀模型筛选有效部位.正丁醇部分(200 mg/kg)对醋酸诱发小鼠扭体有抑制作用与空白及溶媒对照组比较(P＜0.05);水部分(100,200,400 mg/kg)对角叉菜胶致大鼠足肿胀有明显抑制作用,与空白及溶媒对照组比较(P＜0.01);正丁醇部分(400 mg/kg)可减轻角叉菜胶致大鼠足肿胀,与空白及溶媒对照组比较(P＜0.05).滇产粗根荨麻正丁醇部分有一定的镇痛抗炎作用,水部分具较强抗炎作用.     

延龄草总皂苷对LPS诱导炎症大鼠的抗炎效果

为了探讨延龄草总皂苷对脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)诱导急性炎症大鼠的保护作用,将SD大鼠随机分成(2, 1, 0.5) g/kg剂量组、模型组、地塞米松磷酸钠(dexamethasone, DEX)对照组及空白对照组,每组10只。剂量组按(2, 1, 0.5) g·kg~(~(-1))·d~(-1)延龄草总皂苷灌胃一次,模型组、空白对照组灌胃等量蒸馏水。连续灌胃5 d,末次灌胃0.5 h后,剂量组、模型组按200μg/kg腹腔注射LPS;DEX对照组连续灌胃4 d,第5天腹腔注射DEX (100μg/kg),0.5 h后按200μg/kg腹腔注射LPS,空白对照组注射等量生理盐水。末次注射LPS 8 h后,处死大鼠,检测碱性磷酸酶(ALP)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、一氧化氮合酶(NOS)活性及总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、一氧化氮(NO)、白细胞介素6 (IL-6)、IL~(-1)0、IL~(-1)β、IL-4、IL-8、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、5-羟色胺(5-HT)、组胺(HIS)、环氧化物酶(COX-2)、前列腺素E2 (PGE2)含量。结果显示:(2, 1, 0.5) g/kg组ALP、AST活性及IL-6、IL~(-1)β、IL-8、TNF-α、HIS、COX-2、PGE2含量降低;(1, 0.5) g/kg组ALT活性降低;2 g/kg组NOS活性与NO含量降低,IL~(-1)0含量升高;(2, 1) g/kg组5-HT含量降低。延龄草总皂苷能有效降低LPS所致炎症大鼠ALP、AST、ALT、NOS活性及TC、TG含量,减少NO生成,降低IL-6、IL~(-1)β、IL-8、TNF-α、5-HT、HIS、COX-2及PGE2过量分泌、提升IL~(-1)0、IL-4含量,抗炎效果明显。     

野菊花总黄酮的对佐剂性关节炎大鼠抗炎免疫及机制探讨

为了了解野菊花总黄酮（total flavonoids of Chrysanthemum,TFC）对佐剂性关节炎（adjuvant arthritis,AA）大鼠炎症和免疫反应的调节作用,探讨TFC对AA大鼠病变机体一些细胞因子、ERK信号转导通路对腹腔巨噬细胞（peritoneal macrophages,PMCP）的影响,阐明TFC调节AA大鼠抗炎免疫活性的信号转导机制,本研究通过电子显微镜、免疫组织化学法、细胞凋亡检测及分子生物学的多种研究方法探讨AA大鼠滑膜组织和滑膜细胞的凋亡情况及其Caspase-3机制。     

PGE2对肝病大鼠创伤弧菌攻击后血清TNF-α、IL-10水平的影响及其肾组织的保护作用

目的探讨前列腺素E2（prostaglandin E2,PGE2）免疫干预对肝病大鼠创伤弧菌（Vibrio vulnifcus,Vv）攻击后TNF-α、IL-10的影响以及与肾组织超微结构改变的相关性。方法正常大鼠9只和肝病大鼠36只,分别为正常大鼠Vv攻击组、肝病大鼠Vv攻击组、肝病Vv攻击后氧氟沙星药物治疗组、肝病Vv攻击PGE2氧氟沙星联合保护组和肝病大鼠NS组（每组n=9）。ELISA法测定血清TNF-α和IL-10含量。取各组大鼠肾标本电镜下观察超微结构病理改变。结果肝病大鼠较正常大鼠Vv攻击后IL-10低而TNF-α高（P〈0.05）;PGE2免疫干预组肾组织超微结构明显改善。结论PGE2免疫干预能上调肝病大鼠血清IL-10,抑制TNF-α的分泌,对肝病大鼠Vv攻击后肾组织具有免疫保护作用。     

黄芪桂枝五物汤对AA大鼠血清IL-1β、TNF-α的影响

目的:探讨佐剂性关节炎大鼠血清中IL-1β、TNF-α含量的变化和黄芪桂枝五物汤对其变化的影响,以求阐明该黄芪桂枝五物汤治疗类风湿性关节炎的作用机制。方法:选用健康SPF级SD雌性大鼠60只随机分为六组:空白对照组,模型组,甲氨喋呤(MTX)组,黄芪桂枝五物汤高剂量组,黄芪桂枝五物汤中剂量组和黄芪桂枝五物汤低剂量组。大鼠先进行一周的适应性饲养后用完全弗氏佐剂诱导制作大鼠佐剂性关节炎模型,并用黄芪桂枝五物汤进行干预。采用放射免疫法测定大鼠血清中IL-1β、TNF-α的含量。结果:与空白时照组相比,模型组大鼠血清中细胞因子IL-1β、TNF-α的水平明显升高(P<0.01);与模型组相比,经黄芪桂枝五物汤高、中剂量组、MTX组治疗干预后,大鼠血清中IL-1β、TNF-α的水平明显下降,且呈现一定的量效关系。结论:黄芪桂枝五物汤有抑制佐剂性关节炎大鼠血清中细胞因子IL-1β、TNF-α升高的作用。     

异丙肾上腺素对小鼠腹膜巨噬细胞分泌及吞噬功能影响的研究

目的:研究异丙肾上腺素对脂多糖诱导BALB/C小鼠腹膜巨噬细胞分泌TNF-α,IL-10及吞噬功能的影响.方法:分别以10μM、100μM和300μM异丙肾上腺素加入BALB/C小鼠腹膜巨噬细胞培养液,2h后用脂多糖(LPS,10μg/mL)刺激,孵育6h后以ELISA法测定上清中TNF-α水平,24h后测定上清中IL-10的含量,并观察腹膜巨噬细胞时中性红吞噬能力的变化.结果:异丙肾上腺素使BALB/C小鼠腹膜巨噬细胞分泌TNF-α降低,IL-10分泌增加,增加巨噬细胞对中性红的吞噬能力.结论:异丙肾上腺素能调节巨噬细胞分泌功能及吞噬功能,使炎性因子分泌减少,抑炎因子分泌增多,增强巨噬细胞吞噬中性红的能力.     

竹节参培养细胞提取的竹节参总皂苷对大鼠佐剂性关节炎的抑制作用

为了探讨竹节参培养细胞所提取的竹节参总皂苷对大鼠佐剂性炎症的治疗效果,利用雄性AA大鼠构建病理模型,通过致炎前和致炎后口服给药,研究了竹节参总皂苷对于大鼠原发性以及继发性佐剂性关节炎的预防和治疗效果。实验结果表明,从竹节参培养细胞中分离到的竹节参总皂苷能够预防和显著减轻AA大鼠佐剂性关节炎的原发性病变;竹节参总皂苷也能够很好地减轻和治疗AA大鼠佐剂性关节炎的继发性病变。竹节参总皂苷的有效剂量为35～140 mg/kg。实验证明,从竹节参培养细胞中提取的竹节参总皂苷与天然竹节参提取物一样均具有良好的抗炎作用。     

PGE2抑制肿瘤坏死因子诱导的成骨细胞凋亡

前列腺素E2(PGE2)通过自分泌或旁分泌方式调节成骨细胞的增殖和分化。本文以小鼠原代成骨细胞和成骨样细胞MC3T3-E1为实验材料,研究了PGE2对肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导的成骨细胞凋亡的调节作用。检测发现,振荡型流体剪切力(OFSS)刺激可诱导成骨细胞内环氧合酶2(COX-2)表达升高,进而促进PGE2合成,并抑制TNF-α诱导的成骨细胞凋亡。COX-2选择性活性抑制剂NS-398显著促进TNF-α诱导的成骨细胞内半胱天冬酶3(caspase-3)的激活,且呈时间依赖性。Hoechst 33258/PI染色检测发现,NS-398促使TNF-α诱导的成骨细胞膜通透性进一步增强,核染色质浓缩加剧,而PGE2可显著抑制这一效应。Caspase-3活性检测证实,NS-398显著促进TNF-α诱导的成骨细胞内caspase-3活性增强,外源性PGE2可有效对抗该效应。这些结果表明,内源性和外源性PGE2可抑制TNF-α诱导的成骨细胞凋亡发生。     

来氟米特联合依那西普对佐剂性关节炎大鼠免疫功能的影响

目的:研究来氟米特和依那西普联合使用对佐剂性关节炎(AA)大鼠的治疗作用及其可能的作用机制。方法:建立AA大鼠关节炎模型,分为正常对照组、模型组、来氟米特组、依那西普组、来氟米特联合依那西普配伍组;采用关节炎指数评分法评价大鼠关节炎症程度,半定量RT-PCR和放射免疫法检测滑膜组织及血清中IL-1β、TNF-α表达水平,免疫组化方法检测滑膜组织中MMP-3含量。结果:①相较于AA模型组,来氟米特组、依那西普组和配伍组中大鼠的AI评分均显著下降(P<0.01),其中以配伍组关节炎指数为最低(P<0.05)。②模型组大鼠血清及滑膜组织的IL-1β和TNF-α水平明显高于正常对照组(P<0.01),用药后各组的IL-1β和TNF-α水平均有所下降,并以配伍组降低最为明显(P<0.01或P<0.05);③模型组大鼠滑膜组织MMP-3表达阳性密度显著高于正常对照组(P<0.01),用药后各组的MMP-3阳性密度降低(P<0.01),其中配伍组下降程度明显高于来氟米特组和依那西普组(P<0.01)。结论:来氟米特和依那西普联合使用可明显减轻AA大鼠的关节炎症,降低血清和滑膜组织中IL-1β和TNF-α水平,减少滑膜中MMP-3的表达,疗效优于单独使用来氟米特或依那西普。     

双歧杆菌的完整肽聚糖对大鼠腹腔巨噬细胞TNF-α表达的影响

目的探索双歧双歧杆菌的完整肽聚糖(WPG)对大鼠腹腔巨噬细胞TNF-α的调控作用。方法以WPG刺激大鼠腹腔巨噬细胞;或以NF-κB的抑制剂NAC和ERK抑制剂PD98059分别预先孵育巨噬细胞,再用WPG刺激巨噬细胞,最后用RT-PCR检测巨噬细胞TNF-αmRNA的表达水平。结果 WPG刺激巨噬细胞后,其TNF-αmRNA的表达水平显著高于对照组(P0.01)。但经NAC和PD98059分别预先孵育巨噬细胞后,其TNF-αmRNA的表达水平均明显低于WPG刺激组(P0.01)。结论双歧双歧杆菌的WPG能上调巨噬细胞TNF-αmRNA的表达,这一过程受NF-κB和ERK的调控。     

槲皮素对急性痛风性关节炎模型大鼠炎症因子的影响

目的:探讨黄酮类化合物槲皮素对尿酸钠致急性痛风性关节炎模型大鼠踝关节肿胀度的影响,对大鼠血清、肝脏、脾脏和关节滑膜内炎症因子的影响。方法:采用大鼠右后肢踝关节腔内注射尿酸钠溶液制备急性痛风性关节炎模型,缚线法测定大鼠不同时相踝关节肿胀度,酶联免疫吸附法测定大鼠血清、肝脏、脾脏和滑膜中炎症因子IL-1β、TNF-α、COX-2,PGE2水平。结果:槲皮素能够显著抑制痛风性关节炎大鼠踝关节肿胀度,降低炎症介质水平(IL-1β、TNF-α、COX-2、PGE2)。结论:槲皮素通过抗炎作用表现出很强的治疗痛风性关节炎功效,有可能成为治疗该病的有效药物。     

银杏叶提取物对巨噬细胞呼吸爆发、炎性细胞因子和COX-2 mRNAs及蛋白表达的影响

目的探讨银杏叶提取物(EGb761)对小鼠巨噬细胞呼吸爆发及IL-1β、IL-6、TNF-α、COX-2mRNAs和蛋白表达的影响。方法以佛波酯刺激巨噬细胞产生呼吸爆发,用化学发光分析和电子顺磁共振检测呼吸爆发产生的活性氧;以脂多糖(LPS)诱导巨噬细胞IL-1β、IL-6、TNF-α、COX-2表达,用RT-PCR检测IL-1β、IL-6、TNF-α、COX-2mRNAs表达,ELISA法检测IL-1β、IL-6、TNF-α、COX-2蛋白表达。结果银杏叶提取物能清除巨噬细胞呼吸爆发产生的超氧阴离子自由基、下调LPS诱导巨噬细胞IL-1β、IL-6、TNF-α、COX-2 mRNAs和蛋白表达。结论银杏叶提取物对巨噬细胞产生呼吸爆发和LPS诱导巨噬细胞IL-1β、IL-6、TNF-α、COX-2 mRNAs和蛋白表达有明显的抑制作用。     

红景天苷对脂多糖诱导大鼠肺泡巨噬细胞和Ⅱ型肺泡上皮细胞共培养炎性介质分泌的影响

本研究旨在探讨红景天苷(salidroside, Sal)对脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)诱导大鼠肺泡巨噬细胞NR 8383和II型肺泡上皮细胞RLE-6TN共培养炎性活化的影响。CCK-8比色法检测细胞增殖百分率,Western blot检测磷酸化AKT (p-AKT)和总AKT蛋白表达,酶联免疫吸附法测定细胞培养上清中肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factorα, TNF-α)、巨噬细胞炎性蛋白2(macrophage inflammatory protein-2, MIP-2)和白介素10 (interleukin-10, IL-10)的含量。结果显示:与对照组相比,32和128μg/mL Sal预处理RLE-6TN细胞或共培养RLE-6TN和NR 8383细胞1 h后继续培养24 h,细胞增殖百分率显著增加(P 0.05);与对照组相比,32和128μg/mL Sal预处理RLE-6TN细胞,p-AKT/AKT蛋白比值显著增加(P 0.05)。32μg/mL Sal预处理不仅抑制LPS诱导NR 8383细胞分泌TNF-α和MIP-2 (P 0.05),而且加强RLE-6TN和NR 8383细胞共培养对LPS诱导NR 8383细胞分泌TNF-α和MIP-2的抑制作用(P 0.05)。此外,32μg/mL Sal预处理能促进LPS诱导NR 8383细胞分泌IL-10 (P 0.05),并能加强RLE-6TN和NR 8383细胞共培养对LPS诱导NR 8383细胞分泌IL-10的促进作用(P 0.05)。以上结果提示,Sal不仅能直接抑制LPS诱导的NR 8383炎性活化,还可能通过PI3K/AKT信号通路促进RLE-6TN增殖,参与II型肺泡上皮细胞对LPS诱导肺泡巨噬细胞炎性活化的调节作用。     

姜黄素对LPS诱导大鼠肠黏膜微血管内皮细胞分泌TNF-α的影响

目的探讨姜黄素对脂多糖(LPS)诱导大鼠肠黏膜微血管内皮细胞分泌TNF-α的影响,研究姜黄素在其中所起的作用及意义。方法选用大鼠肠黏膜微血管内皮细胞(MVEC),当MVEC长成融合状态的单层时,随机分为5组,5组分别为:治疗高、中、低剂量组,LPS对照组,空白对照组。37℃、5%CO2的条件下培养24 h后,用固相夹心法酶联免疫吸附法测定细胞液TNF-α水平。结果治疗组的TNF-α水平较LPS组低,LPS组与正常组比较差异有统计学意义(P0.05)。治疗中、高剂量组与LPS组比较差异有统计学意义(P0.05),与正常对照组比较差异无统计学意义(P0.05),其中治疗高剂量组的TNF-α值明显比中剂量组低,效果更显著。结论姜黄素可降低TNF-α表达,有抗炎作用。