豆科植物籽实中的昆虫消化道α－淀粉酶抑制剂的研究（Ⅱ）

对５个不同品种菜豆（ＰｈａｓｅｏｌｕｓｖｕｌｇａｌｒｉｕｓＬ．）中的蜚蠊（Ｐｅｒｉｐｌａｎｅｔａ）消化道α－淀粉酶抑制剂作了比较研究．发现它们都能在酸性ｐＨ条件下有效地发挥抑制作用,且最适抑制ｐＨ均在５．５０左右;但它们的热稳定性、最大抑制活性及发挥最大抑制活性所需的预温时间等不尽相同。     

蚯蚓体内一种纤溶酶原激活剂(e-PA)对ATEE的降解

赤子爱胜蚓（Ｅｉｓｅｎｉａｆｅｔｉｄａ）体内的一种纤溶酶原激活剂（ｅ－ＰＡ）能够降解人工合成底物Ｎ－乙酰－Ｌ－酪氨酸乙酯（ＡＴＥＥ）,该降解反应的最适ｐＨ为８．５,而且在０．２ｍｏｌ／ＬＮａ２ＨＰＯ４中的活性要强于在０．０５ｍｏｌ／ＬＴｒｉｓ－ＨＣｌ（ｐＨ８．５）中．分别测定了ｅ－ＰＡ的大小亚基及全酶在０．２ｍｏｌ／ＬＮａ２ＨＰＯ４与０．０５ｍｏｌ／ＬＴｒｉｓ－ＨＣｌ（ｐＨ８．５）两种体系中的Ｋｍ和Ｋｃａｔ．结果表明,在０．２ｍｏｌ／ＬＮａ２ＨＰＯ４中,全酶的ＡＴＥＥ活性远远高于大小亚基单独的ＡＴＥＥ活性,而在０．０５ｍｏｌ／ＬＴｒｉｓ－ＨＣｌ（ｐＨ８．５）中则没有这种现象．从蛋白质结构的角度对这一结果作了解释．用不同抑制剂和ｅ－ＰＡ作用,结果表明,ｐｅｐｓｔａｔｉｎ,Ｅ－６４和ＥＤＴＡ对ｅ－ＰＡ的ＡＴＥＥ活性都有不同程度的抑制,这一点与ｅ－ＰＡ的ＢＡＥＥ活性不同．     

豆科植物籽实中的昆虫消化道α－淀粉酶抑制剂的研究（Ⅰ）

对６种豆科植物籽实进行了蜚蠊消化道α－淀粉酶抑制剂活性的测试。但只从褐色菜豆（Ｐｈａｓｅｏｌｕｓｖｕｌｇａｒｉｕｓｌ）中检测出特异性抑制剂。该抑制剂在酸性条件下能有效地抑制蜚蠊α－淀粉酶的活性,最适抑制ｐＨ５．４５,３７℃时预温３０分钟后能显示最大抑制活性,不预温时的抑制活性仅为最大抑制活性的２５％;０℃时几乎不显示抑制活性,但在一定范围内,抑制活性随温度的升高而呈近似的线性增加;抑制剂浓度较低时,α－淀粉酶的抑制程度与抑制剂浓度的变化成正比。但超过约５０％后,抑制程度只随抑制剂浓度的增加而缓慢上升并趋近于最大值。     

pH值对萼花臂尾轮虫种群增长及繁殖的影响

采用种群积累培养法,实验观察了 ｐＨ在３．５～１１．５之间（间隔 １）萼花臂尾轮虫 （Ｂｒａｃｈｉｏｎｕｓ ｃａｌｙｃｉｆｌｏｒｕｓ）种群的增长及繁殖．结果表明,该轮虫种群在ＰＨ６．５～８．５之间增 长较快, ８． ５时增长最快,即瞬时增长率 ｒ和种群密度较大和最大; ｐＨ在 ３． ５～４． ５和 ９． ５ ～１０． ５之间,种群为负增长,即 ｒ为负值; ｐＨ在 ５． ５～９． ５之间种群为正增长,即正为正 值．该轮虫存活的ｐＨ上限为１１．５,下限为３．５．在种群增长最适ｐＨ（８．５）条件下,该轮虫 的繁殖最快,即绝对带卵量最高（１３２个·ｍｌ－１）;ｐＨ在９．５时,其相对带卵量最高．为其它 ｐＨ值条件下的２～４倍．本研究结果可为淡水轮虫的大批量培养提供可靠的ｐＨ值技术指 标．     

棉花病菌Xanthomonascampestrispv.malvacearum的一种具特异肽键专…

棉花病原体Ｘａｎｔｈｏｍｏｎａｓｃａｍｐｅｓｔｒｉｓｐｖ．ｍａｌｖａｃｅａｒｕｍ在酪蛋白（脱脂奶）存在下生长时产生胞外蛋白酶活性，其中至少包含３种蛋白酶，表观分子量分别为２９（蛋白酶－１）、３８和４３ｋＤ。蛋白酶－１被纯化，其最适ｐＨ在５．５－７．５间。     

虎纹捕鸟蛛毒液中透明质酸酶的纯化和部分性质的研究

用分子筛（岛津ＤＩＯＬ－１５０柱）和阳离子交换（岛津ＷＣＸ－１柱）高效液相色谱从虎纹捕鸟蛛（Ｓｅｌｅｎｏｃｏｓｍｉａｈｕｗｅｎａ）毒液中分离提纯透明质酸酶（Ｈｙａｌｕｒｏｎｉｄａｓｅ,ＥＣ３．２．１．３５）．经等电聚焦电泳为一条带,ｐＩ＝７．２．经ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳测得分子量为４０ｋＤ,经凝胶过滤测得分子量为４０．７ｋＤ。以透明质酸为底物时在ｐＨ３．５─５．５范围内有较大活性,最适ｐＨ值为４．０;在ｐＨ４．５─６．０范围内稳定,在反应温度为３０─６０℃时有较大活性,最适温度为５０℃;对热稳定,０．１５ｍｏｌ／Ｌ的ＮａＣｌ对酶活性有一定的稳定作用．３％的肝素、５００μｍｏｌ／Ｌ的Ｈｇ~（２＋）、Ｆｅ~（２＋）、Ｃｕ~（２＋）对酶活性有明显的抑制作用。     

青霉胞外菊粉酶的纯化和性质研究

青霉菌（ＰｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍＳＰ．９１－４）产生的胞外菊粉酶（ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒｉｎｕｌｉｎａｓｅ）粗酶液,经硫酸铵沉淀,超滤浓缩,Ｓｅｐｈａｄｅｘ－Ｇ－１００凝胶过滤,ＤＥＡＥ－Ｓｅｐｈａｃｅｌ离子交换柱层析等步骤,得到提纯３０倍的酶Ｅ。酶Ｅ反应时最适ｐＨ４．５,最适温度为５０℃,在ｐＨ４．７～７．６范围内,温度５０℃以下酶Ｅ活性稳定;其活性受Ａｇ＾＋,Ｃｕ＾２＋ＰＣＭＢ强烈抑制。采用     

CAM植物NADP─苹果酸的环境调节

专─ＣＡＭ植物瓦松（Ｏｒｏｓｔａｃｈｙｓｆｉｍｂｒｉａｔｕｓ）．兼性ＣＡＭ植物长药景天（Ｓｅｄｕｍｓｐｅｃｔａｂｉｌｅ、露花（Ｍｅｓｅｍｂｒｙａｎｔｈｅｍｕｍｃｏｒｄｉｆｏｌｉｕｍ）的ＮＡＤＰ─苹果酸酶活性在２５─５５℃的温度范围内,随着温度的升高而增强,高于５５℃后,活性下降;在ｐＨ６─９的范围内,反应系统ｐＨ７．５时,表现出最大活性。苹果酸是该酶反应底物,苹果酸浓度在１─５μｍｏｌ／Ｌ范围内,随着苹果酸浓度增加,酶活性上升,浓度高于５μｍｏｌ／Ｌ,对ＮＡＤＰ─苹果酸酶有抑制作用。光对该酶活性影响不大,在１３５０μｍｏｌ／ｍ２ｓ光照和黑暗条件下,处理４ｈ后,光下酶活性比黑暗下略有提高。看来,ＮＡＤＰ─苹果酸酶活性昼高夜低的变化规律并不是光／暗变化所致。     

消炎痛对猪胃H~＋／K~＋－ATP_（ase）抑制的动力学

消炎痛作为一种可引起胃粘膜急性病变的药物,用分离提纯的猪胃Ｈ＋／Ｋ＋－ＡＴＰａｓｅ证明,它可以显著的抑制此酶的活力,０．１ｍｇ／ｍＬ时即可抑制酶活力２７％,０．５ｍｇ／ｍＬ时可抑制全部活力,其Ｋ（０．５）为０．１８ｍｇ／ｍＬ。消炎痛对Ｈ＋／Ｋ＋－ＡＴＰａｓｅ的抑制随３０℃时预保温时间的延长而加剧,１０ｍｉｎ预保温可抑制总活力的５０％。消炎痛并不影响Ｈ＋／Ｋ＋－ＴＡＰａｓｅ的转换温度（３９℃）以及最适ｐＨ（约ｐＨ７．５）,但酸性条件下消炎痛对Ｈ＋／Ｋ＋－ＡＴＰａｓｅ抑制比碱性条件下强烈。在我们的实验条件下,消炎痛对Ｈ＋／Ｋ＋－ＡＴＰａｓｅ的抑制与Ｈ＋／Ｋ＋－ＡＴＰａｓｅ量成正比,它不影响酶的Ｋｍ值（０．１１ｍｍｏｌ／Ｌ）,而是显著降低Ｖｍａｘ,因而它是此酶的可逆性非竞争性抑制剂,其Ｋｉ为０．３２ｍｍｏｌ／Ｌ。     

豆薯种子中两种蛋白质的分离纯化及其性质研究

豆薯（Ｐａｃｈｙｒｒｈｉｚｕｓｅｒｏｓｕｓ）种子经磷酸盐缓冲液抽提,Ｓ－ＳｅｐｈａｒｏｓｅＦａｓｔＦｌｏｗ柱,ＤＥ－５２纤维素柱和ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－７５柱层析,提取出两种高纯度的蛋白成分,命名为ＰａｃｈｙｒｉｎⅠ和Ⅱ．ＳＤＳ－ＰＡＧＥ测得其分子量分别为３３ｋＤ和１４．５ｋＤ,但ＨＰＬＣ分子筛的结果显示ＰａｃｈｙｒｉｎⅡ的分子量为２８ｋＤ,无论在还原条件下,还是在非还原条件下,ＰａｃｈｙｒｉｎⅡ电泳的结果都完全相同,表明该蛋白的亚基不是以二硫键相连。两种蛋白的等电点分别为４．５和６．５．用酸解法测定了它们的氨基酸组成。在无细胞体系中,它们对蛋白合成有较弱的抑制活性,显示它们可能是核糖体失活蛋白（ＲＩＰｓ）家族中的新成员。     

菜心溶菌酶的提纯及酶学性质

菜心（ＢｒａｓｓｉｃａｃａｍｐｅｓｔｒｉｓＬ．ｓｓｐ．ｃｈｉｎｅｎｓｉｓｖａｒ．ｕｔｉｌｉｓ）叶子高速捣碎后,滤液经酸碱处理,硫酸铵分步沉淀,凝胶柱层析等步骤分离纯化溶菌酶,酶比活力达３４１４．６Ｕ／ｍｇ,纯化倍数为１９７．４。菜心溶菌酶在较宽的温度或ｐＨ值范围均有活性,最适温度为６０℃,最适ｐＨ值为５．８,底物Ｋｍ值为８７μｇ／ｍＬ。该酶对热和酸碱的稳定性较高,巯基和酪氨酸残基不是该酶活性中心的必需基团。     

胸腺肽的合成及抗衰老作用研究

我们采用Ｍｅｒｒｉｆｉｌｄ固相法合成了胸腺生成素Ⅱ的活性片段ＴｈｙｍｏｐｏｉｅｔｉｎⅡ３２～３６（Ｔｐ－５）和胸腺素α１的活性片段Ｔｈｙｍｏｓｉｎ２３～２７（（Ｌｙｓ２３）α１－５）,用０．１,１,１０,１００,１０００ｕｇ／ｋｇ体重的Ｔｐ－５和（Ｌｙｓ２３）α１－５分别腹腔注射小鼠,连续１０天,能使小鼠肝、脑、脾和胸腺组织中丙二醛含量显著降低,可以促进免疫活性和抑制体内脂质过氧化物的生成,最适剂量集中在１～１００μｇ／ｋｇ体重,Ｐ＜０．０１。     

桑白皮中抗人爱滋病病毒（HIV）成分研究

从中药桑白皮（ＭｏｒｕｓａｌｂａＬ．）的根皮中分离到６个成分,它们是：ｍｏｒｕｓｉｎ（１）,ｍｕｌｂｅｒｒｏｆｕｒａｎＤ（２）,ｋｕｗａｎｏｎＨ（３）,ｍｕｌｂｅｒｒｏｆｏｒａｎＫ（４）,ｋｕｗａｎｏｎＧ（５）,ｍｕｌｂｅｒｒｏｆｕｒａｎＧ（６）;并制备了它们的乙醚化合物和葡萄糖成;还测定了这些化合物的体外抗人爱滋病病毒（ＨＩＶ）活性和对人淋巴细胞的细胞毒活性,发现其中黄酮ｍｏｒｕｓｉｎ,ｋｕｗａｎｏｎＨ和ｍｏｒｕｓｉｎ４＇－ｇｌｕｃｏｓｉｄｅ具有一定的抗ＨＩＶ活性。     

杜氏盐藻细胞质膜氧化还原系统

杜氏盐藻细胞质膜具的氧化ＮＡＤ（Ｐ）Ｈ,还原Ｆｅ（ＣＮ）＾３－６和Ｏ２的氧化还原系统。当Ｆｅ（ＣＮ）＾３－６浓度为０．６ｍｍｏｌ／Ｌ,氧化ＮＡＤＨ的Ｋｍ为９６μｍｏｌ／Ｌ,Ｖｍａｘ为１５９ｎｍｏｌ１０＾－８ｃｅｌｌｓｍｉｎ＾－１,最适ｐＨ为８．５。ＴｒｉｔｏｎＸ－１００可促进ＮＡＤＨ和Ｆｅ（ＣＮ）＾３－６的氧化还原活性。ＮＡＤＨ能促进藻细胞的氧吸收,最适ｐＨ为８．５。在无外源电子供体存在时,细胞质     

家蚕病原球孢白僵菌的原生质体再生回复及核型分析

家蚕病原球孢白僵菌（Ｂｅａｕｖｅｒｉａ ｂａｓｓｉａｎａ）原生质体的分离制备、性状及再生回复,并用脉冲凝胶电泳（ＰＦＧＥ０技术分析了其核型。以６ｍｇ／ｍＬ Ｄｒｉｓｅｌａｓｅ为酶解液,０．７ｍｏｌ／Ｌ ＮａＣｌ液（ｐＨ５．８）为渗透压稳定剂,在３０℃下轻轻振荡处理幼嫩菌丝１．５ｈ,是的生质体分离的适宜条件。原生质体的无核率为２６．５％,有核率为７３．５％,其中单核率为５３．５％。再生回复的形式可观     

皖南尖吻蝮蛇毒出血毒素Ⅳ的纯化与初步鉴定

从皖南尖吻蝮蛇（Ａｇｋｉｓｔｒｏｄｏｎａｃｕｔｕｓ）毒液中经ＤＥＡＥ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ和ＳｅｐｈａｃｒｙｌＳ－２００两步凝胶柱层析首次纯化出一种中分子量出血毒素（简称ＡａＨⅣ）．经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和等电聚焦凝胶电泳测定其分子量为４４ｋＤ,等电点为ｐＨ５．０．从５００ｍｇ粗毒中可获得２０ｍｇＡａＨⅣ纯品．ＡａＨⅣ有较强的出血活性,最小出血剂量（ＭＨＤ）为０．４μｇ．     

解磷微生物的分离测定与盆栽试验

从土壤中分离筛选了具有解磷工的真菌２株,细菌３株,分别测定了它们在实验室条件下对磷矿粉中不容性磷的溶解转化强度,其中解磷红曲霉菌（Ｍｏｎａｓｃｕｓｓｐ）ＰＢ１,曲霉菌（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓｓｐ）ＰＢ２的解磷强度分别为８６．５％和５９．４％显著高于解磷细菌,其解磷过程与培养液ｐＨ值下降密切相关,用红曲霉菌ＰＢ１进行的油盆栽肥效试验结果表明,ＰＢ１＋磷矿粉＋猪粪盆栽处理与对照（磷矿粉＋猪粪）相比,油     

水稻巯基蛋白酶抑制剂的纯化及其性质研究

水稻的糠皮和胚经生理盐水浸取、离心后的上清液加热至８０℃处理１０ｍｉｎ,离心获得的上清液调ｐＨ至８．０,得到沉淀。沉淀溶解于０．０１ｍｏｌ／ＬＨＣｌ,经透析冷冻干燥得水稻巯基蛋白酶抑制剂（ＣＰＩ）粗品;粗品再经ＤＥＡＥ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ柱线性离子梯度洗脱和ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１００柱分子筛层析,即可获得在ＰＡＧＥ、ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和ＨＰＬＣ上均为单一蛋白带的ＣＰＩ样品。经上述步骤,ＣＰＩ可被纯化５８倍。经ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１００和ＳＤＳ－ＰＡＧＥ测定其分子量均为１２０００,Ｎ末端氨基酸为Ｐｒｏ,等电点５．６．水稻ＣＰＩ经１００℃处理１０ｍｉｎ后,其抑制活性无任何变化,在ｐＨ２．０～９．０之间,活性也不发生改变,但ｐＨ在９．０以上,其活性逐渐下降,水稻ＣＰＩ对木瓜蛋白酶是一种高亲和性的抑制剂,它对木瓜蛋白酶和无花果蛋白酶有强抑制作用,对菠萝蛋白酶仅有弱抑制作用,但对胰蛋白酶则全无抑制作用;其抑制类型属竞争性抑制剂类型,Ｋ＿ｉ值约３．５×１０￣（－８）ｍｏｌ／Ｌ对木瓜蛋白酶的抑制摩尔比约为１：１。     

芽孢杆菌E2菌株纤维素酶性质的研究

芽孢杆菌Ｅ２菌在５５℃下生长良好,在培养液中能大量积累胞外纤维素酶（１９０ｍｕ／ｍＬ培养液）,所产生的纤维素普单一的羧甲基纤维素酶（ＣＭＣａｓｅ）。羧甲基纤维素钠（ＣＭＣＮａ）为其专一性底物。该酶作用的ｐＨ为４．５－８．０;最适ｐＨ为６．５－７．０;在ｐＨ４．０－８．０范围内较稳定,酶作用的最适温度为５５℃;在６０℃处理１０,３０,６０,９０以及１２０分钟后,残余酶活分别为９５％,８０．３％,４０     

何首乌叶铜锌超氧物歧化酶纯化及性质

何首乌（ＰｏｌｙｇｏｎｕｍｍｕｌｔｉｆｌｏｒｕｍＴｈｕｎｂ．）叶Ｃｕ·ＺｎＳＯＤ经硫酸铵盐析、离子交换柱层析及葡聚糖凝胶过滤等步骤,被分离成两组ＳＯＤ同工酶（ＳＯＤ１,ＳＯＤ２）,它们被纯化到均一程度。ＳＯＤ１分子量为３２．４ｋＤ,亚基分子量为１６．２ｋＤ,最适ｐＨ值为５０,在６０℃和６５℃时的半衰期分别为１４ｍｉｎ和８ｍｉｎ;ＳＯＤ２分子量为３０５ｋＤ,亚基分子量为１５９ｋＤ,最适ｐＨ值为６０,在６０℃和６５℃时半衰期分别为３２ｍｉｎ和１６ｍｉｎ,它由２７４个氨基酸残基组成,不含Ｃｙｓ、Ｔｙｒ和Ｔｒｙ。ＳＯＤ１和ＳＯＤ２每ｍｏｌ酶都含有２ｍｏｌＣｕ和２ｍｏｌＺｎ,它们在紫外区最大吸收波长均为２７５ｎｍ。