烟草种间体细胞杂种的同工酶分析

在稍加修改的Kao^[7]方法的基础上使用培 养皿沉降法成功地进行了普通烟草（Nicotiana tabacum） 品种CY,和黄花烟草（N. rustica) 品种黄花原生质体的融合,并获得了种间体细 胞杂种植株^[1,2].     

普通烟草与黄花烟草体细胞杂种的花粉粒、果实、种子及气孔的观察

长尾照义[97对有性杂交不易成功的普通烟 草(Nicotiana tabacum）粉红花品种和黄花烟草 (N. rustica）利用体细胞融合的方法,获得了 体细胞杂种。我们利用了普通烟草的红花品种 (Copes yusuhe及u No. 4）和黄花烟草的黄花烟 品种进行了体细胞融合,获得了体细胞杂种植 株^[1,2]。对这些植株的花型、花色、叶型等形态 学的特征和根尖染色体进行了观察,并作了过 氧化物酶和细胞色素氧化酶同功酶的酶谱分 析^[3],证明我们获得了真正的体细胞杂种。在 杂种植株开花、结实时,又对体细胞杂种株及 其亲本的花粉粒、果实、种子和气孔进行了观 察和比较,以期找到一种简便易行的鉴定方 法。     

普通烟草和黄花烟草及体细胞杂种过氧化物酶同工酶等电聚焦电泳

日本学者长尾照义(1978)用原生质体融合获得普通烟草与黄花烟草的体细胞杂种植株。1980年陈家玉等在国内首先获得普通烟草(Copus Yeusuku No.4)和黄花烟草(Yellow Flower)的体细胞杂种植株。之后,中国农科院烟草所(1981)也得到相同的结果。陈家玉等(1983)对上述杂种进行了形态学、细胞学和同工酶的分析并取得一定的结果。Dlineee等(1975)分析比较了用等电聚焦技术分离的过氧     

普通烟草和粉蓝烟草体细胞杂种植株后代的育性研究

普通烟草(Nicotiana.tabacum)和粉蓝烟草（N.glauca）叶肉原生质体融合获得种间体细胞杂种植株,其当代育性很低,但株系间稍有差异。杂种植株自交系（SC）随着自交世代的增加,染色体数目变化不大,正常花粉粒的比率增加,育性提高。体细胞杂种植株的回交系(BC)随着回交世代的递增,染色体数目减少,直至接近回交亲本的染色体数,育性趋向正常。高度雄性不育的植株染色体数目稳定,回交仍保持高度的不育。其育性低的主要原因之一是雄性器官退化。     

烟草种间体细胞杂种后代的遗传性状观察和选育

1980年,通过原生质体融合获得普通烟草与黄花烟草(N.tabacum + N.rustica)、普通烟草与粉蓝烟草N.tabacum + N.glauca)种间体细胞杂种植株。 对其后代连续七年进行了遗传性状观察和选育。结果表明：杂种一代呈典型的双亲中间型,杂种三代和回交二代开始分离,也有一直不分离的稳定株系和雄性不育株系。杂种后代育性差,回交能转育并逐步累积轮回亲本性状,染色体数目则逐渐减少。在杂种后代选育中,已选出了有一定应用价值的烟草新类型。通过体细胞杂交技术,有可能开辟出烟草育种新途径。     

烟草属花粉—叶肉原生质体的融合及杂种植株再生

用饥饿预处理分离烟草（Ｎｉｃｏｔｉａｎａ ｔａｂａｃｕｍ Ｌ．）品系Ｎ３６４ Ｋｍ ＋ 二核早中期的花粉原生质体,用ＰＥＧ－高钙高ｐＨ 法诱导其与黄花烟草（Ｎ．ｒｕｓｔｉｃａ Ｌ．）叶肉原生质体融合。通过抗性筛选再生的４ 株小植株,经过氧化物酶同工酶、根尖染色体计数鉴定均为配子－体细胞三倍体杂种。未经筛选处理再生的２１株小植株,经鉴定有６ 株为配子－体细胞杂种。     

被子植物配子-体细胞杂交研究的进展与展望

Pental和Power于1985年提出用植物的单倍体原生质体,与二倍体体细胞原生质体融合产生三倍体植株,以用于限量基因转移研究的设想"'。次年粘毛烟草（Nicotianaglutinosa川、抱子四分体原生质体与烟草（N．tatacum）的体细胞原生质体融合,就成功地得到了三倍体杂种植株,并被称     

利用植物体细胞融合在种间传递胞质雄性不育性

美国康奈尔大学Zelcer等人利用正常的Nicotiana sylrestris和经X射线照射的雄性不育普通菸草的原生质体融合,实现了胞质雄性不育性的种间传递。他们利用X射线可以遏止胞质雄性不育“亲本”原生质体的细胞分裂和甘露醇培养基不利于N.sylvestris原生质体生长的特性,选择出融合产物。为了弥补融合产物频率低的缺点,采用了原生质体喂养层技术。结果从7块愈伤组织得到31株变异株。其中,A组20株,具有N.sylvestris的茎、叶、花的形态特     

烟草花粉原生质体与叶肉原生质体的融合及培养早期变化

用ＰＥＧ—高Ｃａ高ＰＨ法诱导抗卡那霉素的烟草（Ｎｉｃｏｔｉａｎａｔａｂａｃｕｍ）品系Ｎ３６４＋Ｋｍ＋花粉原生质体和黄花烟草（Ｎｉｃｏｔｉａｒｕｓｔｉｃａ）叶肉原生质体融合。幼嫩花粉原生质体和叶肉原生质体之间的融合体培养启动胚胎发生分裂,经卡那霉素筛选后,少数多细胞团存活并形成小愈伤组织。成熟花粉原生质体与叶肉原生质体之间的融合体则仅产生管状结构。这一结果表明,作为融合一方的花粉原生质体的发育时期对融合产物的发育途径有重要影响。     

体外培养和遗传育种

<正>本文描述了将Nicotiana tabacum(普通烟草)、和Nicotiana plumbaginifolia。叶片制备的原生质体与由大豆悬浮细胞制备的原生质体进行融合的一种简单方法。融合小室用5 cm塑料培养皿及薄铜丝电极构成。在振荡器产生的无线电频率场中     

小麦与高冰草体细胞杂种F2代的性状和蛋白质组分

普通小麦（Triticum aestvum L.）“济南177”原生质体和经紫外线照射的高冰草（Agropyton elongatum(Host)Nevski）原生质体（供体）用PEG法诱导融合,形成外形偏像小麦的不对称体细胞杂种植株及后代,F2代株系可分为3种类型：1.株型松散、大穗大粒;2.株型直立紧凑、分蘖多、中穗型;3.大穗大粒直立型。蛋白质含量明显优于亲本小麦,株系之间也存在显差异;采用微IEF／SDS－PAGE双向电泳技术分析杂种F2代植株旗叶及幼胚蛋白质组分可见,杂种不仅含有双亲的蛋白质组,而且还产生了特异的新蛋白;不同杂种株系间蛋白质组分差异明显。     

烟草种间体细胞杂种及其后代的研究

通过原生质体融合方法,获得了普通烟草与黄花烟草的种间体细胞杂种植株。对体细胞杂种及其后代进行了形态学、细胞学及酶学研究。它们有许多显著不同于两个亲本的性状。例如花的颜色,叶、花及蒴果的形状,气孔的大小,染色体的数目,同功酶谱及花粉育性。实验证明,通过体细胞杂交,可以克服某些种间杂交的困难,可以作为育种工作的有效途径之一。     

棘孢小单孢菌和灰色链霉菌原生质体融合的研究

用庆大霉素产生菌——棘孢小单孢菌Micromonospora echinospora 814(Gm~r,Km~r)和链霉素产生菌Streptomyces griseus No. 45(Sm~r,Lm~r)进行了原生质体融合。以抗性为选择标记,选出了融合体。其融合频率在10~(-3)—10~(-4)之间。在电镜条件下,观察了原生质体融合的详细过程,测定了融合体的产抗生素能力,其中一株融合体F106的抗生素产量比亲本菌株814高58％。用羧甲基纤维素薄层对发酵液层析表明,有一个融合体的发酵液比亲本菌株814多一个组份,但没有测出其生物活性。     

粉兰烟草原生质体再生植株

原生质体培养成再生植株是植物休细胞杂 交的关键环节。烟草是原生质体培养和体细胞 杂交的常用材料。烟草属的几个种已能成功地 由原生质体培养成再生植株。野生的粉兰烟草 (N. glazsca)由于具有染色体数目（2n一24）比 普通烟草（2n=48）少的优点,并已成功地被 用车体细胞杂交的亲木之一^[3,4]。本文介绍粉兰 烟草从原生质体游离到植株再生的实验结果。     

新型细胞标记技术在酿酒酵母原生质体融合育种中的应用研究

本研究用酿酒酵母原生质体融合技术使两株酵母发生融合,通过用营养要求测定,交配型测定、细胞体积测定、DNA含量测定,筛选出13株融合株,再经免疫测定,得到同样的鉴定结果.表明免疫测定技术在酿酒酵母原生质体融合育种中作为亲本细胞标记是可行的,具有较高实用价值.     

LpDH活性作为一种遗传标记在体细胞融合中的转移

用具有LpDH活性,但不能分化植株的烟草冠瘿瘤B 6 S 3为亲本的原生质体,和与之有相反特点的正常烟草xanthi品科叶肉原生质体间融合,由融合处理的原生质体形成了愈伤组织并再生了植株。对56株叶片的LpDH活性电脉分析表明,有75％植株含有不同程度的LpDH活性,即能合成章鱼碱。随植株发育成长,一些植株的LpDH活性有减弱或丢失现象。但叶片形态具有双亲部分特征,表明烟草冠瘿瘤的LpDHT活性标记可通过原生质体融合转移 到烟草xanthi细胞中。     

优良啤酒酵母原生质体融合株GR5的构建及其发酵特性

以发酵度较高的非絮凝性的啤酒酵母菌株X6和发酵度较低、絮凝性较强的啤酒酵母菌株N1为亲本进行原生质体融合。用亚硝酸诱变原养型的菌株X6,经筛选得到一株需酪素水解物的营养缺陷型菌株X6~20。采用正交试验法分别优化菌株X6~20和N1的原生质体形成和再生的条件。用X6~20菌株的原生质体作为受体和热灭活的N1菌株原生质体作为供体进行融合。融合株经三角瓶发酵筛选,得到一株较优良的融合株GR5。该融合株的絮凝性较强(本斯值为2.7),以12°Bx麦芽汁为培养基,用500 L的发酵罐在12℃下发酵,发酵至第8 d菌株GR5的发酵度为69.2%,发酵液中的双乙酰含量为0.0498 mg/L、乙醛含量为6.34 mg/L,总高级醇含量为74.4mg/L。融合株GR5具有双亲的优点,发酵的啤酒风味较好,是一株具有工业应用前景的啤酒酿造酵母菌株。     

普通烟草与野生种烟草的种间试管受精

野生种烟草(N.repanda)具有抗栽培烟草的大多数病害,有人曾用常规技术和胚珠培养方法使其与栽培烟草(N.tabacum)杂交,但均未取得结果。我们对普通烟草(N.tabacum)与野生种烟草(N.repanda)的试管受精进行了研究,成功地克服了其种间杂交不亲和性,获得了杂种种子、幼苗和成年植株。杂种植株具有双亲特征;花粉粒败育;根尖细胞染色体数2n=48。     

林青链霉菌双亲灭活原生质体融合的研究

分别以紫外线、热灭活性林肯链霉菌947和9502原生质体,然后进行灭活双亲的原生质体融合,从16株融合子筛选到林青霉素高产株。用双亲的互补营养缺陷型对林肯链霉菌原生质体的制备、融合、再生的部分条件进行了研究。发现含0．4％Gly和34％蔗糖的SM培养基最适于实验菌株原生质体的制备、再生。聚乙二醇（PEG）分子量对原生质体融合影响不大,其在P缓冲液中的浓度却很重要。含50％PEG的P缓冲液最有利于原生质体融合。     

自交群体中连锁对世代平均数和方差的影响及其测定

本文探讨了自交群体中连锁对世代平均数和方差的影响,并以黄花烟草（N.rustica）的两个品种V₂和V₁₂为材料,创造了3个不同交配轮次的自交群体,研究其平均数和方差的变化。结果指出：V₂和V₁₂所衍生的自交世代的开花时间（FT）和最后株高（FH）这两个性状,相关世代的平均数存在显著差异,不同秩次的加性方差随秩次的增加而增加。这是存在相斥连锁的表现。但从检验方差的同质性可知,连锁不是太紧密的。