蓖麻蚕遗传转化体丝心蛋白氨基酸的研究

蓖麻蚕和家蚕是我国天然丝生产的两个主要蚕种,分别隶属于天蚕蛾科(Saturniidac)和家蚕蛾科(Bombycidae)这两种蚕不仅在形态上,而且也在其所合成的生物产品上都有明显的差异。有些作者指出:丝心蛋白的氨基酸中,含量最多的是甘氨酸和丙氨酸;家蚕是甘氨酸比丙氨酸多,蓖麻蚕则是丙氨酸的含量大大地超过了甘氨酸(匡达人等;Kirimura等)。     

蓖麻蚕氨基酰-tRNA合成酶与丝心蛋白合成的关系

蓖麻蚕Phtlosamta cynthia ricim后部丝腺体在五龄后期主要合成一种蛋白质——丝心蛋白。在组成丝心蛋白的氨基酸成分中,丙氨酸和甘氨酸占了78％,其中内氨酸的含量比甘氨酸高(Kirimura等1962)。已经知道在五龄期,蓖麻蚕后部丝腺体tRNA含量与丝心蛋白的氨基酸成分之间存在着相关性(辜祥荣等,1981)。在生物体内,氨基酸必须与其相应的tRNA结合才能参与蛋白质的合成,而两者的结合反应是由其相应的氨基酰-tRNA合成酶所催化的。本文测定了五龄期蓖麻蚕后部丝腺体中甘氨酰-tRNA合成酶和丙氨酰-tRNA合成酶的活力,以及这两个酶的Km值,观察到在五龄期,这两个酶的活力是随着蛋白质合成的增加而升高的,而且并没有同功酶或酶的变构产生。     

昆虫激素调节控制的研究——保幼激素类似物对合成甘氨酸和丙氨酸有关酶系的调节控制

五龄后期蚕丝腺后部的细胞几乎只合成蚕丝的丝心蛋白。保幼激素类似物(JHA)能增加蚕丝心蛋白的生物合成。家蚕和蓖麻蚕丝心蛋白中,甘氨酸和丙氨酸的含量约占75%。我们用ZR515和ZR777分别处理五龄蚕后,观察到丝腺后部和脂肪体中合成甘氨酸和丙氨酸有关转氨酶的活力均有明显增加。(1)用ZR515处理五龄家蚕后,使五龄期延长1～2天,茧层量增加约10%。蚕丝腺后部的丙氨酸-乙醛酸转氨酶,丙氨酸-酮丙二酸转氨酶,谷丙转氨酶和谷天转氨酶活力,JHA组均比对照组增高约10～40%,脂肪体中这些酶活力也相应地比对照组增高约30%,其中丙氨酸-乙醛酸转氨酶活力增加到165%。酶活力增加的持续时间约3～5天。(2)用ZR777处理五龄蓖麻蚕后,丝腺后部和脂肪体中的谷天转氨酶、异亮氨酸吨-α-酮戊二酸转氨酶和丙氨酸-乙醛酸转氨酶活力,均比对照组高。本文认为JHA对蚕丝腺后部和脂肪体中形成甘氨酸和丙氨酸的转氨酶有明显的调控作用,从而为丝心蛋白的合成提供更多的甘氨酸和丙氨酸。这也许是JHA增丝机制的一个重要方面。     

昆虫激素调节控制的研究——保幼激素类似物对合成甘氨酸和丙氨酸有关酶系的调节控制

五龄后期蚕丝腺后部的细胞几乎只合成蚕丝的丝心蛋白。保幼激素类似物(JHA)能增加蚕丝心蛋白的生物合成。家蚕和蓖麻蚕丝心蛋白中,甘氨酸和丙氨酸的含量约占75%。我们用ZR515和ZR777分别处理五龄蚕后,观察到丝腺后部和脂肪体中合成甘氨酸和丙氨酸有关转氨酶的活力均有明显增加。(1)用ZR515处理五龄家蚕后,使五龄期延长1～2天,茧层量增加约10%。蚕丝腺后部的丙氨酸-乙醛酸转氨酶,丙氨酸-酮丙二酸转氨酶,谷丙转氨酶和谷天转氨酶活力,JHA 组均比对照组增高约10～40%,脂肪体中这些酶活力也相应地比对照组增高约30%,其中丙氨酸-乙醛酸转氨酶活力增加到165%。酶活力增加的持续时间约3～5天。(2)用ZR777处理五龄蓖麻蚕后,丝腺后部和脂肪体中的谷天转氨酶、异亮氨酸-α-酮戊二酸转氨酶和丙氨酸-乙醛酸转氨酶活力,均比对照组高。本文认为JHA 对蚕丝腺后部和脂肪体中形成甘氨酸和丙氨酸的转氮酶有明显的调控作用,从而为丝心蛋白的合成提供更多的甘氨酸和丙氨酸。这也许是JHA 增丝机制的一个重要方面。     

蚕氨基酸代谢之研究 Ⅳ.幼虫体液及丝腺体中的α-酮酸

Fukuda等报导在家蚕、蓖麻蚕等的体液及丝腺体中存在α-酮戊二酸、乙醛酸与草酰乙酸,但未能发现有丙酮酸存在,由于丙氨酸主要在丝腺体内生成,因此以上结果不能很好地说明丙酮酸在丙氨酸形成过程中的作用。以后,该作者以整体实验却证明丙酮酸-1-C~(14)可通过体液形成丝蛋白中的丙氨     

蚕氨基酸代谢之研究 Ⅲ.丝腺体L-天门冬氨酸及α-酮戊二酸形成丙氢酸之机制

研究了家蚕(Bombyx mori L.),天蚕蛾科之蓖麻蚕(Philosama cynthia ricini B.)及柞蚕(Antheraea pernyi G.)丝腺体后部自L-天门冬氨酸与α-酮戊二酸形成丙氨酸的机制。以上各种蚕的丝腺体组织都可利用L-天门冬氨酸与α-酮戊二酸形成丙氨酸,谷氨酸及CO_2。当存在DL-环丝氨酸(10~(-4)M)时,形成较多的谷氨酸与丙酮酸,而丙氨酸之量显著地减少。以L-天门冬氨酸与α-酮戊二酸或以L-谷氨酸与丙酮酸为底物,对丙氨酸之形成具有相同的抑制程度。DL-环丝氨酸(10~(-4))并不抑制谷-天转氨酶与草酰乙酸脱羧酶,但在同样条件下,可显著抑制谷-丙转氨酶的活力(～90%)。此外,若以L-天门冬氨酸或其与小量α-酮戊二酸为底物,尤其是用透析后之酶液,并无显著的丙氨酸与CO_2形成。我们认为,自L-天门冬氨酸与α-酮戊二酸形成之丙氨酸,并非通过Bheemeswar提出的L-天门冬氨酸β-脱羧酶之作用,而是经过三个相继的反应,即在谷-天转氨酶催化下,形成谷氨酸与草酰乙酸,后者除非酶促分解外,在草酰乙酸脱羧酶作用下,形成丙酮酸与CO_2;由以上两反应所形成之谷氨酸与丙酮酸,在蚕丝腺普遍存在的谷-丙转氨酶催化下形成丙氨酸(见图8)。     

蓖麻蚕后部丝腺体核酸及丝蛋白含量的变化

五龄蓖麻蚕(Philosamia cynthia ricina)后部丝腺体在大量合成丝蛋白前其中的DNA,RNA以及tRNA即开始大量增加,直至蓖麻蚕上簇。在合成丝心蛋白的最旺盛时期,tRNA^Aia和tRNA^Gty含量的增加最为明显,可分别达到总tRNA置的37.3%和33.5%。这与丙氨酸和甘氨酸在丝心蛋白中的含量(分别为43.2%和33.5%)有对应关系。     

茭白膨大期间游离氨基酸含量的变化

本试验测定了两熟茭白(Zizania latifolia )品种“广益”茭秋茭膨大期间肉质茎中游离氨基酸含量的动态变化。从“孕茭”始期开始,每4天取20株膨大肉质茎混匀。共测定6次。游离氨基酸用4％磺基水杨酸提取,然后用Waters-244型高压液相色谱仪分析。主要结果如下:1.茭白膨大过程中,所测得的18种游离氨基酸以天门冬氨酸、丝氨酸、丙氨酸、酪氨酸和组氨酸含量较高,而蛋氨酸和甘氨酸的含量相对较低,其它氨基酸含量中等。天门冬氨酸、苏氨酸(包括天门冬酰胺和谷酰胺)一直呈增加趋势。而丝氨酸谷氨酸甘氨酸丙氨酸缬氨酸酪氨酸和精氢酸在前期提高.后期下降:蛋     

皱肋文蛤氨基酸含量及脂肪酸组成分析

测定了皱肋文蛤(Meretrix lyrata)软体部分的氨基酸含量与脂肪酸组成.共检出17种氨基酸,总含量为软体部干重的52.26%;4种呈味氨基酸(天门冬氨酸、谷氨酸、甘氨酸和丙氨酸)的含量为22.07%,占氨基酸总量的42.23%;必需氨基酸(EAA)总含量为20.72%,其必需氨基酸的构成比例基本符合FAO/W...     

亚洲玉米螟血淋巴游离氨基酸的测定

本文报道亚洲玉米螟不同虫期血淋巴游离氨基酸的变化,并就其特点进行分析讨论。 材料和方法 玉米螟自然滞育幼虫由田间越冬场所于11月中旬采集,留待使用。其他各虫期皆由室内人工饲养供应。饲养方法依周大荣等(1980)所述。玉米螟雌雄交配后产的卵在2％甲醛中浸泡10分钟,然后用蒸馏水漂洗二次,卵孵化后定期取样。将收集的供试虫体用蒸馏水洗净,滤纸吸干后用消毒的干净     

三化螟与荔枝蝽体液氨基酸和脂肪体转氨酶与谷氨酸脱氢酶的研究

1.用纸层析的方法测定了水稻、三化螟与荔枝蝽体液的氨基酸含量。2.在三化螟幼虫脂肪体中,观察到谷天转氨酶、谷丙转氨酶与鸟氨酸转氨酶的活力。在荔枝蝽的脂肪体中有11种氨基酸(L-天门冬氨酸、L-丙氨酸、L-异白氨酸、L-白氨酸、L-缬氨酸、L-苯丙氨酸、L-鸟氨酸、L-酪氨酸、L-色氨酸、L-β-丙氨酸与DL-γ-氨基丁酸)可与α-酮戊二酸进行转氨作用,以形成谷氨酸。3.在三化螟与荔枝蝽脂肪体中均存在谷氨酸脱氢酶。     

LEVELS OF AMINO ACIDS AND PROTEINS IN PACINIAN CORPUSCLES OF THE CAT

Abstract— Paper chromatography of extracts from mesenteric Pacinian corpuscles of the cat revealed the presence of glutamic acid, glutamine, aspartic acid and alanine as major amino acids, and glycine, serine and threonine in traces; GABA was not detected. Levels of glutamic acid (0·75 μmol/g ' 0·37, s.d. ), glutamine (1·34 ± 0·55), and aspartic acid (0·32 ± 0·22) of mesenteric and pancreatic samples of Pacinian corpuscles were determined by separation on chromatographic columns. The protein values averaged 5·2 ± 0·66 per cant of the wet weight.
Treatment of the cats with reserpine or pargyline or deafferentation of the Pacinian corpuscles did not significantly alter these values.     

DISTRIBUTION AND UPTAKE OF AMINO ACIDS IN VARIOUS REGIONS OF THE CAT BRAIN IN VITRO

—(1) The levels of the free amino acids were determined in five areas of the cat brain. The regional pattern was heterogeneous and fairly characteristic for each compound. (2) The uptakes of α-aminoisobutyric acid, taurine, d -aspartic acid, and l -histidine were measured in incubated slices from 31 regions of the cat CNS. Differences in uptake were found among the various areas; the regional pattern of uptake was different for each amino acid. The initial rate of uptake (5 min incubation) very often paralleled the rate at equilibrium (90 min incubation). (3) The regional correlation between distribution in vivo and uptake in vitro was good for aspartate, less so for histidine, and poor for taurine. (4) It is concluded that regional heterogeneity in exit processes, available energy, cell density, or protein content is unlikely to have decisive influence in determining regional differences in distribution and transport of metabolites; it seems that influx is the most important factor.     

培养方式对纤细裸藻脂肪酸与氨基酸含量的影响

以纤细裸藻(Euglena gracilis)为实验对象, 研究了培养方式对纤细裸藻生长、脂肪酸、氨基酸的影响, 并探讨了可能的作用机理。结果表明, 与其他培养方式相比, 光诱导可提高纤细裸藻总脂肪酸、单不饱和脂肪酸(MUFA)和多不饱和脂肪酸(PUFA)含量, 分别为2.69、0.52和1.475 g/100 g; 饱和脂肪酸(SFA)含量由高到低依次为异养组、光诱导组、自养组和兼养组, 其中异养组含量达1.008 g/100 g; 游离氨基酸含量由高到低依次为光诱导组、兼养组、异养组和自养组, 分别为381.57、358.1、330.17和231.1 mg/g; 兼养组必需氨基酸含量最高, 为134.37 mg/g。实验结果说明光诱导培养可显著提高纤细裸藻总脂肪酸、MUFA和PUFA含量(P<0.05); 异养培养可显著提高纤细裸藻饱和脂肪酸含量(P<0.05); 兼养培养可显著提高纤细裸藻必需氨基酸含量(P<0.05)。研究结果为阐明纤细裸藻对不同培养方式的响应提供了科学依据, 同时为其开发应用提供数据支持。     

十种水蛭的氨基酸分析

应用８３５－５０型氨基酸分析仪,测定了十种与医药有关的水蛭的氨基酸含量,其中包括《药典》上收载的三种水蛭：宽体金线蛭、日本医蛭和尖细金线蛭。