共查询到18条相似文献,搜索用时 140 毫秒
1.
2.
苛求芽孢杆菌基因组DNA提取方法的比较 总被引:6,自引:0,他引:6
目的:比较不同方法提取苛求芽孢杆菌基因组DNA的差异。方法:用经典CTAB提取法、改进CTAB法(溶菌酶处理结合CTAB提取法)、UniQ柱吸附提取法制备苛求芽孢杆菌基因组DNA,比较产物完整性和用于PCR扩增的有效性。结果:三种方法制备基因组DNA纯度接近,但改进CTAB法产率最高,UniQ法产率最低。经典CTAB法和UniQ法提取基因组DNA易降解。三种方法所得基因组DNA用于PCR扩增效率接近。结论:溶菌酶裂解结合CTAB提取更适合制备苛求芽孢杆菌基因组DNA。 相似文献
3.
利用改良CTAB法快速小量提取微胚乳玉米基因组DNA 总被引:2,自引:0,他引:2
为了能快速小量提取微胚乳玉米基因组DNA,以微胚乳玉米幼叶为试材,采用改良CTAB法和传统CTAB法提取微胚乳玉米基因组DNA,并对所提取的DNA通过紫外分光光度计、琼脂糖凝胶电泳和PCR扩增等方法进行检测。两种方法所得基因组DNA的OD260/OD280在1.8~1.9之间,电泳条带清晰,无蛋白质和RNA污染,DNA无明显降解,其浓度和纯度都适合基因工程实验操作的条件。改良CTAB法与传统CTAB法相比更简便快捷,可实现大批量的不同样本基因组DNA的同时提取,提供了一种简便、快捷、有效和实用的微量提取微胚乳玉米基因组DNA方法,可满足以PCR为基础的分子生物学研究。 相似文献
4.
改良Chelex-100法快速提取转基因农产品DNA 总被引:1,自引:0,他引:1
旨在建立一种从转基因农产品中快速提取DNA的方法.分别采用改良Chelex-100法和常规CTAB法提取转基因大豆GTS40-3-2基因组DNA,测其浓度和纯度,PCR扩增其内源基因(Lectin)、启动子(CaMV35S)和品系特异性序列,对两种方法进行比较和评价,并研究两种方法提取的DNA在-20℃下保存一个月内的检测效果,以及改良Chelex-100法在玉米、小麦和水稻等其他转基因农产品的应用效果.结果表明,改良Chelex-100法能够快速在1.5h之内从样品中提取DNA,所提取的DNA直接用于PCR扩增反应,产物电泳条带清晰明亮.两种方法提取的DNA在-20℃下保存一个月内的检测效果未见明显差别.该方法在玉米、小麦和水稻等转基因农产品的应用效果稳定.因此,改良Chelex-100法提取的DNA可以作为PCR扩增模板用于转基因农产品检测.该方法具有经济、简便、快速、安全的特点,适合转基因农产品大规模筛选和鉴别. 相似文献
5.
《天然产物研究与开发》2018,(11)
了解不同地区的冬虫夏草种内的遗传分化及变异情况,进行18S rDNA ITS区的序列分析,以期为它们的差别建立分子标记,也为不同地区来源的商品冬虫夏草的鉴定提供分子依据。冬虫夏草样品应用DNA提取试剂盒所提供的方法(CTAB法)提取基因组DNA,1%琼脂糖凝胶电泳检测DNA纯度,DNA经PCR扩增,PCR扩增产物在DNA全自动测序仪上进行序列测定。测序结果获得6个不同地域的冬虫夏草18S rDNA ITS区基因序列图谱和GC含量(%)。实验结果表明,6个不同地区的冬虫夏草基因序列,反映了冬虫夏草种内的遗传分化和变异,其遗传分化与变异的程度与海拔高度和纬度呈正相关性,这些分化可应用于不同地区冬虫夏草的鉴定。 相似文献
6.
7.
苔藓植物DNA提取方法研究 总被引:15,自引:3,他引:12
提取高质量的 DNA是对苔藓植物遗传多样性进行研究的基础。该文以苔藓植物为试材 ,用 5种方法 ,即快速提取法、改良 CTAB法、CTAB法、SDS法及高盐法 (第一种为自行设计 ,第二种是对原有方法的改进 )对苔藓植物 DNA提取方法进行了比较研究。结果表明 ,快速提取法和改良 CTAB法是 2种适合于苔藓植物 DNA提取的方法。这 2种方法提取的 DNA浓度和纯度均比较高 ,凝胶电泳显示无明显降解现象 ,适宜作为 PCR扩增的模板 ,并成功地进行了 RAPD扩增。 相似文献
8.
基于AFLP分析用吴茱萸叶高质量DNA的提取 总被引:5,自引:0,他引:5
目的:研究吴茱萸叶基因组DNA的提取方法,以用于扩增片段长度多态性(AFLP)分析。方法:设计了一种改良CTAB法:以石英砂代替液氮研磨;抽提前用不溶性PVP结合酚形成络合物,然后用缓冲液除去;抽提中加入Vc。将改良CTAB法所提吴茱萸叶DNA与传统的SDS法、CTAB法所提DNA进行比较。利用植物的核糖体DNA(rDNA)保守序列设计引物行PCR扩增鉴定吴茱萸DNA及其质量。并确定提取方法中最佳样本含量和β-巯基乙醇浓度。结果:改良CTAB法提取石虎、疏毛吴茱萸总DNA呈白色,A260/A280为1.721~1.886,DNA分子完整,约20kb左右,PCR扩增条带清晰、明亮,无杂带和脱尾。并确定0.10g为最佳样本量,2.0%为最佳β-ME浓度。结论:石英砂研磨简便、迅速、均匀,该实验所建立的改良CTAB法可有效避免次生代谢物的氧化褐变,是一种小量、快速提取吴茱萸叶DNA优化方法。 相似文献
9.
基因工程菌里氏木霉染色体DNA的提取方法 总被引:15,自引:1,他引:14
研究基因工程菌株里氏木霉(Trichoderma Teesei)染包体DNA的提取方法。采用冷冻研磨CTAB法、氯化苄SDS法和冷冻研磨SDS法三种提取DNA的力法。通过琼脂糖凝胶电泳埘提取的DNA进行检测。结果表明:冷冻研磨CTAB法更适合此类DNA的提取。对冷冻研磨CTAB法提取条件进行了优化。用该法提取的DNA上的外源基因t—PAcDNA部分片段进行PCR扩增,获得良好结果。用本实验冷冻研磨CTAB法提取的DNA完全适用于PCR和其它的分子生物学操作的要求。 相似文献
10.
11.
药用植物艾纳香基因组DNA提取方法研究 总被引:3,自引:0,他引:3
以药用植物艾纳香为研究对象,以-20℃保存、4℃保存、室温自然干燥和硅胶干燥四种样品保存方式,并采用SDS法、CTAB法、SDS-CTAB法和改良CTAB法4种不同的基因组DNA提取方法进行了对比试验,以期建立艾纳香的较好的样品保存方法和基因组DNA提取方法。结果表明,-20℃保存是艾纳香的较理想的样品保存方式;改良CTAB法是艾纳香基因组DNA提取较适宜的方法,该方法提取的DNA经紫外检测,其A_(260)/A_(280)为1.8左右,明显优于SDS法(1.1~1.5)、CTAB法(1.2~1.5)和SDS-CTAB法(1.4~1.6),琼脂糖凝胶电泳、酶切检测和PCR扩增也得出了同样的结论。 相似文献
12.
13.
14.
提取得到高质量的DNA样品是进行分子生物学研究的必要前提。为了找到一种适用于提取涡虫基因组DNA的常规方法,我们以东亚三角头涡虫为材料,分别用改良的CTAB法、SDS法、SDS-蛋白酶K法对涡虫的基因组DNA进行了制备,并对3种方法制备的涡虫基因组DNA进行了检测与比较。根据比较结果,我们认为改良的CTAB法最适合于涡虫基因组DNA的快速制备,为涡虫的分子生物学研究打下了基础。 相似文献
15.
DNA is one of the most basic and essential genetic materials in the field of molecular biology.To date,isolation of sufficient and good-quality DNA is still a challenge for many plant species,though various DNA extraction methods have been published.In the present paper,a recycling DNA extraction method was proposed.The key step of this method was that a single plant tissue sample was recycled for DNA extraction for up to four times,and correspondingly four DNA precipitations(termed as the 1st,2nd,3rd and 4th DNA sample, respectively) were conducted.This recycling step was integrated into the conventional CTAB DNA extraction method to establish a recycling CTAB method.This modified CTAB method was tested in eight plant species,wheat,sorghum,barley,corn,rice,Brachypodium distachyon,Miscanthus sinensis and tung tree.The results showed that high-yield and good-quality DNA samples could be obtained by using this new method in all the eight plant species.The DNA samples were good templates for PCR amplification of both ISSR and SSR markers.The recycling method can be used in multiple plant species and can be integrated with multiple conventional DNA isolation methods,and thus is an effective and universal DNA isolation method. 相似文献
16.
一种高效的哺乳动物粪便DNA提取通用方法 总被引:2,自引:0,他引:2
以粪便为材料提取动物DNA进行动物保护遗传学和分子生态学研究的关键是能否提取到高质量的粪便DNA.然而提取方法通用性不好和产物质量不高等问题阻碍了粪便DNA分析技术的推广.本文介绍的改进型十六烷基三甲基溴化铵提取法可广泛适用于各食性哺乳动物粪便DNA提取,在11种不同食性动物的粪便DNA提取实验中验证了它的可靠性和通用性.本方法成本低廉(3元/样),用实验室常规试剂即可完成粪便DNA提取,其产物纯度高于专用试剂盒QIAamp DNA Stool Kit,在拥有超过专业试剂盒提取效果的同时尽可能的降低了实验成本,有利于粪便DNA技术的推广. 相似文献
17.
改进的SDS-CTAB法提取濒危植物连香树总DNA 总被引:17,自引:0,他引:17
对珍稀濒危植物连香树(Cercidiphyllum japonicum)的6种总DNA提取方法进行了对比试验,结果表明改进的SDS-CTAB法更适合于连香树总DNA提取。该方法提取的DNA经紫外消光值检测,其A260/A280为1.8532,优于CTAB法(1.4872)、SDS法(1.3552)、PVP法(1.5079)、尿素法(1.1858)和高盐低pH法(1.4534)。琼脂糖凝胶电泳和PCR扩增结果也得出同样的结论。 相似文献