MHT和mCIM试验检测肠杆菌科金属碳青霉烯酶效能的评价

目的探讨改良Hodge试验(MHT)及改良碳青霉烯灭活试验(mCIM)检测肠杆菌科细菌金属碳青霉烯酶的应用价值。方法 VITEK 2Compact全自动细菌鉴定及药敏系统进行细菌鉴定和药敏试验,筛选2015-2017年非重复临床分离的碳青霉烯类耐药的肠杆菌科细菌,MHT及mCIM进行产碳青霉烯酶表型确证试验,PCR检测常见的金属碳青霉烯酶IMP-4、IMP-8、VIM-1、VIM-2、NDM基因。比较MHT及mCIM对肠杆菌科金属碳青霉烯酶的检测效能。结果本实验共收集40株临床分离菌株,MHT阳性36株,阳性率90.0%。mCIM阳性39株,阳性率为97.5%。PCR产物测序Blast比对证实4株为产IMP酶菌株,5株产NDM型菌株,未检测到VIM基因。MHT试验检测IMP酶的灵敏度、特异性、阳性预测值、阴性预测值分别为100.0%、11.1%、11.1%、100.0%,MHT检测NDM酶分别为40.0%、2.9%、5.6%、25.0%。mCIM检测IMP酶的灵敏度、特异性、阳性预测值、阴性预测值分别100.0%、2.8%、10.3%、100.0%,mCIM检测NDM型分别为100.0%、2.9%、12.8%、100.0%。结论 MHT及mCIM检测肠杆菌科细菌产金属碳青霉烯酶具有良好的灵敏度,但特异性偏低,应结合分子生物学方法进行检测,为感染控制提供保障。     

外科血培养标本中病原菌分布及耐药性分析

目的了解中山大学附属第一医院外科血标本中病原菌的菌种分布及常见菌株的耐药性。方法血标本用Bact/A lert-120全自动血培养仪进行血培养,阳性血培养转种后用VITEK-60 AMS细菌鉴定仪鉴定,用K-B法进行药敏试验。结果2002年1月至2005年12月血培养标本中共分离出病原菌256株,阳性率为10.6%。122株(47.7%)为革兰阴性杆菌,其中肠杆菌科细菌占72.1%(88/122),非发酵菌占27.9%(34/122);113株(44.1%)为革兰阳性球菌,其中葡萄球菌属占51.3%(58/113),肠球菌占38.1%(43/113);真菌21株(8.2%)。血培养中的革兰阴性杆菌对亚胺培南、美洛培南治疗敏感;革兰阳性球菌对万古霉素和替考拉宁敏感。结论肠杆菌科细菌和葡萄球菌是外科血培养中的主要病原菌,其耐药现象严重,宜根据药敏结果选用敏感抗菌药物治疗。     

通过葡萄糖醛酸酶-半乳糖苷酶-色氨酸酶(GGT)试验快速检定大肠杆菌的

本文报告用纸片法检查376株细菌产生葡萄糖醛酸酶、半乳糖苷酶和色氨酸酶的能力(GTT试验),97%的大肠杆菌,47.4%的志贺氏菌,41.1%的沙门氏菌能产生葡萄糖醛酸酶。肠杆菌科的其它细菌,包括枸橼酸杆菌,产气肠杆菌,阴沟肠杆菌,蜂窝哈夫尼亚菌,肺炎克雷伯氏菌,爱德华氏菌,沙雷氏菌属,变形杆菌,摩根氏菌属,司徒氏普鲁菲登斯菌(一株例外),雷极氏普鲁菲登斯菌和小肠结肠炎耶氏菌均不产生葡萄糖醛酸酶,假单胞菌属中的绿脓杆菌、粪产碱杆菌以及弧菌科的类志贺邻单胞菌也为阴性。132株大肠杆菌中,90.9%的菌株,其     

禽蛋表面肠杆菌的分布及其喹诺酮耐药基因的检测

调查北京市禽类市场禽蛋表面肠杆菌的分布,及其喹诺酮耐药基因携带状况。共采集禽类市场禽蛋表面涂抹物标本65份,经肠杆菌SS培养基上培养,根据形态和颜色不同,获得108个单菌落,鉴定为11个种或属,构成比最多的前3个种属分别是埃希氏菌属(42.6%),克雷伯菌(17.6%)和假单胞菌(12.0%)。在所有108株菌中,共30株菌(27.8%)检测到喹诺酮(qnr)耐药基因,其中qnrBm阳性率为23.2%,qnrAm阳性率为6.5%,但未检测到qnr Sm基因;qnrAm与qnrBm同时呈阳性的有2株菌。按种属不同,除泛菌属外,其他10个种属的细菌均检测到喹诺酮耐药基因,最多的为埃希氏菌属(8株),其次为柠檬酸菌属(6株),以及普罗威登斯菌(3株)和克雷伯菌(3株)。得出结论 :北京市禽类市场禽蛋表面携带的肠杆菌种类较多,喹诺酮耐药基因分布较广,相关部门应加强对禽蛋中肠杆菌的监测和用药管理。     

mCIM试验检测临床产碳青霉烯酶革兰阴性杆菌的应用价值

目的评估改良碳青霉烯灭活试验(mCIM)在检测临床产碳青霉烯酶革兰阴性杆菌中的应用价值。方法采用mCIM、改良Hodge(MHT)及Carba NP试验分别检测106株碳青霉烯酶基因阳性的革兰阴性杆菌(36株肠杆菌科细菌、26株铜绿假单胞菌及44株鲍曼不动杆菌),并比较差异。同时,收集湘雅医院2016年1月-12月临床分离的非重复性耐碳青霉烯类革兰阴性杆菌106株,同期随机选取100株分离的碳青霉烯类敏感菌株作为对照组,mCIM试验检测碳青霉烯酶,PCR检测碳青霉烯酶基因,分析其敏感性及特异性。结果 (1)106株碳青霉烯酶基因阳性菌株,mCIM试验:肠杆菌科细菌的敏感性、特异性为88.9%(32/36),铜绿假单胞菌均为阴性。MHT试验:肠杆菌科细菌的敏感性、特异性为77.8%(28/36),铜绿假单胞菌的敏感性、特异性为69.2%(18/26)。Carba NP试验:肠杆菌科细菌的敏感性、特异性为97.2%(35/36),铜绿假单胞菌的敏感性、特异性为57.7%(15/26)。鲍曼不动杆菌3种方法均为阴性。肠杆菌科细菌中,MHT与Carba NP试验差异有统计学意义(χ~2=6.222,P=0.028),MHT与mCIM试验差异无统计学意义(χ~2=1.600,P=0.343),Carba NP与mCIM试验差异无统计学意义(χ~2=1.934,P=0.357);铜绿假单胞菌中,MHT与Carba NP试验阳性,二者差异无统计学意义(χ~2=0.746,P=0.565)。(2)144株临床分离肺炎克雷伯菌(碳青霉烯类耐药及敏感菌株分别为44株、100株),采用美罗培南和亚胺培南分别做mCIM试验,其敏感性和特异性均为100%,且与PCR的结果一致。结论 mCIM试验在肠杆菌科细菌中敏感性高、特异性强,操作简单,结果易于判断,具有良好的临床应用价值。     

慢性阻塞性肺病患者下呼吸道感染革兰阴性杆菌分布及耐药性分析

了解慢性阻塞性肺病(COPD)下呼吸道致病性革兰阴性杆菌的分布及耐药情况。收集江苏省宝应县人民医院2011年1月至2013年7月COPD患者下呼吸道标本,培养分离出的革兰阴性细菌,采用API试剂进行细菌鉴定及药敏试验,统计分析其临床分布及耐药性。共分离出355株革兰阴性细菌,β-内酰胺酶(ESBLs)在大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌检出率分别为37.6%和32.9%,碳青霉烯类对肠杆菌科细菌和产ESBLs菌株和鲍曼不动杆菌属的抗菌活性最强,耐药率为0~6.2%,对阿米卡星、头孢哌酮/舒巴坦和哌拉西林/舒巴坦较敏感。铜绿假单胞菌对碳青霉烯类耐药率为23.7%;嗜麦芽窄食单胞菌对碳青霉烯类高度耐受,耐药率为100%。革兰阴性杆菌为COPD患者临床最常见致病菌,碳青霉烯类对除嗜麦窄食单胞菌外的其他革兰阴性细菌具有较好的抗菌活性。     

Vitek-AMS鉴定临床细菌的应用研究

目的探讨Vitek-AMS对临床细菌鉴定的应用价值。方法对玉溪市人民医院1999年至2008年临床分离11 537株细菌(临床株)和省、部级临床检验中心下发微生物学室间质量评价鉴定菌种(参考株)的Vitek-AMS鉴定结果作对比分析。结果 11 537株临床分离菌中,不能鉴定细菌8株(0.07%);除外传染病因子,鉴定到属细菌114株(1.62%),鉴定到种(含亚种、物生型)细菌6 908株(98.38%)。共有64属193种。细菌类型的分布革兰阴性杆菌革兰阳性球菌酵母菌革兰阳性杆菌厌氧菌革兰阴性球菌。用参考菌种作比较,Vitek鉴定种的符合率为83.08%(54/65),属的符合率为98.46%(64/65);其中革兰阴性杆菌符合率最高(100%,24/24),酵母菌类符合率最低(66.67%,14/21)。7种鉴定卡菌种的阳性检出率平均为56.80%(234/412),其中GPI卡最高(100%),NHI卡最低(13.33%);但应用机会最多是GNI+卡。Vitek-AMS检测葡萄球菌产β-内酰胺酶阳性率为88.89%,大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产ESBLs阳性率分别为59.74%和32.20%。结论 Vitek-AMS的应用为临床细菌学检验提供了一种高效、快速、可靠的实验方法;但对于个别菌种、细菌酶的检测必要时应以参考方法确认。     

宁波地区肠杆菌科细菌碳青霉烯酶基因的检测研究

目的对宁波地区耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌的耐药情况和碳青霉烯酶耐药基因进行研究了解。方法收集2010年1月至11月耐亚胺培南(IPM)、美罗培南(MEM)或厄他培南(ETP)的肠杆菌科菌株进行Hodge试验确认,对于阳性试验菌株PCR同时检测blaKPC、blaNDM-1、blaIMI-1、blaGES、blaSME、blaNmcA和blaSHV-387种基因。结果共收集到肠杆菌科细菌256株,其中耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌16株,占6.1%;采用改良Hodge试验确认阳性10株,占62.5%株。PCR检测显示10株均携带有blaKPC,其中肺炎克雷伯菌6株,产气肠杆菌2株,阴沟肠杆菌2株。结论宁波地区产blaKPC型碳青霉烯酶是肠杆菌科细菌耐碳青霉烯类药物的关键因素,其编码基因位于可转移质粒进行传播使得目前的耐药情况越来越严峻。     

草鱼肠道纤维素降解细菌的分离与鉴定简

为更好地弄清草鱼(Ctenopharyngodon idella)肠道纤维素降解细菌的种类,采用羧甲基纤维素(CMC)作为唯一碳源的选择性培养基,分别从草鱼肠道内容物和肠道黏膜中分离到了40株产纤维素酶细菌。16S rRNA基因序列的分析结果显示,大多数产纤维素酶细菌为气单胞菌属(Aeromonas)的种类,其次为肠杆菌属(Enterobacter)的细菌以及未经分离纯培养的细菌(Uncultured bacterium)。进一步研究细菌产纤维素酶能力发现,纤维素酶活性显著性高于其他菌株的分别是A.veronii MC2、A.veronii BC6、肠杆菌科(Enterobacteriaceae)中一种未经分离纯培养的细菌BM3(Uncultured bacterium BM3)和A.jandaei HC9。草鱼肠道中简答气单胞菌(A.jandaei)、类志贺邻单胞菌(Plesiomonas shigelloides)、阴沟肠杆菌(E.cloacae)以及产气肠杆菌(E.aerogenes)是被作为产纤维素酶细菌的首次报道。     

养殖泥螺体内细菌菌群组成及分析

养殖泥螺样品体内需氧平板菌落数为 7 3× 1 0 5～ 2 8× 1 0 6 个 /g。从泥螺体内共分离获得 2 1 7株细菌 ,88 5 %是革兰氏阴性杆菌。优势菌属是肠杆菌科 (Enterobacteriaceae) 61株、气单胞菌属 (Aeromonas) 58株、弧菌属 (Vibrio) 2 7株和假单胞菌属 (Pseudomonas) 2 1株。结果表明 ,每批泥螺样品的细菌总数均超出卫生标准 1～ 2个数量级 ,7月和 9月样品的大肠菌群数超出了规定的指标 ,应重视泥螺收捕后的消毒处理环节。泥螺体内细菌菌群由 1 0个菌属组成 ,涂泥中占优势的芽孢杆菌属细菌在泥螺体内却是少量的 ,反映泥螺对体内微生物组成与数量有一定调节控制作用。     

养殖泥螺体内细菌菌群组成及分析*

养殖泥螺样品体内需氧平板菌落数为 7 3× 1 0 5～ 2 8× 1 0 6 个 /g。从泥螺体内共分离获得 2 1 7株细菌 ,88 5 %是革兰氏阴性杆菌。优势菌属是肠杆菌科 (Enterobacteriaceae) 61株、气单胞菌属 (Aeromonas) 58株、弧菌属 (Vibrio) 2 7株和假单胞菌属 (Pseudomonas) 2 1株。结果表明 ,每批泥螺样品的细菌总数均超出卫生标准 1～ 2个数量级 ,7月和 9月样品的大肠     

肠杆菌科细菌碳青霉烯酶基因的检测

目的了解余姚地区耐碳青霉烯类药物肠杆菌科细菌的耐药情况和碳青霉烯酶耐药基因类型。方法收集2014年3月至12月耐亚胺培南和厄他培南的肠杆菌科细菌18株,进行Hodge试验确认。对于阳性试验菌株采用PCR法检测bla_(KPC)、bla_(NDM-1)、bla_(MH)、bla_(GES)、bla_(SME)、bla_(NmcA)和bla_(SHV-38)七种基因。结果 18株耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌经改良Hodge试验确认阳性11株,占61.1%。经PCR检测显示11株均携带有bla_(KPC)基因,其中肺炎克雷伯菌6株,大肠埃希菌3株,阴沟肠杆菌2株。结论余姚地区耐碳青霉烯类药物肠杆菌科细菌的耐药机制主要是bla_(KPC)型碳青霉烯酶。     

2011年、2013年和2016年医院内获得性血流感染常见病原菌分布及其耐药性分析

动态监测2011年、2013年和2016年我国不同地区医院内获得性血流感染病原菌分布及耐药进展趋势。从全国10个城市回顾性收集血流感染病原菌非重复性株,采用琼脂稀释法或微量肉汤稀释法进行药物敏感性试验,采用Whonet 5.6软件对药敏试验结果进行分析。收集的2 248株血流感染病原菌中革兰阴性杆菌为1 657株 (占73.7%),革兰阳性球菌为591株 (占26.3%)。分离率排名前五的病原菌依次为大肠埃希菌 (32.6%,733株/2 248株)、肺炎克雷伯菌 (14.5%,327株/2 248株)、金黄色葡萄球菌 (10.0%,225株/2 248株)、鲍曼不动杆菌 (8.7%,196株/ 2 248株) 和铜绿假单胞菌 (6.2%,140株/2 248株)。血流感染分离的革兰阴性杆菌对抗菌药物体外敏感率较高的抗菌药物依次为粘菌素 (96.5%,1 525株/1 581株,不包括天然耐药菌株)、替加环素 (95.6%,1 375株/1 438株,不包括天然耐药菌株)、头孢他啶/克拉维酸 (89.2%,1 112株/1 246株)、阿米卡星 (86.4%,1 382株/1 599株) 和美罗培南 (85.7%,1 376株/1 605株);革兰阳性球菌对抗菌药物体外敏感率较高的抗菌药物依次为替加环素、替考拉宁和达托霉素 (敏感率均为100.0%)、万古霉素和利奈唑胺 (敏感率均为99.7%)。2011年、2013年和2016年产超广谱β-内酰胺酶肠杆菌科细菌分离率分别为50.6% (206株/407株)、49.8% (136株/273株) 和38.9% (167株/429株);碳青霉烯不敏感肠杆菌科细菌分离率分别为2.2% (9株/408株)、4.0% (16株/402株) 和3.9% (17株/ 439株);多重耐药鲍曼不动杆菌分离率分别为76.4% (55株/72株)、82.7% (43株/52株) 和87.5% (63株/72株),多重耐药铜绿假单胞菌分离率分别为9.8% (5株/51株)、20.0% (7株/35株) 和13.0% (7株/54株);甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌的分离率分别为51.9% (41株/79株)、29.7% (19株/64株) 和31.7% (26株/82株)。屎肠球菌和粪肠球菌中高水平庆大霉素耐药株分离率分别为43.2% (48株/111株) 和40.9% (27株/66株)。碳青霉烯不敏感肠杆菌科细菌中肺炎克雷伯菌居首位,占57.1% (24株/42株) 。肠杆菌科细菌中分离出30株替加环素不敏感株,其中肺炎克雷伯菌占76.7% (23株/30株);分离出粘菌素耐药肠杆菌科细菌39株,其中大肠埃希菌、阴沟肠杆菌和肺炎克雷伯菌分别占43.6% (17株/39株)、35.9% (14株/39株) 和15.4% (6株/39株)。医院获得性血流感染病原菌主要为革兰阴性杆菌 (以大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌为主),其对替加环素、粘菌素和碳青霉烯类药物的敏感率较高;革兰阳性球菌中分离率最高的为金黄色葡萄球菌,其次为屎肠球菌,这两种细菌对替加环素、达托霉素、利奈唑胺、万古霉素和替考拉宁的敏感率较高。粘菌素耐药肠杆菌科细菌、替加环素不敏感肠杆菌科细菌、利奈唑胺或万古霉素不敏感革兰阳性球菌的分离,警示临床高度关注,仍需动态监测耐药进展趋势。     

吡咯烷酮芳胺酶实验在肠杆菌鉴定中的应用

目的：利用吡咯烷酮芳胺酶（L－Pyrrolidonyl-β－naphthylamide,PYR)实验快速鉴别肠杆菌科细菌。方法：检测细菌的PYR,以色原为底物,采用斑点法,对115株肠杆菌科细菌进行鉴定,结果：大肠埃希菌,弧菌属,奇异变形杆菌,沙门菌属均为阳性,枸椽酸杆菌,肠杆菌属,克雷伯菌属均为阴性,结论：应用PYR水解实验能简便,快速区别枸橼酸杆菌与大肠埃希菌和沙门菌,尤其鉴别费劳地枸橼酸杆菌和沙门菌更为有用。     

蜜蜂成虫工蜂肠道可培养细菌群落结构分析

【目的】研究2种蜜蜂(健康意大利蜜蜂和健康中华蜜蜂)成虫工蜂肠道可培养细菌的群落结构组成。【方法】利用16S r RNA基因的聚合酶链式反应-变性梯度凝胶电泳(PCR-DGGE)分析技术,结合菌落形态观察和生理生化特征鉴定细菌种类。【结果】从2种蜜蜂成虫工蜂肠道200株可培养细菌得到18种不同细菌遗传型,分属于肠杆菌科(Enterobacteriaceae)、弧菌科(Vibrionaceae)和肠球菌科(Enterococcaceae)3个科。其中肠杆菌科是肠道可培养细菌最优势的细菌种类。同样以序列相似性大于97%的菌株归为相同细菌种类为标准,找到了2种蜜蜂可培养细菌的共有菌种,结合菌落形态观察和生理生化特征鉴定,确定肠道可培养细菌为肠杆菌属8株,克雷伯氏菌属1株,肠球菌属2株,以及气单胞菌属1株。【结论】通过研究健康意大利蜜蜂和中华蜜蜂成虫工蜂肠道可培养细菌群落结构组成,可为开展蜜蜂的微生态研究提供基础性资料。     

外科重症监护病房革兰阴性杆菌的菌群分布及耐药性分析

目的监测外科重症监护病房(SICU)革兰阴性杆菌的菌群分布及耐药性。方法对中山大学附属第一医院SICU 2007年到2008年分离的革兰阴性杆菌及其耐药性进行回顾性分析。结果共分离到革兰阴性杆菌279株,前5位为大肠埃希菌(21.9%)、铜绿假单胞菌(20.8%)、鲍曼不动杆菌(15.8%)、肺炎克雷伯菌(11.8%)和嗜麦芽窄食单胞菌(11.5%)。肠杆菌科细菌对碳青霉烯类抗生素敏感性最高,尚无耐药株;非发酵菌对阿米卡星耐药率最低,对其他抗生素耐药性高。结论 SICU革兰阴性杆菌的耐药性有上升的趋势,应加强细菌耐药性监测,合理使用抗生素,防止耐药菌株的传播。     

肠杆菌科细菌医院感染调查及耐药性分析

目的了解我院肠杆菌科细菌医院内感染情况及临床特点,为临床治疗提供参考依据。方法回顾性分析2016年1月～2017年8月我科临床分离的肠杆菌科细菌的临床分布特点、院内感染与耐药情况。结果在820株肠杆菌科细菌中,大肠埃希菌446株(54.39%),肺炎克雷伯菌158株(19.27%),阴沟肠杆菌91株(11.09%),产气肠杆菌47株(5.73%),其他种类肠杆菌科细菌78株(9.51%)。从痰液中分离出380株(46.34%)占比最大,其次是尿液183株(22.32%)、支气管灌洗液63株(7.68%)。大肠埃希菌对氨苄西林、哌拉西林、四环素、头孢唑啉和复方新诺明有较高耐药率,分别为93.05%(415/446)、84.75%(378/446)、83.18%(371/446)、74.89%(334/446)和73.09%(326/446);阴沟肠杆菌对亚胺培南、美罗培南、阿米卡星的耐药率最低(9.89%)。结论肠杆菌科细菌医院内的感染以大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和阴沟肠杆菌为主,对常用抗菌药物呈现不同程度耐药,而对碳青霉烯类最敏感,其次是阿米卡星,但碳青霉烯类药已出现耐药株,故应加强对肠杆菌科细菌耐药性的监测,以指导临床合理使用抗菌药,控制医院感染的发生。     

养殖大黄鱼细菌菌群分离鉴定与分析*

对新鲜大黄鱼感官、化学、微生物品质和细菌菌群组成进行定性和定量分析。结果表明,细菌总数为5．51±0．25log10cfu／g,挥发性盐基氮为7．84±2．25mg／100g。分离获得279株细菌,84．2％是革兰氏阴性菌,少量革兰氏阳性菌被检出(6．1％)。优势菌群是肠杆菌科(14．7％)、气单胞菌属(12．5％)、不动杆菌属(11．5％)、摩氏杆菌属(11．1％),并出现了一定比例的假单胞菌属、嗜麦芽窄食单胞菌和其他细菌。肠杆菌科出现较多,表明大黄鱼细菌污染主要来自养殖海区,受非原有菌污染较重,应引起重视。     

养殖大黄鱼细菌茵群分离鉴定与分析

对新鲜大黄鱼感官、化学、微生物品质和细菌菌群组成进行定性和定量分析。结果表明,细菌总数为5．51±0．25log10cfu／g,挥发性盐基氮为7．84±2．25mg／100g。分离获得279株细菌,84．2％是革兰氏阴性菌,少量革兰氏阳性菌被检出(6．1％)。优势菌群是肠杆菌科(14．7％)、气单胞菌属(12．5％)、不动杆菌属(11．5％)、摩氏杆菌属(11．1％),并出现了一定比例的假单胞菌属、嗜麦芽窄食单胞菌和其他细菌。肠杆菌科出现较多,表明大黄鱼细菌污染主要来自养殖海区,受非原有菌污染较重,应引起重视。     

肠杆菌共同抗原的研究与进展

<正> 肠杆菌共同抗原(EnterobacterialCommon Antigen,ECA)是细菌的一种表面抗原。首先由等人在研究尿道感染的大肠杆菌等过程中发现的。肠杆菌共同抗原(ECA)几乎存在于所有肠杆菌科细菌中,而其它非肠杆菌科细菌一般不产生这种抗原。ECA的这种特异性使得它在临床诊新及细菌分类上具有重要意义。过去由于对其化学及遗传学本质缺乏认识以及鉴定上的混乱,使ECA的研究进展较慢。近来的研究主要集中在ECA的化学结构,免疫机制和遗传学特性等方面。本文就这些内容进行介绍,同时对过去有关研究作适当简介。