用染料修饰吐温80液—固萃取体系从猪心肌匀浆液中分离纯化心肌黄酶

用三嗪类染料 Ｃｉｂａｃｒｏｎ Ｂｌｕｅ Ｆ３Ｇ－Ａ修饰的吐温８０,与吐温８０、硫酸被构成液－固萃取体系,从猪心肌匀浆液中分离纯化心肌黄酶。研究了吐温８０染料修饰物在吐温８０相中所占的比例、分相盐浓度、溶液的酸度、匀浆液的加入量等对匀浆液中酶及杂蛋白在两相中分配的影响。在室温条件下,酶选择性地进入吐温８０固相,杂蛋白主要留在盐水相。匀浆液中心肌黄酶的酶活力平均收得率为８１．４％,一步纯化倍数为６．６。降低盐浓度,提高盐水相酸度,能使酶从吐温８０固相反萃到盐水相。     

枯草芽孢杆菌JA抗菌物特性的研究及抗菌肽的分离纯化

枯草芽孢杆菌JA分泌物中具有抑菌作用的粗提液通过DEAESepharose FF、SOURCE 15 PHE、Sephacry1 S200HR和反相HPLC多步柱层析分离纯化后,获得3种对水稻纹枯和小麦赤霉病菌均有抑菌作用的抗菌肽AFP1、AFP2和AFP3。MALDITOF质谱法测得其分子量分别为1462.645D、1476.390D和1490.530D。氨基酸组成分析结果表明,AFP1和AFP3由苏氨酸、异亮氨酸、酪氨酸、脯氨酸等多种氨基酸组成。目标产物热稳定性好、对蛋白酶有一定的耐受性,推断很可能是低分子量的环状脂肽。     

一种新的促心肌肥大细胞因子——心脏营养素

心脏营养素１（ｃａｒｄｉｏｔｒｏｐｈｉｎ１,ＣＴ１）是新发现的一种具有促心肌肥大作用的活性物质,为白细胞介素６（ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎｓ６,ＩＬ６）细胞因子家族的新成员,其受体由三部分组成,包括ｇｐ１３０、ｇｐ１９０和分子量为８０ｋＤ的ＣＴ１特异受体。ＣＴ１与受体结合,可促进未成熟心肌细胞的存活和增殖,并诱导心肌细胞肥大,可能在多种心血管疾病所致的心肌肥大和心力衰竭的发病中具有重要的意义     

白浆土-植物系统营养物质转化机制及其有效性研究Ⅱ.白浆土无机磷形态变化

采用室内培养和微区试验研究表明,施入白浆土中无机磷在短时间内（２４ｈ、８ｄ）主要向ＦｅＰ和ＡｌＰ转变,较长时间后（８０ｄ）,ＡｌＰ向ＦｅＰ转化,ＣａＰ变化较弱,土壤中无机磷形态转化与白浆土本身的土壤属性具有密切关系．施用有机肥改变了土壤中无机磷形态的转化过程,其与土壤中的铁、铝氧化物反应形成的“Ａｌ有机质Ｐ”和“Ｆｅ有机质Ｐ”是作物较易利用的有效Ｐ源     

阿魏属挥发油成分及其分类学意义

利用ＧＣＭＳ计算机联用方法从我国阿魏属（ＦｅｒｕｌａＬ．）１５种１变种根部挥发油中分离鉴定出２１４种成分,其中广布成分有２２种。挥发油成分中８０％是萜类,其次是多硫化合物。萜类中主要有单萜和倍半萜两大类,均以环化结构成分为主。通过全成分和萜类成分的多种聚类分析,对样品进行归类,结合形态特征、核型、黄酮成分等已有资料以及地理分布,讨论了挥发油成分在阿魏属分类中的意义,同时对所分析种类进行了类群划分和调整     

SA脂质体介导DNA转染昆虫细胞的研究

ＳＡ脂质体介导ＤＮＡ转染昆虫细胞的研究张传溪（浙江农业大学应用昆虫学研究所杭州３１００２９）吴祥甫（中国科学院上海生物化学研究所上海２０００３１）杆状病毒昆虫表达系统是８０年代发展起来的高效真核表达系统,具有表达量高,表达产物后加工较完全等优点,因...     

从木薯嫩叶直接诱导初生体细胞胚胎发生和芽的形成

以木薯（ＭａｎｉｈｏｔｅｓｃｕｌｅｎｔａＣｒａｎｔｚ）品种“南植１８８”的嫩叶为外植体,用１０～８０ｍｇ／ＬＮＡＡ能直接诱导初生体细胞胚胎发生和芽的形成。与用４ｍｇ／Ｌ２,４Ｄ诱导木薯嫩叶产生初生体细胞胚及其植株再生相比,ＮＡＡ具有以下特点：它不仅能直接诱导初生体细胞胚发生,而且能直接诱导芽的形成;而２,４Ｄ只能诱导体细胞胚胎发生而不能诱导芽的形成。ＮＡＡ诱导初生体细胞胚较快,在培养９～１３ｄ后就能见到初生体细胞胚的形成,在培养１０～１４ｄ就能见到芽的形成;而２,４Ｄ所诱导的体细胞胚至少在培养１５ｄ后才能见到。ＮＡＡ诱导的初生体细胞胚的植株再生频率可高达４８％;而２,４Ｄ所诱导的体细胞胚的再生频率只有４．１％。实验结果还证实,在供试的另外１６个木薯品种中,有１２个品种能够直接从嫩叶诱导初生体细胞胚胎发生或芽的形成。     

水母雪莲悬浮培养细胞生长和黄酮类活性成分合成

在ＭＳ培养基上进行水母雪莲（ＳａｕｓｕｒｅａｍｅｄｕｓａＭａｘｉｍ．）细胞悬浮培养,研究了摇床转速、接种量、培养液初始ｐＨ、碳源等的影响。结果表明,摇床转速为９０～１２０ｒ／ｍｉｎ,接种量为５０～８０ｇＦＷ／Ｌ,培养液初始ｐＨ５．５～６．０,对水母雪莲悬浮培养细胞生长和黄酮合成最有利。碳源以蔗糖最适合,蔗糖浓度则以４０ｇ／Ｌ较好,此时细胞生长量为１８～１９ｇＤＷ／Ｌ,总黄酮合成量可达１４２３．２５ｍｇ／Ｌ。用ＨＰＬＣ检测显示４′,５,７三羟基３′,６二甲氧基黄酮（ｊａｃｅｏｓｉｄｉｎ）和４′,５,７三羟基６甲氧基黄酮（ｈｉｓｐｉｄｕｌｉｎ）的含量分别达到总黄酮含量的２２．１１％和０．１５％。     

小鼠生态条件对Friend小鼠白血病病毒感染的影响

本文探讨了Ｆ１小鼠生态条件（鼠龄和免疫状态）对Ｆｒｉｅｎｄ小鼠白血病病毒（Ｆｒ．ＭｕＬＶ）感染的影响。利用对Ｆｒ．ＭｕＬＶ抗性的Ｆｖ４小鼠（含Ｆｖ４抗性基因纯合子的ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠）与对Ｆｒ．ＭｕＬＶ敏感的ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠交配，获得含Ｆｖ４抗性基因杂合子的Ｆ１小鼠（ＢＡＬＢ／Ｃ×Ｆｖ４）。然后经小鼠腹腔接种Ｆｒ．ＭｕＬＶ病毒液进行攻击，并检查不同鼠龄和免疫状态下的Ｆ１小鼠对Ｆｒ．ＭｕＬＶ的敏感性，以阐明Ｆ１小鼠的鼠龄和免疫状态对Ｆｒ．ＭｕＬＶ感染的影响。结果表明，新生Ｆ１小鼠可发生Ｆｒ．ＭｕＬＶ感染，脾脏中有大量病毒增殖，并引起白血病；免疫抑制剂Ｆｋ５０６投与下的成年Ｆ１小鼠亦可发生Ｆｒ．ＭｕＬＶ的感染，脾脏中有病毒增殖，但不引起白血病；而新生或成年Ｆｖ４小鼠以及成年Ｆ１小鼠可抵抗Ｆｒ．ＭｕＬＶ的感染，脾脏中无病毒增殖，不发病。说明Ｆ１小鼠的鼠龄和免疫状态等生态条件可影响其对Ｆｒ．ＭｕＬＶ感染的敏感性，并且可影响Ｆｖ４基因抗病毒作用。     

肺活检材料的4种肿瘤标记物表达及与肺癌预后的关系

应用增殖细胞核抗原 （ＰＣＮＡ）、ｒａｓ－ Ｐ２１、Ｐ５３ 单克隆抗体和ＣｅｒｂＢ２ 多克隆抗体, 对７１ 例肺癌的纤支镜活检标本和１０ 例正常肺组织进行免疫组织化学染色研究。结果发现： １０ 例正常肺组织均为阴性表达。７１ 例肺癌中, 上述４ 种抗体的阳性表达率分别为： ７０４２％ 、８０２８％ 、５６３４％ 和８１６９％ 。除ＣｅｒｂＢ２ 与肺癌分型相关外, 均与肺癌分型、分化及ＴＮＭ 分期无关。但与预后均呈负相关。结果表明： 上述４ 种抗体是有效的、可作为判断肺癌预后的肿瘤标记物     

显齿蛇葡萄提取物体外抑菌试验的研究

使用药敏纸片法、试管二倍稀释法测定了显齿蛇葡萄对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、鸡沙门氏杆菌、粪肠球菌、阴沟肠杆菌等5种细菌的抑菌效果,结果表明:显齿蛇葡萄的根、茎、幼叶提取物对5种细菌均有抑菌作用,以幼叶提取物抑菌效果最强,说明显齿蛇葡萄具有广谱高效的抑菌作用,但不同器官的抑菌作用有较大的差别。     

利用短小芽孢杆菌的抑菌作用对布氏杆菌属进行分型鉴别

自1979年发现这株短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)蒙字1号对布氏杆菌属(Brucczk)有抑菌作用后,又用104株牛、羊、猪三型布氏杆菌作了进一步抑菌试验。结果发现,对猪型布氏杆菌有较强的抑菌作用;对部分牛型布氏杆菌也有抑菌作用,但弱于前者;对羊型布氏杆菌无明显抑菌作用,这就提供了应用微生物抑菌作用对布氏杆菌属进行分型鉴定的可能性。     

吐温80 在深部脏器肿瘤热化疗中的应用研究

目的：研究热增敏剂吐温80在深部肿瘤热化疗中的临床应用疗效。方法：采用吐温80合并热化疗综合治疗晚期肿瘤118例,并与同时期未采用吐温80的热化疗组98例进行比较。膀胱癌复发5例,伴腹水、腹膜转移7例。小剂量化疗用5-FU、丝裂霉素、顺铂等行膀胱灌注或腹腔注射,吐温80浓度为0．2％。肿瘤射频热疗机,f：41MHz。平均随访时间36个月。结果：复发性膀胱癌完全缓解率达60％,血尿消失,3例在12～34月随访期间膀胱镜检查未复发;伴腹水者完全缓解率达85．7％（CR6／7）,中位生存期8．5月,腹痛、腹胀、便血等消失。治疗未引起恶心、呕吐等明显的消化道症状,肝、肾和骨髓功能损害。结论：在肿瘤的热化疗中。合用吐温80不仅可以降低化疗药物的剂量,而且降低热疗时的温度,减少毒副作用,改善症状和体征。     

污染土壤中多环芳烃生物降解的调控研究

选用温度、湿度、表面活性剂ＴＷ８０和ＣＮＰ比４个因素为调控因子,采用正交法进行周期为１５０天的实验研究．结果表明,３０天后,土壤中ＰＡＨｓ的降解率可达４４．５～７４．６％,６０天后,达７０．４～９３．７％,降解率的不同与调控条件显著相关．在此期间,降解最佳条件为４０℃,湿度２５％,ＣＮＰ比为１２０１０１,ＴＷ８０分别为２００～５００ｍｇ·ｋｇ－１．实验结束时,土壤中ＰＡＨｓ的降解率达９１．２～９９．８％．降解的最佳条件是４０℃,湿度１５％．经Ｒ值判别表明,不同时期各因子对ＰＡＨｓ降解影响有所不同．温度对ＰＡＨｓ降解影响较大,表面活性剂对土壤中ＰＡＨｓ的生物降解有调控作用．     

EF—Tumt和EF—Tsmt在不同发育阶段小鼠各组织中的表达分析

线粒体蛋白质翻译延长因子Ｔｕ和Ｔｓ（ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌｅｌｏｎｇａｔｉｏｎｆａｃｔｏｒＴｕａｎｄＴｓ,ＥＦＴｕｍｔａｎｄＥＦＴｓｍｔ）是由核基因编码的两个蛋白质,它们的功能和调控对细胞的生长发育有重要意义。采用ＥＦＴｕｍｔ和ＥＦＴｓｍｔ重组蛋白分别制备了抗ＥＦＴｕｍｔ和抗ＥＦＴｓｍｔ特异抗体并以此检测了它们在小鼠不同发育时期心肌、骨骼肌、肝、脑、脾等组织中的表达。蛋白质印迹结果表明ＥＦＴｕｍｔ和ＥＦＴｓｍｔ在各组织中的表达水平不同、有明显的组织差异性,并都受发育的调节。ＥＦＴｕｍｔ在同一发育时期各组织中的表达及随发育的变化趋势与ＥＦＴｓｍｔ基本一致。结果提示ＥＦＴｕｍｔ和ＥＦＴｓｍｔ的表达水平与组织细胞能量代谢水平密切相关,它们不仅在体内以复合体形式发挥作用,其基因表达可能受同一机制的调控。     

原发性血小板减少性紫癜与肺炎支原体感染的关系

为探讨原发性血小板减少性紫癜与肺炎支原体感染的关系,本文用富士明胶颗粒凝集法检测血小板减少性紫癜患儿血清支原体抗体（抗ＭＰＩｇＭ）。结果：３８例血小板减少性紫癜患儿１１例血清抗ＭＰＩｇＭ阳性,其中１∶８０阳性３例,１∶１６０阳性７例,１∶３２０阳性１例。揭示肺炎支原体感染可引起血小板减少性紫癜。激素及丙种球蛋白疗效差,必须给红霉素抗支原体感染治疗方可获得满意的疗效。     

高氧预适应对大鼠心肌缺血─再灌注时自由基的影响

为了解决高氧预适应（ＨｙｐｅｒｏｘｉｃｐｒｅｃｏｎｄｉｔｉｏｎｉｎｇＨＯＰ）对大鼠心肌缺血再灌注时自由基的影响,本实验将实验组大鼠放入高压氧舱内,每日吸８０－８５％氧气（１ａｔｍ）６ｈ,连续７ｄ。利用Ｌａｎｇｅｎｄｏｒｆ装置做成心肌缺血再灌注模型,采用电子自旋共振技术测定自由基含量。实验动物随机分为二组,第一组为对照组：缺血１０ｍｉｎ,再灌注６０ｍｉｎ。第二组为ＨＯＰ组：缺血１０ｍｉｎ,再灌注６０ｍｉｎ。实验观察冠脉回流液中自由基ＰＢＮ加合物含量。结果表明：在再灌注过程中,１、５、１０ｍｉｎ３个时间点,ＨＯＰ组ＰＢＮ加合物含量较对照组明显减少。提示：ＨＯＰ能减少缺血再灌注时自由基的产生。     

高氧预适应对大鼠心肌缺血损伤时抗氧化酶的影响

抗氧化酶具有减轻心肌缺血再灌注损伤的作用,在抗氧化酶中,比较重要的是超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）,谷胱甘肽过氧化物酶（ＧｌｕｔａｔｈｉｏｎｅＰｅｒｏｘｉｄａｓｅ,ＧＳＨｐｘ）和过氧化氢酶（ＣＡＴ）。为了解高氧预适应（ＨｙｐｅｒｏｘｉｃＰｒｅｃｏｎｄｉｔｉｏｎｉｎｇ,ＨＯＰ）对大鼠心肌缺血损伤时抗氧化酶的影响,本实验将实验组大鼠放入高压氧舱内,每日吸８０－８５％氧气（１ａｔｍ,１５－２０％为氮气）６ｈ,连续７ｄ。利用Ｌａｎｇｅｎｄｏｒｆ装置做成心肌缺血再灌注模型。实验动物随机分为二个部分。第一部分可逆性心肌缺血（ＨＯＰＡ组与对照Ａ组）：缺血１０ｍｉｎ,再灌注６０ｍｉｎ。观察冠脉回流液中ＳＯＤ活力,检测心肌内抗氧化酶活力（ＳＯＤ,ＧＳＨｐｘ,ＣＡＴ）。第二部分不可逆性心肌缺血（ＨＯＰＢ组与对照Ｂ组）：缺血６０ｍｉｎ,再灌注６０ｍｉｎ。测定冠脉回流液中肌酸磷酸激酶（ＣＰＫ）含量,ＳＯＤ及心肌内抗氧化酶活力。结果表明：对于可逆性心肌缺血：ＳＯＤ,ＧＳＨｐｘ活力升高;对于不可逆性心肌缺血损伤：ＨＯＰ能减少ＣＰＫ释放,ＳＯＤ活力升高。     

大鼠冷暴露过程中不同脑区和血清中单胺类递质及代谢物质的变化

用高效液相色谱电化学检测法观测了大鼠冷暴露（５±２℃,２１天）过程中下丘脑、海马、桥延脑和血清中单胺类递质及主要代谢物质含量的变化。结果显示,在冷暴露初期（２４小时）在下丘脑和血清中去甲肾上腺素、肾上腺素和多巴胺含量分别显著地减少或增加,２１天后下丘脑中去甲肾上腺素量趋于正常,肾上腺素和多巴胺仍分别明显低或高于正常水平。桥延脑中去甲肾上腺素和３甲氧基４羟基苯乙二醇的含量先增加后恢复正常,而肾上腺素和多巴胺的含量无明显变化。与之不同,下丘脑和血清中５羟色胺和５羟吲哚乙酸的含量无明显变化,而海马和桥延脑中５羟色胺和５羟吲哚乙酸的含量明显减少且一直呈低水平状态。上述脑内和血清中单胺类递质含量的不同变化反映了不同单胺类递质可能以不同的机制和时空模式参与冷应激反应和冷适应的体温调节。     

白细胞介素2(IL-2)基因和γ干扰素(IFN-γ)基因体内转染巨噬细胞对恢复化疗所致免疫功能损伤的研究

用磷酸钙——ＤＮＡ共沉淀法, 将ｐＲＥＰ８ＩＦＮγ真核表达质粒或／和ρＲＥＰ８ＩＬ２ 真核表达质粒直接注射至经大剂量化疗后的小鼠腹腔内, 成功地转染腹腔巨噬细胞（Ｍφ）。ＩＬ２ 基因和ＩＦＮγ基因联合转染Ｍφ较ＩＬ２ 或ＩＦＮγ基因转染Ｍφ, 其基因表达产物水平更高, 显著地刺激脾脏增生, 增强淋巴细胞的增殖, 增强腹腔Ｍφ的细胞毒活性, 促使腹腔Ｍφ分泌白细胞介素１ （ＩＬ１）、肿瘤坏死因子（ＴＮＦ） 和ＮＯ。结果表明, 双基因转染效果优于单基因转染, ＩＬ２ 和ＩＦＮγ基因联合转染Ｍφ更有助于由放疗、化疗所致受损的免疫功能恢复。