基因打靶进展

应用既往的基因打靶策略不能产竹核苷酸水平上的精确突变,并存在潜在的不利因素。本介绍三种新策略,即打了就走策略、标记－交换策略和应用Ｃｒｅ－ｌｏｘＰ重组系统策略。其中以应用Ｃｒｅ－ｌｏｘＰ重组系统策略最有应用和发展前景。     

反义凝血酶受体基因的表达对人ASMC增殖的影响

介入治疗后再狭窄的发生严重降低了该治疗手段的最终疗效．为探讨再狭窄的发生机理、寻找有效的预防手段,利用反义ＲＮＡ技术构建了含有部分反义凝血酶受体（ＡＴＲ）ｃＤＮＡ片段的真核表达质粒ｐｃＤＮＡ３／ＡＴＲ,并观察了其对培养的人主动脉平滑肌细胞（ＡＳＭＣ）增殖的影响．结果表明ｐｃＤＮＡ３／ＡＴＲ的瞬时转染即能显著抑制人ＡＳＭＣ的３Ｈ－ＴｄＲ参入量,且该作用与导入的ＤＮＡ量呈剂量依赖性．说明部分反义凝血酶受体基因的表达可以抑制ＡＳＭＣ的增殖     

肌肉内转内抑素基因对肿瘤生长的抑制作用

 为研究骨骼肌及肿瘤内介导的内抑素基因转移对肿瘤生长的作用 ,利用基因克隆技术构建了内抑素基因真核表达质粒 ,应用电脉冲转移法将质粒转入转肿瘤小鼠骨骼肌或肿瘤中 .结果表明 ,内抑素基因可在骨骼肌或肿瘤内表达 ,并显著抑制肿瘤生长 .这为内抑素基因在肿瘤治疗中的应用进行了探索     

Cloning and expression of 5,10-Methylenetetrahydrofolate reductase (MTHFR) gene

Ｉｔｗａｓｒｅｃｅｎｔｌｙｅｖｉｄｅｎｃｅｄｔｈａｔｍｅｔａｂｏｌｉｃｄｉｓｔｕｒｂａｎｃｅｓｏｆｆｏｌｉｃａｃｉｄａｒｅｃｌｏｓｅｌｙｒｅｌａｔｅｄｔｏｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒｄｉｓｅａｓｅｓａｎｄｂｉｒｔｈｄｅｆｅｃｔｓ.5,10ＭＴＨＦＲｉｓａｎｉｍｐｏｒｔａｎｔｅｎｚｙｍｅｉｎｔｈｅｆｏｌｉｃａｃｉｄｍｅｔａｂｏｌｉｃｓｙｓｔｅｍ.ＤｅｃｒｅａｓｅｉｎＭＴＨＦＲａｃｔｉｖｉｔｙｍａｙｉｎｄｕｃｅｔｈｅａｐｐｅａｒａｎｃｅｏｆｈｙｐｅｒｈｏｍｏｃｙｓｔｅｉｎｅｍｉａ,ｗｈｉｃｈｍａｙｃａｕｓ…     

5,10-亚甲基四氢叶酸还原酶基因的克隆和表达

同型半胱氨酸血症是心血管病和出生性缺陷的一个危险因素 .5- 1 0- 亚甲基四氢叶酸还原酶活力的降低是引起高同型半胱氨酸血症的一个重要原因 .克隆了人和大鼠的 5- 1 0 -亚甲基四氢叶酸还原酶的cDNA ,构建了人MTHFR的原核表达载体 ,在大肠杆菌中表达出MTHFR的蛋白质 .并且初步发现 ,IL- 1和同型半胱氨酸均可以促进大鼠MTHFR基因的表达     

一种新的促心肌肥大细胞因子——心脏营养素

心脏营养素１（ｃａｒｄｉｏｔｒｏｐｈｉｎ１,ＣＴ１）是新发现的一种具有促心肌肥大作用的活性物质,为白细胞介素６（ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎｓ６,ＩＬ６）细胞因子家族的新成员,其受体由三部分组成,包括ｇｐ１３０、ｇｐ１９０和分子量为８０ｋＤ的ＣＴ１特异受体。ＣＴ１与受体结合,可促进未成熟心肌细胞的存活和增殖,并诱导心肌细胞肥大,可能在多种心血管疾病所致的心肌肥大和心力衰竭的发病中具有重要的意义     

应用三元递减法筛选特异性心脏生长相关基因

心脏是由胚胎干细胞特异性分化而来的 ,但其分化的分子生物学机制尚不十分了解 .为建立一种新的筛选特异性心脏相关基因的方法 ,克隆特异性心脏生长相关基因 .从胚胎心、成年心和去胎心的胚胎中提取 m RNA,建立胎心 /成年心和胎心 /胎身两个递减性 c DNA文库 ,通过 DNA芯片和微阵列杂交筛选和克隆 ,建立了三元递减克隆的新方法 .获得了一个全长为 1 0 0 6 bp可编码1 94个氨基酸的新的与心脏生长相关的基因 ,它是 LIM家族的新成员 ,可特异性在心肌细胞表达 ,并可促进心肌细胞的生长 .结果表明 ,三元递减筛选法可以应用于寻找新的组织特异性表达的基因 .并且获得了一个新的与心脏生长相关的新基因 ,它可能在心肌生长和心肌肥厚的发生中发挥重要作用     

腺病毒相关病毒携带低密度脂蛋白受体基因对实验性高胆固醇血症的治疗作用

低密度脂蛋白受体 (LDL- R)对于血清胆固醇的清除和预防动脉粥样硬化的发生起重要作用 .用构建了含有LDL- R基因的重组腺病毒相关病毒 ,通过腺病毒包被蛋白脂质体 (Adenosome) ,转移至食饵性高脂血症家兔的肝脏内 ,证明可以降低血浆胆固醇水平 ,为高胆固醇血症的基因治疗提供一条新途径     

同型半胱氨酸/半胱氨酸诱导血管平滑肌细胞中的新cDNA

同型半胱氨酸／半胱氨酸是体内的含硫氨基酸,近年来提出它们可以诱导血管平滑肌细胞的增殖,是心血管病的一个新的独立的危险因子．但其机制尚不了解,本研究目的在于克隆同型半胱氨酸／半胱氨酸诱导的新基因．应用差异显示即ＲＮＡｍａｐｐｉｎｇ的方法,从半胱氨酸诱导的大鼠血管平滑肌细胞中,寻找有差异的条带,克隆新的ｃＤＮＡ．结果分离出７种上调和４种下调ｃＤＮＡ,并且发现其中有４个是至今尚未发现的新的ｃＤＮＡ．应用Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ分析,这４个新的ｍＲＮＡ其长度分别为５．０、２．０、１．８和２．２ｋｂ．它们可能在血管平滑肌细胞增殖和心血管病的发病中具有重要意义．     

Effect of adeno-associated virus-mediated transfer of low density lipoprotein receptor gene on treatment of hypercholesterolemia

ＬＤＬＲｐｌａｙｓａｖｉｔａｌｒｏｌｅｉｎｅｌｉｍｉｎａｔｉｎｇｐｌａｓｍａｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ.ＫｎｏｃｋｉｎｇｏｕｔＬＤＬＲｇｅｎｅｃａｎｃａｕｓｅｈｙｐｅｒｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌｅｍｉａ.Ｐｅｒｓｏｎｓｗｉｔｈｆａｍｉｌｉａｌｈｙｐｅｒｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌｅｍｉａ(ＦＨ)ｈａｖｅｂｅｅｎｆｏｕｎｄｔｏｈａｖｅｇｅｎｅｔｉｃｄｅｆｅｃｔｓｉｎＬＤＬＲｇｅｎｅ.ＩｎｔｒｏｄｕｃｉｎｇＬＤＬＲｇｅｎｅｔｏｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌａｎｉｍａｌｓｗｉｔｈｈｙｐｅｒｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌｅｍｉａｃｏｕ…