猪胸腺激素T_1和E_1的纯化和性质

本文首次提出了从猪胸腺中获得两种胸腺激素纯品的方法。这两种激素分别命名为胸腺激素T_1和E_1。T_1和E_1为两种酸性蛋白,经聚丙烯酰胺凝胶电泳检查,证明为均一的蛋白质,它不含糖或核苷酸类物质,经SDS凝胶电泳测定分子量分别为13000和68000,等电点分别为pH4.6和5.2。氨基酸初步分析的结果指出,两种蛋白质中酸性氨基酸的含量达1/4以上,芳香族氨基酸的含量则只有5%左右。根据以上结果判断,胸腺激素T_1和E_1显然不同于任何一种已报道的牛胸腺激素。T_1和E_1均有很强的生物学活性,可以促使不成熟的淋巴细胞分化为成熟的具有免疫功能的T淋巴细胞。     

胸腺激素受体的研究

胸腺激素可促进T淋巴细胞的成熟,因此在细胞免疫功能中起着十分重要的作用,本文报道了以~(125)Ⅰ-胸腺激素T_1的放射受体测定法研究猪胸腺激素T_1受体的初步结果。结果指出胸腺淋巴细胞的表面有胸腺激素受体,在pH6.0,37℃条件下,激素与淋巴细胞孵育60～90分钟,特异性结合可达最高。向结合系统中加入胰岛素、皮质激素或甲状腺素,不影响胸腺激素T_1与受体的结合,证明这种结合是专一的。但在胸腺激素各个组分间,这种专一性并不是很严格,例如胸腺激素E_1的性质与T_1有很大差别,但可以和T_1竞争受体。E_1和T_1可以竞争同一受体是否暗示它们作用于同一T细胞亚群,有待证实。胸腺激素与受体的结合能力与它的生物活力是相关的,T_1的活力随胰蛋白酶的消化而逐渐丧失,相应的T_1与受体结合的能力亦逐渐降低至零。所以用放射受体的方法测定的胸腺激素是代表有生物活力的部分,它的测定范围一般在10～1000毫微克之间。     

胸腺激素受体的研究

胸腺激素可促进T淋巴细胞的成熟,因此在细胞免疫功能中起着十分重要的作用,本文报道了以~(125)Ⅰ-胸腺激素T_1的放射受体测定法研究猪胸腺激素T_1受体的初步结果。结果指出胸腺淋巴细胞的表面有胸腺激素受体,在pH6.0,37℃条件下,激素与淋巴细胞孵育60～90分钟,特异性结合可达最高。向结合系统中加入胰岛素、皮质激素或甲状腺素,不影响胸腺激素T_1与受体的结合,证明这种结合是专一的。但在胸腺激素各个组分间,这种专一性并不是很严格,例如胸腺激素E_1的性质与T_1有很大差别,但可以和T_1竞争受体。E_1和T_1可以竞争同一受体是否暗示它们作用于同一T 细胞亚群,有待证实。胸腺激素与受体的结合能力与它的生物活力是相关的,T_1的活力随胰蛋白酶的消化而逐渐丧失,相应的T_1与受体结合的能力亦逐渐降低至零。所以用放射受体的方法测定的胸腺激素是代表有生物活力的部分,它的测定范围一般在10～1000毫微克之间。     

胸腺激素和细胞免疫

哺乳动物的胸腺是一个内分泌腺,它所产生的胸腺激素作用于胸腺或外周血中的不成熟淋巴细胞,使之转变为成熟 T 淋巴细胞,从而参与机体的细胞免疫。胸腺激素是一族多肽和蛋白质激素,已经分离和命名的就有20多种。胸腺激素作为免疫调节剂,配合其它药物,对治疗一些原发性或继发性免疫缺陷病,具有令人鼓舞的前景。     

海洋游仆虫细胞核染色质组分和组蛋白的初步研究

收集海洋游仆虫(Euplotes vannus)的细胞,制备其染色质。稀酸抽提染色质得到的组蛋白经聚丙烯酰胺凝胶电泳、SDS-聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳、等电点聚焦和氨基酸分析等方法测定,其核染色质中组蛋白占核总蛋白的69.6％;DNA:RNA:组蛋白:非组蛋白为1∶0.022∶1.1∶0.047。染色质的全组蛋白由16种氨基酸组成,碱性氨基酸与酸性氨基酸之比为1.06∶1,是一种弱碱性蛋白质。等电点为pH8.1—9.15,分子量为10,500—22,000道尔顿。     

SINDBIS病毒结构蛋白的肽图

采用双向肽图法对Sindbis病毒糖蛋白(E_1和E_2)及衣壳蛋白(C)的寡肽进行了分析。首先,用不连续的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳对该病毒的三种结构蛋白进行分离,经考马斯蓝染色定位后,分别切取蛋白带。然后,按改良的氯氨T法用~(125)I直接标记胶条中的蛋白质;~(125)I标记的蛋白经TPCK-胰酶消化后,在硅胶板上进行电泳和层析。结果表明,三种结构蛋白的肽图是不同的。但两种糖蛋白分子E_1和E_2具有某些类似之处,因此,它们可能含有一些共同的顺序;与衣壳蛋白C相比则截然不同。说明Sindbis病毒的结构蛋白E_1、E_2和C具有不同的氨基酸排列顺序。     

猪胸腺激素对淋巴细胞DNA复制和转录的刺激作用

胸腺激素可促进T细胞成熟分化,调节免疫细胞功能,因而在免疫中起重要作用。T细胞在成熟过程中,将出现Lyt 1,2,3及绵羊红血球受体等表面标志和TDT。本研究以~3H-TdR和~3H-Leu掺入试验观察猪胸腺激素PTH和DNA复制及蛋白质合成的关系,以玫瑰花结及TDT为标志研究PTH在T细胞成熟中的作用。     

三角鲂和长春鳊肌肉营养成分分析与品质评价

用常规方法测定、分析了三角鲂(Megalobrama tarminalis)和长春鳊(Parabramis pekinensis肌肉中营养成分组成与含量.结果显示,三角鲂肌肉蛋白质、脂肪含量分别为18.19％和3.06％,长春鳊肌肉蛋白质、脂肪含量分别为19.38％和2.89％.三角鲂和长春鳊肌肉中均检测出18种氨基酸,其中包括了8种人体必需氨基酸.三角鲂肌肉中氨基酸总量为76.27％,其中,8种人体必需氨基酸含量为32.17％,占氨基酸总量的42.18％;长春鳊肌肉中氨基酸总量为77.60％,其中,8种人体必需氨基酸含量为31.70％,占氨基酸总量的40.85％.必需氨基酸的构成比例基本符合FAO/WHO的标准.三角鲂肌肉中限制性氨基酸主要为甲硫氨酸加胱氨酸,必需氨基酸指数为63.55,4种呈味氨基酸为氨基酸总量的32.81％;长春鳊肌肉中限制性氨基酸主要为色氨酸,必需氨基酸指数为66.81,4种呈味氨基酸为氨基酸总量的33.80％.脂肪酸中二十碳五烯酸(EPA)与二十二碳六烯酸(DHA)含量均较高,三角鲂为7.96％,长春鳊为3.11％.矿物元素比值合理.以上分析表明,三角鲂和长春鳊均为营养价值、经济价值都较高的优质鱼类,相比而言,三角鲂肌肉脂肪、脂肪酸含量和质量更优,而长春鳊肌肉在蛋白质、氨基酸组成与含量方面更优.     

胸腺及性激素对大鼠肝脏药物代谢酶活力和抗氧化功能调节作用的研究

胸腺是机体发育成熟最早的器官,在胚胎晚期胸腺的皮质和髓质已经形成,出生后胸腺小体数目增多,性成熟时胸腺的结构和功能发育到高峰,此后胸腺开始退化,分泌胸腺激素的能力随年龄的增长逐渐降低。由于胸腺的退化,导致T淋巴细胞的分化、成熟障碍,机体免疫功能衰退,因而有人提出胸腺是控制衰老过程中免疫功能变化的生物钟。     

成熟前后蟾蜍卵母细胞质膜、透明带和卵黄膜蛋白质组份的比较分析

手工分离激素体外诱发成熟的中华大蟾蜍长足卵母细胞质膜和卵黄膜,以及未经激素处理的卵母细胞质膜和透明带,通过SDS-聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳,进行膜蛋白质组份比较分析。考马斯蓝染色显示:未经激素处理的卵母细胞,其质膜主要有六条蛋白带子,分子量范围为25K—250K道尔顿;透明带有四条主要蛋白质带,分子量范围为43K—250K道尔顿。激素作用后的成熟卵球质膜蛋白质组份与处理前相同;由透明带衍生形成的卵黄膜,显著增加一种分子量为20K道尔顿的蛋白质组份。卵母细胞膜表面的碘(~(125)I)化反应和电泳分析结果清楚地表明,不论透明带还是质膜,它们的不同分子量蛋白质带都能强烈地标记上~(125)I;去膜卵球部分的蛋白质成份,没有测出任何~(125)I标记峰。证明以上分析的蛋白质组份确是存在于膜的表面。     

闽产李果实氨基酸组成及其营养分析

为了弄清不同闽产李（Prunus salicina）果实氨基酸含量、组成及营养价值,采用氨基酸自动分析仪 对不同李果实样品中各种氨基酸的含量进行检测,并对其组成进行比较分析。结果表明,李果实含有18种蛋白质氨基酸和3种非蛋白质氨基酸。田黄李的牛磺酸含量与蛋白质氨基酸含量均最高分别为26.54 mg/100 g和496.14 mg/100 g;皇后李的鸟氨酸、药用氨基酸、酸味氨基酸含量以及特殊功效蛋白质氨基酸的比重均最高分别为0.36 mg/100 g、364.67 mg/100 g、298.28 mg/100 g和73.45%;早熟胭脂李的γ-氨基丁酸含量最高为7.98 mg/100 g;大胭脂李的支链氨基酸含量最高为46.77 mg/100 g。李果实中氨基酸种类齐全、含量存在一定的差异,可根据不同的开发利用目标选择合适的品种。     

HIV-1感染的小动物模型

在生物医学领域,用小动物建立有关人类免疫系统的病毒感染模型是一个重要的目标,尤其是HIV-1感染的研究。这是因为HIV-1的易感性局限于人类。C.B-17-scid/scid小鼠由于T细胞受体基因和免疫球蛋白基因缺陷性的重新整合导致缺乏成熟的T、B淋巴细胞。现已在scid小鼠身上建立了两种人淋巴细胞chime-ra。第一种已经取得了成功。人胎儿肝脏和胸腺移植到肾囊内,最终在小鼠体内发育成正常的人胸腺组织。这种带人淋巴组织的scid小鼠被确认为scid-hu小鼠,它的胸腺组织易被HIV-1感染。看起来HIV-1的感染局限于新的胸腺组织。另一个人类淋巴组织s…     

小鼠胸腺上皮细胞系MTEC1产生30kD的MCP-1类趋化因子

髓质型小鼠胸腺上皮细胞系MTEC1自发分泌趋化因子(Chemokines),细胞培养上清先经CPG珠(Controlled-pore glass beads)初步浓缩纯化,再依次经肝素-Sepharose柱亲和层析、阳离子交换FPLC及RP-HPLC分离纯化,得到了一个30kD的蛋白质分子,对淋巴细胞和单核巨噬细胞均有趋化活性。此蛋白分子N端封闭,因而先经甲酸水解得到蛋白片段,分析了其中24个氨基酸的序列,发现其与小鼠MCP-1/JE(Monocyte Chemoattractant Pro-tein-1)完全相同。以上结果说明,MTEC1产生的是mMCP-1/JE类趋化因子。     

超薄层等电聚焦电泳对白血病小鼠胸腺和脾淋巴细胞脱氢酶同工酶的分析

用高分辨力的等电聚焦技术分析615和L615小鼠胸腺及脾淋巴细胞 LDH 同工酶,表明两种小鼠胸腺淋巴细胞同工酶酶谱相同,具有相同等电点的条带含量无显著性差异;而两种小鼠脾淋巴细胞同工酶酶谱不同,某些具有相同等电点的同工酶带含量有显著或极显著性差异。     

温度对胸腺激素理化性质和生物活性的影响

为探讨胸腺激素耐受的最高温度,将胸腺因子Ｄ、胸腺素和胸腺肽加热至１２１℃、１２５℃、１３０℃,直至１９０℃１５ｍｉｎ。结果：加热１４０℃以下１５ｍｉｎ,其色泽、澄明度、紫外吸收峰、旋光度、ＰＨ值、蛋白质含量、相对比移值和活性玫瑰花形成率,与未加热样品比较,均无明显变化;加热至１５０℃以上,上述指标除紫外吸收峰外,余均显著改变。结果表明,胸腺因子Ｄ、胸腺素和胸腺肽能耐受１４０℃１５ｍｉｎ。     

nm23-H1基因转染前后人高转移大细胞肺癌细胞株双向凝胶电泳图谱分析

为了更全面地了解nm23-H1在肺癌中发挥转移抑制的机理,用双向凝胶电泳技术比较人高转移大细胞肺癌细胞株(L9981)和转染nm23-H1基因的人大细胞肺癌细胞株(L9981-nm23-H1)间蛋白表达的差异.利用固相pH梯度双向凝胶电泳分离人高转移大细胞肺癌细胞株(L9981)和转染nm23-H1基因的人大细胞肺癌细胞株(L9981-nm23-H1)的总蛋白,用图像分析软件比较分析以识别细胞间的差异表达蛋白质.结果成功地获得了两株细胞蛋白组分辨率高、重复性好的双向凝胶电泳图谱.软件分析两种细胞的凝胶电泳图谱后发现,在相同分析条件下识别的蛋白质斑点数L9981为902±169个、L9981-nm23-H1为1160±212个.比较L9981和L9981-nm23-H1人大细胞肺癌细胞株的双向凝胶电泳蛋白质图谱后发现6个蛋白质点仅在L9981中有表达,17个蛋白质点仅在L9981-nm23-H1中有表达.此外,发现13个在两种细胞株中均存在,但表达量差异在2倍以上的蛋白质点(P<0.05).结果提示,nm23-H1基因转染引起人高转移大细胞肺癌细胞株蛋白质表达谱的变化,可能是其逆转肺癌侵袭转移的生物学基础.     

对虾巨大神经纤维和巨大神经细胞的游离氨基酸含量

用氨基酸超微量玻璃纸电泳法测定了对虾的单个运动巨大纤维、内侧巨大纤维、神经节大细胞的游离氨基酸含量,其结果如下:1.运动巨大纤维的游离氨基酸含量远高于内侧巨大纤维。运动巨大纤维中门冬氨酸的浓度比谷氨酸的约高一倍,而在内侧巨大纤维两者的浓度未见有明显差别(表1)。将对虾两种巨大纤维的游离氨基酸浓度与其它动物(龙虾、海蟹,乌贼、蟾蜍等)有关资料相比,则见对虾运动巨大纤维的两种酸性氨基酸(门冬氨酸与谷氨酸)含量均明显低于其它海产动物的,其中内侧巨大纤维的甚至与蟾蜍坐骨神经的相近。至于中性氨基酸含量,内侧巨大纤维的亦较其它海产动物神经的为低(表3)。2.神经节大细胞与两种巨大纤维的游离氨基酸含量及成份都有一定差异:无论酸性或中性氨基酸,前者的均显著地高于后者的;γ-氨基丁酸存在于大神经细胞中(含量71.3毫克/100立方厘米细胞),而在两种巨大纤维中均未能测出(表2)。文末对上述结果同对虾神经纤维结构、功能特点的可能联系进行了讨论。     

柴达木盆地西伯利亚白刺和唐古特白刺的氨基酸含量及其营养评价

对柴达木盆地的西伯利亚白刺和唐古特白刺不同部位中氨基酸含量作了分析比较 ,并进行了营养评价。白刺中富含蛋白质 ,含有 18种氨基酸 ,其中有人体必需的 8种氨基酸 ,白刺果汁中的必需氨基酸含量远高于沙棘果汁。两种白刺的蛋白质和各氨基酸在各部位中含量分布相似 ,但因种的差异 ,第一限制性氨基酸稍有差别。     

丁氏双鳍电鳐(Narcine timlei)电器官烟碱型乙酰胆碱受体(AChR)某些生化性质的研究

本文报道了丁氏双鳍电鳐（Narcine timlei）电器官烟碱型乙酰胆碱受体蛋白（AChR）的某些生化性质。纯化的AChR经聚丙烯酰胺梯度（4％—30％）凝胶电泳,呈现一个主要蛋白带,经测定,表观分子量为440,000,与~（125）I-α-Bgt-AChR复合物的分子量相一致。等电聚焦电泳测得纯化AChR和~（125）I-α-BgtAChR的等电点（pI）分别为4.9和5.2;经SDS—聚丙烯酰胺梯度（4％—30％）凝胶电泳,纯化的AChR解离成三个主要亚基蛋白带,它们的表观分子量分别为38,000,42,000和66,000,其中前两个亚基的含量很高,约占总数75％。氨基酸组成分析表明,丁氏双鳍电鳐电器官AChR由18种氨基酸组成,（色氨酸未测定）,其中酸性氨基酸含量很高,占总数的20％以上,说明纯化的AChR是一个复杂结构的酸性蛋白大分子。     

灰树花中一种抗烟草花叶病毒的蛋白质的纯化及其性质

通过硫酸铵分级沉淀、阴离子交换柱层析及凝胶过滤柱层析,从灰树花子实体中分离到了一种具有抑制烟草花叶病毒（TMV）侵染活性的热稳定蛋白——GFAP.经常规凝胶电泳和等电聚焦电泳显示为单一条带,而SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳结果证明该蛋白质含有两个亚基,其分子质量分别为34 ku、40 ku.等电聚焦测定蛋白质pI为3.76,含糖量约为2%.GFAP的40 ku条带N端氨基酸序列为ACCVPSVTEFENAINSDPVM,将其与GenBank中的氨基酸序列检索比较后没有发现同源序列,预示可能为一新的氨基酸序列.GFAP与TMV混合接种心叶烟,当GFAP浓度为32 mg/L时即可完全抑制浓度为10 mg/L的TMV的侵染,而4 mg/L的GFAP对浓度为40 mg/L的TMV的抑制率仍可达60%以上.