60Coγ射线对高免卵黄液中EDS-76病毒灭活的研究

用不同剂量、剂量率的^60Coγ射线对卵黄液中的EDS-76病毒进行辐照,研究了其对病毒的灭活效果和对卵黄抗体(IgY)的影响。结果表明,^60Coγ射线辐照,可以灭活高免卵黄液中的EDS-76病毒,且随辐照剂量、剂量率的增大,灭活率也增高;EDS-76病毒在卵黄液中的D10值为0．57kGy～0．60kGy;6．0kGy的辐照剂量,可以将高免卵黄液中的EDS-76病毒完全灭活,且不影响卵黄抗体效价,该卵黄抗体稳定性好、耐酸、耐热、耐蛋白酶消化。     

60Coγ射线对高免卵黄液中霉形体杀灭作用的研究

用^60Coγ射线处理高免卵黄液,研究了不同剂量、剂量率对霉形体的灭活效果和对卵黄抗体的影响。结果表明,^60Coγ射线可以完全杀灭高免卵黄液中的霉形体,霉形体在卵黄液中的灭活剂量为6．0kGy;10．0kGy以下的辐照剂量不影响卵黄液中蛋白质含量、pH值和活性氧自由基,同时不影响抗体效价。     

60Coγ射线对高免卵黄抗体(IgY)活性和理化特性的影响

利用60Coγ射线照射卵黄抗体,分析了60Coγ射线对IgY的效价、纯度、热稳定性、耐酸性以及酶水解试验等理化特性的影响和不同温度下的保存时间。结果表明照射达10 kGy时,对IgY的效价和纯度无影响;对照组和照射组热稳定性、耐酸性无差异,但照射组更易被酶水解;照射后的IgY明显延长了保存期。     

肺炎支原体抗独特型卵黄抗体的制备与鉴定

目的制备肺炎支原体(M.pneumonia)抗独特型卵黄抗体(vitelline Ab2),鉴定其生物学特性,探讨其作为动物疫苗的潜在应用价值。方法首先制备兔、小鼠抗肺炎支原体抗体(Ab1),筛选出对肺炎支原体有免疫中和性的兔抗体和小鼠抗体,再用兔抗体免疫产蛋鸡,筛选并收集有高效价抗独特型卵黄抗体的鸡蛋,分离蛋黄,破碎蛋黄组织,用蒸馏水稀释和酸化提取抗独特型卵黄抗体。用冷酒精沉淀法纯化抗独特型卵黄抗体。用ELISA检测肺炎支原体抗独特型卵黄抗体(Ab2)的效价、质量浓度和特异性。用竞争抑制试验和动物免疫检测卵黄Ab2β。结果兔抗肺炎支原体抗体的效价为1×10~(-6),Ab1的效价为1×10~(-4)～1×10~(-5);以上抗体均只和肺炎支原体发生免疫反应,不和解脲支原体发生免疫反应;它们和肺炎支原体混合后能中和肺炎支原体的活性,使其不能在条件培养基生长。Ab2效价为1×10~(-5),质量浓度为8 mg/mL。该抗独特型卵黄抗体只和Ab1发生免疫反应,不和小鼠抗解脲支原体抗体发生免疫反应。该Ab2和Ab1结合能被肺炎支原体竞争抑制,且Ab2能诱导小鼠产生肺炎支原体抗体(Ab3),该Ab3能和肺炎支原体发生免疫反应。结论成功制备了特异性强、效价高的β型Ab2,具有作为动物肺炎支原体疫苗的潜在应用价值。     

抗甲型流感鸡卵黄抗体的制备及效价测定

目的:研究抗甲型流感卵黄抗体的制备与纯化,并探讨其效价随免疫时间的变化关系。方法:用灭活甲型流感病毒复合抗原免疫蛋鸡,用PEG6000对卵黄抗体进行分离提取,SDS-PAGE法对其进行分子量测定,考马斯亮蓝法对其含量和纯度进行测定,用微量凝集法检测蛋鸡血清抗体和卵黄抗体的效价。结果:提取得到的卵黄抗体重链分子量为66 kDa、轻链分子量分26 kDa,每毫升卵黄液可得到纯度为95.80%的卵黄抗体9.98mg,回收率93.01%;高效价持续时间90 d以上;免疫蛋鸡血清和卵黄中3种特异性抗体的消长规律基本相似,但抗体水平之间存在明显的差异。结论:采用灭活甲型流感病毒复合抗原免疫蛋鸡可制备高效价、高纯度抗甲型流感卵黄抗体,为卵黄抗体在甲型流感防治中的应用研究奠定了基础。     

金黄色葡萄球菌特异性卵黄抗体的制备及其影响因素

目的:考察金黄色葡萄球菌特异性卵黄抗体制备过程中的影响因素.方法:以灭活的金黄色葡萄球菌为抗原,采用不同的浓度(108cfu/mL,109cfu/mL,1010cfu/mL)、在不同免疫佐剂(商品弗氏佐剂和自制弗氏佐剂)作用下,对不同日龄(120天和300天)的蛋鸡进行免疫.免疫后收集鸡蛋,蛋黄用6倍体积水稀释,采用ELISA法测定抗体效价.结果:抗原浓度为109cfu/mL所得抗体效价最高;免疫120日龄蛋鸡获得抗体效价高于免疫300日龄蛋鸡所得抗体效价;在抗原浓度和蛋鸡日龄相同的情况下,商品弗氏佐剂比自制具有更好的免疫增强作用.结论:特异性卵黄抗体制备受多种因素的影响,抗原浓度、蛋鸡日龄、佐剂质量均对卵黄中特异性抗体水平有影响.     

辐照保藏豆制品的研究

豆制品用聚乙烯复合袋分装后,经4kGy、6kGy、8kGy、10kGy的^60Co γ-射线辐照,分别在5℃、25℃条件下贮藏,定期对其进行微生物、感官及营养成分指标检测。经检测分析,豆制品在一定剂量范围内辐照,效果良好,无异味,降低了微生物数量,对营养品质无不良影响,延长了货架期。研究结果表明,用6kGy～8kGy的剂量的γ射线辐照保藏豆制品效果最佳。     

艰难梭菌毒素B羧基端的表达与卵黄抗体制备

目的:在大肠杆菌中可溶性表达艰难梭菌毒素B羧基端(TcdB-c),免疫产蛋鸡,获得针对TcdB-c的卵黄抗体(IgY)。方法:人工合成TcdB-c的基因,将其克隆至pET32b(+)载体中,转化大肠杆菌BL21(DE3),诱导表达产物经金属螯合层析纯化,凝血酶酶切后得到目的蛋白TcdB-c;利用兔红细胞凝集和兔肠袢实验检测目的蛋白活性,用TcdB-c免疫产蛋鸡制备鸡卵黄抗体,分离纯化卵黄抗体并经ELISA测定抗体效价,用兔肠袢实验检测抗体的中和活性。结果:构建了TcdB-c的重组表达载体,诱导表达的融合蛋白相对分子质量约为79 000,经凝血酶酶切后的相对分子质量约65 000;目的蛋白免疫产蛋鸡后获得效价为1∶20 000的抗TcdB-c卵黄抗体,且该抗体可以中和TcdB-c对兔小肠的毒性作用。结论:获得了具有生物学活性的TcdB-c,并制备了针对TcdB-c的鸡卵黄抗体,为利用基因工程方法防治艰难梭菌感染打下了基础。     

艰难梭菌毒素B羧基端的表达与卵黄抗体制备简

目的：在大肠杆菌中可溶性表达艰难梭菌毒素B羧基端（TcdB-e）,免疫产蛋鸡,获得针对TcdB-c的卵黄抗体（IgY）。方法：人工合成TcdB-c的基因,将其克隆至pET32b（＋）载体中,转化大肠杆菌BL21（DE3）,诱导表达产物经金属螯合层析纯化,凝血酶酶切后得到目的蛋白TcdB-c;利用兔红细胞凝集和兔肠袢实验检测目的蛋白活性,用TcdB-c免疫产蛋鸡制备鸡卵黄抗体,分离纯化卵黄抗体并经ELISA测定抗体效价,用兔肠袢实验检测抗体的中和活性。结果：构建了TcdB-c的重组表达载体,诱导表达的融合蛋白相对分子质量约为79000,经凝血酶酶切后的相对分子质量约65000;目的蛋白免疫产蛋鸡后获得效价为1：20000的抗TcdB-C卵黄抗体,且该抗体可以中和TcdB-c对兔小肠的毒性作用。结论：获得了具有生物学活性的TcdB-C,并制备了针对TcdB-c的鸡卵黄抗体,为利用基因工程方法防治艰难梭菌感染打下了基础。     

60Co-γ射线辐照人体胎盘羊膜保鲜研究及应用

新鲜人体胎盘羊膜是一种新型的生物敷料.具有来源广泛、成本低,贮存使用方便,对烧伤创面有良好的保护作用,促进创面及早封闭、愈合等优点.本文对离体8小时之内的鲜人体胎盘羊膜辐照灭菌、保鲜方法及临床应用进行了研究.供试样品经清洗、灭菌、脱脂、脱水等预处理后,制备成15×10cm2的羊膜,分装于尼龙-聚乙烯复合袋中,抽真空封闭包装待辐照.辐照处理由黑龙江省农科院原子能利用研究所具有微机自动控制及旋转辐照台的60Co-γ射线辐照10-14kGy后,微生物检测仍为阳性,达到16kGy吸收剂量以上时,微生物检测为阴性.常温(平均15℃)条件下贮存180天,0-14kGy处理组微生物检测阳性,并发生不同程度的胀袋、变色.16-24kGy处理组虽然微生物检测为阴性,但颜色发生褐变并出现异味而失去应用价值.低温(平均5℃)避光条件下贮存180天,16-24kGy处理组微生物检测为阴性,颜色、气味与新鲜对照样品无显著性差异.经哈尔滨医科大学临床应用16例病人,26个烧伤创面的覆盖试验,保鲜的人体胎盘羊膜止痛率100%,创面渗出明显减少,防止了创面的枯干及病原微生物的二次污染,使"间生态组织"迅速恢复生机而避免发生坏死,创面愈合后表面光滑,无明显瘢痕增生.     

甘蔗体细胞诱变育种研究

用~60Co-γ射线,甲基磺酸乙酯(EMS)处理组培甘蔗愈伤组织,可提高再生植株的变异机率,处理愈伤组织再生植株性状:株高、茎径、锤度等明显偏离正常的正态分布,差异达1%显著标准,EMS处理较~60Co-γ射线变化大。连续试验观察表明:一些变异性状具有遗传性。用~60Co-γ射线或甲基磺酸乙酯处理甘蔗愈伤组织可作为一种甘蔗体细胞诱变育种手段加以利用。     

60Co-γ辐照在秀珍菇中的应用研究

采用不同剂量的^60 Co-γ射线辐照秀珍菇进行贮藏保鲜试验,结果表明：常温下210辐照,并采用聚乙烯塑料袋分装,可以延长鲜菇的保鲜期约10天。通过对维生素C和氨基酸含量的测定试验表明：辐处理前后无明显变化。辐照灭菌与常规高温灭菌相比,秀珍菇鲜菇产量高于对照。菌丝在经辐照灭菌的培养料上生长快,污染率下降,而且出菇快。     

^60Co-γ射线辐照降解的壳聚糖对玉米萌发及生长的影响

采用不同剂量60Co-γ射线辐照降解壳聚糖,研究了其降解产物对玉米生长的调节作用.研究发现,壳聚糖辐照产物可提高玉米种子发芽率,促进玉米幼苗生长,提高玉米抗逆相关生理生化指标.辐照剂量为200 kGy,壳聚糖辐照产物溶液浓度为3.0 mg/mL时,可显著提高玉米种子萌发率和促进芽长;浓度为4.0 mg/mL时,显著促进主根长度;浓度为2.0 mg/mL～3.0 mg/mL,苯丙氨酸解氨酶 (PAL)活性显著高于对照.当辐照剂量为200 kGy～400 kGy,产物溶液浓度为2.0 mg/mL～4.0 mg/mL时,能显著提高胚乳中α-淀粉酶活性和幼苗中叶绿素含量;浓度为2.0 mg/mL～3.0 mg/mL时,显著提高幼苗过氧化物酶 (POD) 的活性.综合多种影响因素得出:利用壳聚糖辐照产物开发玉米促生抗逆剂的适宜60Co-γ射线辐照剂量为200 kGy～300 kGy,浓度为2.0 mg/mL～3.0 mg/mL.     

60Co-γ 诱变皖麦50HMW—GS变异的筛选及其M3代品质分析

为了探讨60Co-γ 射线对小麦HMW—GS组成的变异,以及变异后代的稳定性和品质变异效应,获得优质的种质资源,本试验用200Gy 60Co-γ射线辐照皖麦50于种子,SDS—PAGE法对M2代HMW—GS组成进行变异筛选,并对M3代HMW—GS组成变异稳定性进行鉴定和GMP含量、GMP粒度、部分营养及加工品质进行测定。结果表明：655株M2群体中,有1个单株HMW—GS组成发生变异,变异率0．15％;HMW—GS组分由亲本的7＋9／2＋12变为1／7＋9／2＋12,并在M3代保持稳定;M3代5个变异穗行,蛋白质含量、GMP含量、GMP／Pr均比皖麦50提高,GMP粒度分布范围扩大,粒径大于10．28μm的比例增加。     

紫外线和60Co辐照诱变选育高效嗜酸氧化亚铁硫杆菌

依次利用紫外线和60Co-γ射线辐照诱变的方法对嗜酸氧化亚铁硫杆菌进行诱变,选育高效嗜酸氧化亚铁硫杆菌菌株.结果表明,紫外诱变可以有效提高嗜酸氧化亚铁硫杆菌的Fe2+氧化速率,最佳紫外线诱变时间为240 s.诱变后菌株的Fe2+氧化速率从0.273 g/L/h提高到了0.312 g/L/h.继续利用60Co-γ射线进行...     

Effect of gamma irradiation on shelf life and bacterial and viral loads in hard-shelled clams (Mercenaria mercenaria).

The feasibility of using 60Co gamma irradiation to inactivate total coliforms, fecal coliforms, Escherichia coli, Clostridium perfringens, and F-coliphage in hard-shelled clams, Mercenaria mercenaria, was investigated. The results of three trials indicated average D10 values of 1.32 kGy for total coliforms, 1.39 kGy for fecal coliforms, 1.54 kGy for E. coli, 2.71 kGy for C. perfringens, and 13.50 kGy for F-coliphage. Irradiation doses of > 0.5 kGy were significantly lethal to the shellfish.     

Inactivation of Escherichia coli O157:H7, salmonellae, and Campylobacter jejuni in raw ground beef by gamma irradiation.

Raw ground beef patties inoculated with stationary-phase cells of Escherichia coli O157:H7, salmonellae, or Campylobacter jejuni were subjected to gamma irradiation (60Co) treatment, with doses ranging from 0 to 2.52 kGy. The influence of two levels of fat (8 to 14% [low fat] and 27 to 28% [high fat]) and temperature (frozen [-17 to -15 degrees C] and refrigerated [3 to 5 degrees C]) on the inactivation of each pathogen by irradiation was investigated. In ascending order of irradiation resistance, the D10 values ranged from 0.175 to 0.235 kGy (C. jejuni), from 0.241 to 0.307 kGy (E. coli O157:H7), and from 0.618 to 0.800 kGy (salmonellae). Statistical analysis revealed that E. coli O157:H7 had a significantly (P < 0.05) higher D10 value when irradiated at -17 to -15 degrees C than when irradiated at 3 to 5 degrees C. Regardless of the temperature during irradiation, the level of fat did not have a significant effect on the D10 value. Salmonellae behaved like E. coli O157:H7 in low-fat beef, but temperature did not have a significant effect when the pathogen was irradiated in high-fat ground beef. Significantly higher D10 values were calculated for C. jejuni irradiated in frozen than in refrigerated low-fat beef. C. jejuni was more resistant to irradiation in low-fat beef than in high-fat beef when treatment was at -17 to -15 degrees C. Regardless of the fat level and temperature during inactivation, these pathogens were highly sensitive to gamma irradiation.(ABSTRACT TRUNCATED AT 250 WORDS)